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        1. Mouse IL-1β ELISA Kit 小鼠白介素1β ELISA檢測試劑盒

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          產(chǎn)品說明書

          FAQ

          COA

          已發(fā)表文獻(xiàn)

           

          小鼠白介素 (Mouse IL-1β/IL-1F2)作為IL-1家族主要成員,也主要由活化的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生,并通過誘導(dǎo)IL-2釋放、促進(jìn)B細(xì)胞成熟與增殖以及成纖維細(xì)胞生長因子激活來刺激胸腺細(xì)胞增殖,也可刺激滑膜細(xì)胞釋放前列腺素及各種膠原酶。IL-1β在免疫和炎癥反應(yīng)、骨重塑、發(fā)熱、碳水化合物代謝等生理現(xiàn)象起著核心作用。異常的IL-1β信號通過促進(jìn)上皮向間充質(zhì)轉(zhuǎn)化、增加炎性細(xì)胞因子和趨化因子的產(chǎn)生、誘導(dǎo)免疫抑制和細(xì)胞凋亡抵抗以及增加白細(xì)胞粘附來驅(qū)動腫瘤發(fā)生。IL-1β導(dǎo)致炎癥的發(fā)生疾病包括糖尿病、關(guān)節(jié)炎和動脈粥樣硬化,此外IL-1β的異常激活也與大多數(shù)癌癥類型的不良預(yù)后有關(guān),包括結(jié)腸癌、肺癌和乳腺癌等。

          翌圣Mouse IL-1β/IL-1F2 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒,用于定量測定血清、血漿中的小鼠白介素1β(Mouse IL-1β/IL-1F2)。特異性抗小鼠白介素1β抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本,經(jīng)過孵育,樣本中存在的小鼠白介素1β與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入檢測抗體孵育結(jié)合,經(jīng)洗滌,再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中小鼠白介素1β的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。

           

          產(chǎn)品信息

          貨號

          98024ES48 / 98024ES96 

          規(guī)格

          48 T / 96 T

          檢測范圍

          15.63-1000 pg/mL

          檢測方法

          雙抗夾心法

          檢測時長

          4.5小時

          靈敏度

          11.46 pg/mL

          稀釋線性

          89 - 123%

          回收率

          78 - 107%

          板內(nèi)差

          4.0%

          板間差

          3.9%

           

          實驗數(shù)據(jù)

          1. 標(biāo)曲數(shù)據(jù)

          數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,生成的標(biāo)曲用于實驗數(shù)據(jù)分析

          1. 靈敏度檢測

          IL-1β/IL-1F2的最低檢測限為11.46 pg/mL,通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計算得出。

          1. 精密度檢測

          酶標(biāo)板內(nèi)精密度

          3個已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測定8次,評估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。

          酶標(biāo)板間精密度

          3個已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測24次,評估酶標(biāo)板間的精密度。

          項目

          板內(nèi)精密度

          板間精密度

          樣本

          1

          2

          3

          1

          2

          3

          10

          10

          10

          30

          30

          30

          平均值

          489.74

          119.91

          29.16

          476.65

          119.32

          30.79

          標(biāo)準(zhǔn)差

          23.16

          5.94

          0.74

          22.08

          5.57

          0.81

          變異系數(shù)%

          4.7

          5.0

          2.5

          4.6

          4.7

          2.6

          1. 回收率檢測

           通過不同水平的IL-1β/IL-1F2添加于樣本中來測定回收率,其回收率如下:

          樣本類型

          平均回收率(%)

          范圍(%)

          血清

          94.6

          81.2-107.6

          血漿

          82.8

          78.0-91.0

          細(xì)胞培養(yǎng)上清

          87.9

          81.4-94.1

          1. 稀釋線性檢測

          血清稀釋比例

          平均期望值(%)

          范圍(%)

          1:02

          103.0

          98.1-106.9

          1:04

          105.5

          101.3-106.6

          1:08

          111.3

          105.2-123.3

          1:16

          94.5

          89.5-98.3

           

          血漿稀釋比例

          平均期望值(%)

          范圍(%)

          1:02

          103.6

          101.2-106.2

          1:04

          105.3

          101.8-107.7

          1:08

          107.0

          105.9-107.6

          1:16

          101.5

          96.4-106.2

           

          細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例

          平均期望值(%)

          范圍(%)

          1:02

          98.0

          94.8-100.0

          1:04

          98.5

          91.1-103.4

          1:08

          102.9

          95.0-107.6

          1:16

          100.1

          90.8-104.9

          1. 樣本值
             

          應(yīng)用本試劑盒,檢測若干健康志愿者的樣本,志愿者的用藥史不詳。

          樣本類型

          樣本數(shù)目

          平均值(mg/mL)

          樣本值(mg/mL)

          血清

          10

          n.d.

          n.d.

          血漿

          8

          n.d.

          n.d.

          細(xì)胞培養(yǎng)上清

          4

          n.d.

          n.d.

          n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得15.63 pg/mL

          1. 測定特異性

          本試劑盒識別天然和重組小鼠白介素。下述因子進(jìn)行了特異性的評估,沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。

          Recombinant human:

          Recombinant Mouse:

          IL-1α

          IL-10

          IL-1α

          IL-12

          IL-1β

          IL-12

          IL-2

          IL-13

          IL-2

          IL-13

          IL-3

          IFN-γ

          IL-3

          IFN-γ

          IL-4

          TNF-α

          IL-4

          TNF-α

          IL-6

          VEGF

          IL-6

          VEGF

          IL-10

           

           

          檢測簡圖

           

          疑問解答

          問題

          造成原因

          解決方法

          標(biāo)曲不好

          移液量不準(zhǔn)確

          檢查移液器,按時校準(zhǔn),仔細(xì)操作,充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。

          稀釋方法不恰當(dāng)

          顯色值偏低

          孵育時間太短

          給予足夠的孵育時間,樣本和溶解的標(biāo)準(zhǔn)品隔夜后更換。

          移液量不足或稀釋不當(dāng)

          校準(zhǔn)移液器和規(guī)范操作

          CV偏高

          酶標(biāo)板清洗不當(dāng)

          使用正確的洗滌工序;如果使用洗板機(jī),檢查所有的端口是否堵塞。

          受污染的洗液

          準(zhǔn)備新鮮洗液

          靈敏度較低

          試劑盒儲存不當(dāng)

          按照產(chǎn)品組分表進(jìn)行保存。

           

          400-6111-883