巨噬細胞是免疫系統(tǒng)中的重要組成部分，負責識別、吞噬和清除外來病原體及細胞碎片。它們在調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)、組織修復(fù)和穩(wěn)態(tài)維持中發(fā)揮關(guān)鍵作用。研究巨噬細胞的功能，對于理解各種疾病的發(fā)病機制、開發(fā)新的治療策略及改善臨床療效具有重要意義。巨噬細胞不僅參與感染的防御，還在自體免疫、腫瘤發(fā)生和心血管疾病等病理過程中扮演著復(fù)雜且多樣的角色。通過揭示巨噬細胞在不同生理和病理狀態(tài)下的功能變化，研究能夠為新型免疫療法的設(shè)計提供依據(jù)，促進個性化醫(yī)療的發(fā)展。因此，推動巨噬細胞功能研究是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究中的一項重要任務(wù)，具有廣泛的應(yīng)用前景。
巨噬細胞常規(guī)研究可分為體內(nèi)和體外兩種。體內(nèi)通過對比實驗藥物作用下免疫缺陷小鼠模型（去除小鼠巨噬細胞）及正常小鼠中腫瘤的生長情況，確定實驗藥物對腫瘤相關(guān)巨噬細胞的浸潤及亞型分布的影響。體外可分為兩種：1.巨噬細胞體外分化、分選，通過趨化實驗檢測癌細胞對巨噬細胞募集作用。2.對細胞外泌體進行提取并與巨噬細胞共同培養(yǎng)后，檢測巨噬細胞相關(guān)蛋白的表達情況，探究外泌體對巨噬細胞分化及遷移的影響。
翌圣生物針對巨噬細胞研究提供完整試劑解決方案，從巨噬細胞提取、巨噬細胞構(gòu)建、巨噬細胞清除模型小鼠構(gòu)建、巨噬細胞各種作用機制研究、免疫學(xué)功能驗證等各環(huán)節(jié)實驗解決方案，助力藥物研究和巨噬細胞功能研究，助您發(fā)表高質(zhì)量的學(xué)術(shù)論文。
巨噬細胞清除小鼠模型構(gòu)建
巨噬細胞的清除，是全面了解巨噬細胞在病理條件下功能的一種十分有力的研究方法，氯膦酸鹽脂質(zhì)體（Clodronate Liposomes）是目前最為成熟，方便，經(jīng)濟的一種巨噬細胞清除工具，可以有效的清除動物體內(nèi)不同組織部位和血液中的巨噬細胞。
氯膦酸二鈉（Clodronate）是一種雙膦酸鹽藥物，在臨床上主要用于癌癥引起的溶骨性骨轉(zhuǎn)移、骨質(zhì)疏松癥和高鈣血癥。其作用機理是氯膦酸二鈉在細胞內(nèi)代謝成不可水解的ATP類似物，抑制線粒體中的ADP/ATP轉(zhuǎn)運機制，從而阻斷線粒體呼吸鏈誘導(dǎo)細胞凋亡。但是該藥物親脂性低，不能跨細胞轉(zhuǎn)運，在口服或是靜脈給予游離藥物后，2小時后即可達半衰期，48小時內(nèi)80%藥物隨尿液排出。
脂質(zhì)體是單層或多層脂質(zhì)雙分子層的球形囊泡，其主要成分是磷脂和膽固醇。脂質(zhì)體本身具有雙分子層結(jié)構(gòu)，組成成分無毒性，因此可以作為運輸分子物質(zhì)的載體，它通過與細胞膜結(jié)合的方式將分子物質(zhì)運輸?shù)郊毎麅?nèi)。
氯膦酸鹽包裹進磷脂體的水相中形成氯膦酸鹽脂質(zhì)體，氯膦酸鹽不能自由的通過脂質(zhì)體磷脂體雙分子層。注射到生物體內(nèi)后，氯膦酸鹽脂質(zhì)體會被巨噬細胞吞噬，在巨噬細胞內(nèi)的溶酶體磷酸酶的作用下，溶解在脂質(zhì)體內(nèi)的氯膦酸鹽會被逐步釋放出來并在細胞內(nèi)積累，當達到一定濃度時，巨噬細胞將會受到不可逆損傷，誘發(fā)細胞凋亡。死亡細胞內(nèi)的氯膦酸鹽會被釋放到細胞外，隨尿液排出體外。
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
專題詳解 |
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Clodronate Liposomes (From Vrije Universiteit Amsterdam) 體內(nèi)巨噬細胞清除劑 |
5 mL/10 mL |
巨噬細胞清除劑--氯膦酸鹽脂質(zhì)體(Clodronate Liposomes)
巨噬細胞清除小課堂： |
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Control Liposomes( PBS ) 體內(nèi)巨噬細胞清除劑空白脂質(zhì)體對照 |
5 mL/10 mL |
同時為了鑒定巨噬細胞清除小鼠造模成功，需要對小鼠組織樣本進行流式或WB檢測，目前我司提供鼠抗CD45、F4/80、CD11b、CD163、CD206等單克隆抗體及完整WB試劑解決方案，具體可進入官網(wǎng)選購：翌圣生物-抗體選購。專題指導(dǎo)：CD分子流式抗體選購指南
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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Purified anti-human/mouse CD11b |
100 μg/1 mg |
FITC anti-human CD45 |
25 T/100 T |
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FITC anti-human/mouse CD11b |
25 T/100 T |
PE-Cy5 anti-human CD45 |
25 T/100 T |
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APC anti-human/mouse CD11b |
25 T/100 T |
Alexa Fluor 647 anti-human CD45 |
25 T/100 T |
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PE-Cy7 anti-human/mouse CD11b |
25 T/100 T |
PE-Cy7 anti-human CD45 |
25 T/100 T |
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APC-Cy7 anti-human/mouse CD11b |
25 T/100 T |
APC-Cy7 anti-human CD45 |
25 T/100 T |
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PE anti-human/mouse CD11b |
25 T/100 T |
PE anti-human CD45 |
25 T/100 T |
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PerCP-Cy5.5 anti-human/mouse CD11b |
25 T/100 T |
PerCP anti-human CD45 |
25 T/100 T |
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Pacific Blue anti-human/mouse CD11b |
25 T/100 T |
PerCP-Cy5.5 anti-human CD45 |
25 T/100 T |
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PE-Cy5 anti-human/mouse CD11b |
25 T/100 T |
Pacific Blue anti-human CD45 |
25 T/100 T |
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APC anti-human CD163 |
25 T/100 T |
Alexa Fluor 700 anti-human CD45 |
25 T/100 T |
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PE anti-human CD163 |
25 T/100 T |
APC anti-human CD45 |
25 T/100 T |
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PE anti-mouse CD163 |
25 T/100 T |
Purified anti-mouse CD45 |
100 μg/1 mg |
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FITC anti-human CD206 |
25 T/100 T |
FITC anti-mouse CD45 |
25 T/100 T |
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APC anti-human CD206 |
25 T/100 T |
APC anti-mouse CD45 |
25 T/100 T |
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PE-Cy7 anti-human CD206 |
25 T/100 T |
PE-Cy5 anti-mouse CD45 |
25 T/100 T |
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PE anti-human CD206 |
25 T/100 T |
Alexa Fluor 700 anti-mouse CD45 |
25 T/100 T |
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PerCP-Cy5.5 anti-human CD206 |
25 T/100 T |
PE-Cy7 anti-mouse CD45 |
25 T/100 T |
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FITC anti-mouse CD206 |
25 T/100 T |
PE anti-mouse CD45 |
25 T/100 T |
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PerCP-Cy5.5 anti-mouse CD206 |
25 T/100 T |
PE-Cy5.5 anti-mouse CD45 |
25 T/100 T |
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PE anti-mouse CD206 |
25 T/100 T |
Pacific Blue anti-mouse CD45 |
25 T/100 T |
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APC anti-mouse CD206 |
25 T/100 T |
APC anti-mouse F4/80 |
25 T/100 T |
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Purified anti-human CD45 |
100 μg/1 mg |
FITC anti-mouse F4/80 |
25 T/100 T |
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Purified anti-human CD45 |
100 μg/1 mg |
PE anti-mouse F4/80 |
25 T/100 T |
巨噬細胞誘導(dǎo)
噬細胞的體外極化是指在實驗室條件下，通過特定的刺激因子誘導(dǎo)巨噬細胞向不同功能狀態(tài)的轉(zhuǎn)變。這一過程通常分為兩大類： M1型及M2型[1]。M1型巨噬細胞在干擾素-γ等刺激下產(chǎn)生，產(chǎn)生促炎癥細胞因子，抵抗病原入侵但也造成機體損傷。而M2型巨噬細胞則在IL-4和IL-13等細胞因子的作用下極化，主要分泌抗炎癥細胞因子，并在組織修復(fù)與重建和腫瘤的形成過程中發(fā)揮作用[2]。體外極化不僅為研究巨噬細胞的功能和機制提供了模型，同時也為探討其在疾病中的作用和治療策略奠定了基礎(chǔ)。
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細胞來源 |
培養(yǎng)基 |
初始加入 |
M1極化 |
M2極化 |
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THP-1細胞 |
RPMI 1640 |
100 ng/mL PMA |
20 ng/mL IFN-γ 100 ng/mL LPS |
20 ng/mL IL-4 20 ng/mL IL-13 |
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單核細胞 |
RPMI 1640 |
M1:50 ng/mL GM-CSF M2: 50 ng/mL M-CSF |
10 ng/mL LPS 50 ng/mL IFN-γ |
M2a: 20 ng/mL IL-4 M2b: IgG+LPS M2c: 20 ng/mL TGF-β1或10 ng/mL IL-10 |
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骨髓 |
IMDM |
10-50 ng/mL M-CSF |
100 ng/mL LPS (可加50 ng/mL IFN-γ） |
10 ng/mL IL-4 (可加10 ng/mL IL-13） |
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RAW264.7細胞 |
DMEM |
/ |
100 ng/mL LPS |
20 ng/mL IL-4（可加20 ng/mL IL-10） |
相關(guān)細胞因子產(chǎn)品選購
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名稱 |
種屬/來源 |
貨號 |
規(guī)格 |
專題詳解 |
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GM-CSF |
Human |
5μg/50μg/100μg/500μg |
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Mouse |
5μg/50μg/100μg/500μg |
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M-CSF |
Human |
10μg/100μg/500μg |
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Mouse |
10μg/50μg/100μg/500μg |
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10μg/100μg/1mg |
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IFN-γ |
Human |
20μg/50μg/100μg/500μg |
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Mouse |
5μg/50μg/100μg/500μg |
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IL-4 |
Human |
10μg/50μg/1mg |
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Mouse |
10μg/50μg/100μg/500μg |
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IL-10 |
Human |
2μg/10μg/50μg/100μg |
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Mouse |
2μg/10μg/50μg/100μg |
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IL-13 |
Human |
2μg/10μg/50μg/100μg |
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Mouse |
10μg/50μg/100μg/500μg |
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TGF-β1 |
Human/Mouse |
2μg/10μg/100μg |
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LPS誘導(dǎo)劑 |
E.coli O55:B5 |
5mg/10mg |
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E.coli O111:B4 |
5mg/10mg |
巨噬細胞培養(yǎng)
細胞培養(yǎng)是一項重要的生物技術(shù)，涉及在控制的實驗室環(huán)境中，以特定的營養(yǎng)培養(yǎng)基和適宜的溫度、濕度及氣體成分，培育和繁殖細胞。這一技術(shù)可以用于多種細胞類型，廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)研究、藥物開發(fā)、疫苗生產(chǎn)及疾病模型建立。在細胞培養(yǎng)過程中，研究人員需要監(jiān)測細胞的生長狀態(tài)、代謝活動及其基因和蛋白質(zhì)的表達變化，以便進行相關(guān)的實驗和分析。通過細胞培養(yǎng)，科學(xué)家能夠深入了解細胞的生物學(xué)特性，為生物醫(yī)學(xué)研究提供重要的實驗基礎(chǔ)。
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實驗步驟 |
貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
專題詳解 |
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組織消化 |
Collagenase I 膠原酶I型 |
100 mg |
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Collagenase II 膠原酶II型 |
100 mg |
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Collagenase III 膠原酶III型 |
100 mg |
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Collagenase IV膠原酶IV型 |
100 mg |
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Collagenase V膠原酶V型 |
100 mg |
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Cebrary®Tissue Digestion Solution 組織消化液 |
10 mL/30 mL/100 mL |
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細胞培養(yǎng) |
Fetal Bovine Serum Gold 胎牛血清(特級) |
50 mL/500 mL |
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Fetal Bovine Serum Gold Plus 胎牛血清（特級） |
500 mL |
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Fetal Bovine Serum Gold Pro 胎牛血清（特級） |
10mL/50 mL/100mL/500 mL |
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DMEM高糖培養(yǎng)基(含L-谷氨酰胺,丙酮酸鈉110mg/L；不含HEPES,雙抗) |
500 mL |
RAW264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)貼壁細胞培養(yǎng)全攻略
細胞培養(yǎng)產(chǎn)品選購指南
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RPMI1640培養(yǎng)基(含L-谷氨酰胺；不含丙酮酸鈉,HEPES,雙抗) |
500 mL |
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黑膠蟲清除劑(500×) |
400 μL |
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Mycoplasma Elimination Reagent 支原體去除試劑 |
100 μL/1 mL/5 mL |
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L-谷氨酰胺 |
100 g |
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細胞培養(yǎng)用青霉素-鏈霉素(雙抗) |
100 mL |
外泌體研究
外泌體直徑通常在30到150納米之間，它們由多種細胞類型產(chǎn)生，并在細胞間傳遞生物信息，如蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和RNA等。外泌體在細胞通訊、免疫反應(yīng)和腫瘤轉(zhuǎn)移等生物過程中發(fā)揮重要作用，因此它們被視為潛在的疾病標志物和治療載體。近年來，隨著技術(shù)的進步，外泌體的分離、鑒定和功能分析手段不斷發(fā)展，使得研究者能夠更深入地了解它們在各類疾?。ㄈ绨┌Y、神經(jīng)退行性疾病和心血管疾?。┲械淖饔茫瑸榫珳梳t(yī)學(xué)和新型治療策略的開發(fā)提供了重要依據(jù)。已有研究表明巨噬細胞遷移受到細胞外環(huán)境的變化的影響，因此關(guān)于外泌體對巨噬細胞的影響是目前研究的一個重要方向。
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實驗步驟 |
貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
專題詳解 |
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Western blot |
RIPA裂解液(強） |
100 mL |
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蛋白酶抑制劑Cocktail, EDTA-free,100×DMSO儲液 |
1 mL/10×1 mL/100×1 mL |
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BCA蛋白濃度測定試劑盒（增強型） |
500 T/2500 T/5000 T |
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三色預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標準（8-180 kDa） |
250 μL/2×250 μl/10×250 μl |
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PAGE凝膠快速制備試劑盒 |
125 mini gels |
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10×快速轉(zhuǎn)膜液 |
500 mL |
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0.45 μm PVDF 膜（1 卷, 30 cm x 3 m） |
1 卷 |
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快速封閉液 |
100 mL/500 mL |
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ECL化學(xué)發(fā)光超敏顯色試劑盒 |
100 mL/500 mL |
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PET 2 兩塊膠蛋白迷你垂直電泳槽 |
套 |
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細胞因子ELISA試劑盒 |
Human IFN-γ ELISA Kit |
48 T/96 T |
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Human IL-1β ELISA Kit |
48 T/96 T |
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Human IL-6 ELISA Kit |
48 T/96 T |
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Human TNF-α ELISA Kit |
48 T/96 T |
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Mouse IL-18 ELISA Kit |
48 T/96 T |
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Mouse IFN-γ ELISA Kit |
48 T/96 T |
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Mouse IL-1β ELISA Kit |
48 T/96 T |
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Mouse IL-6 ELISA Kit |
48 T/96 T |
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Mouse TNF-α ELISA Kit |
48 T/96 T |
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分選磁珠 |
人CD3分選磁珠 |
2 mL |
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人CD4分選磁珠 |
2 mL |
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人CD8分選磁珠 |
2 mL |
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37607ES |
小鼠CD4分選磁珠 |
2 mL |
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37611ES |
小鼠CD8分選磁珠 |
2 mL |
動物模型
不同學(xué)者會研究巨噬細胞在小鼠不同模型中相關(guān)機制，例如探究肥大細胞(MC)在炎癥性腸病過程中的作用和調(diào)節(jié)機制[3]；在小鼠Lewis肺癌模型（LLC1s）和小鼠乳腺癌轉(zhuǎn)移模型（MMTV-PyMT）中研究巨噬細胞作用機制等[4]。翌圣生物針對潰瘍性結(jié)腸炎、急性肝損傷、胰腺炎、糖尿病、帕金森、類風濕關(guān)節(jié)炎等模型提供相對應(yīng)試劑方案。
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模型名稱 |
貨號 |
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
專題詳解 |
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潰瘍性結(jié)腸炎 |
Dextran Sulfate Sodium Salt(DSS) 結(jié)腸炎建模用葡聚糖硫酸鈉鹽 |
25 g/100 g/500 g/1 kg |
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急性肝損傷 |
Thioacetamide 硫代乙酰胺 |
25 g/100 g/500 g |
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溶血性貧血 |
APH乙酰苯肼(1-Acetyl-2-Phenylhydrazine) 1-乙?；?2-苯肼 |
25 g/100 g/500 g |
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胰腺炎 |
Taurocholic acid Sodium Salt?；悄懰徕c |
1 g/5 g/25 g |
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Caerulein 雨蛙素 |
1 mg/5×1 mg/10×1 mg |
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L-Arginine L-精氨酸 |
100 g/500 g |
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糖尿病 |
STZ鏈脲佐菌素 Streptozocin 糖尿病模型建模試劑 |
100 mg/500 mg/1 g |
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Alloxan Monohydrate 阿脲(四氧嘧啶)一水合物 |
10 g/25 g |
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類風濕關(guān)節(jié)炎 |
Complete Freund's Adjuvant 弗氏完全佐劑(CFA) |
10 mL/5×10 mL |
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Incomplete Freund's Adjuvant 弗氏不完全佐劑(IFA) |
10 mL/5×10 mL |
動物組織切片觀察
動物組織切片觀察主要分為組織準備、固定組織、組織包埋、切片、染色、顯微鏡觀察幾大步驟，可以幫助研究人員觀察和研究動物的細胞和組織結(jié)構(gòu)，并進一步了解其功能和相關(guān)的生物學(xué)過程。它在生物學(xué)研究中起著重要的作用為科學(xué)家們提供了對動物組織結(jié)構(gòu)和功能進行深入研究的手段和工具。
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實驗步驟 |
貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
專題詳解 |
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組織固定和切片 |
10%中性福爾馬林溶液 |
100 mL/500 mL |
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4%多聚甲醛固定液 |
100 mL/500 mL |
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OCT冰凍切片包埋劑 |
118 mL |
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組織染色觀察 |
蘇木素染色液 |
50 mL/100 mL/500 mL |
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蘇木素伊紅(H&E)染色試劑盒 |
2×100 mL |
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阿利新藍-過碘酸雪夫(AB-PAS)染色液 |
6×50 mL/6×100 mL |
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Masson染色試劑盒 |
80 mL/160 mL/400 mL |
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天狼星紅染色液 |
2×50 mL |
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磷鎢酸負染色液(2%, pH7.0) |
100 mL |
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Fast Wright's-Giemsa Stain 快速瑞氏-姬姆薩染液 |
1Kit (150 mL)/ 1Kit (300mL) |
[1] Gordon S. Alternative activation of macrophages. Nat Rev Immunol. 2003;3(1):23-35. doi:10.1038/nri978
[2] Wang LX, Zhang SX, Wu HJ, Rong XL, Guo J. M2b macrophage polarization and its roles in diseases. J Leukoc Biol. 2019 Aug;106(2):345-358. doi: 10.1002/JLB.3RU1018-378RR
[3] He Z, Song J, Hua J, et al. Mast cells are essential intermediaries in regulating IL-33/ST2 signaling for an immune network favorable to mucosal healing in experimentally inflamed colons. Cell Death Dis. 2018;9(12):1173. Published 2018 Dec 5. doi:10.1038/s41419-018-1223-4
[4] Chen S, Saeed AFUH, Liu Q, et al. Macrophages in immunoregulation and therapeutics. Signal Transduct Target Ther. 2023;8(1):207. Published 2023 May 22. doi:10.1038/s41392-023-01452-1
