白細胞介素6（IL-6）最初被鑒定為B細胞分化因子，現(xiàn)在已知是一種多功能細胞因子，可調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)、造血、急性期反應(yīng)和炎癥，其有3個受體結(jié)合位點，包括1個特異性受體IL-6R 結(jié)合位點，和2個gp130結(jié)合位點。IL-6是一種多效性、α螺旋、22-28kDa的糖蛋白，在急性期反應(yīng)、炎癥、造血、骨代謝和癌癥進展中發(fā)揮重要作用，人IL-6與小鼠和大鼠IL-6具有39%的aa序列同一性。它是一種多效性細胞因子，不僅影響免疫系統(tǒng)，還作用于其他生物系統(tǒng)和各種器官的許多生理事件，同時也能誘導骨髓瘤和漿細胞瘤的生長。

翌圣Mouse IL-6 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒，用于定量測定血清、血漿中的小鼠白介素6(Mouse IL-6)。特異性抗小鼠白介素6抗體預(yù)包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本，經(jīng)過孵育，樣本中存在的小鼠白介素6與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入檢測抗體孵育結(jié)合，經(jīng)洗滌，再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中小鼠白介素6的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。

 

產(chǎn)品信息

貨號	98027ES48 / 98027ES96
規(guī)格	48 T / 96 T
檢測范圍	15.63-1000 pg/mL
檢測方法	雙抗夾心法
檢測物種	小鼠
檢測時長	4.5小時
靈敏度	9.37 pg/mL
稀釋線性	74 - 107%
回收率	77 - 111%
板內(nèi)差	3.1%
板間差	5.7%

 

實驗數(shù)據(jù)

1. 標曲數(shù)據(jù)

數(shù)據(jù)擬合繪制標準曲線，生成的標曲用于實驗數(shù)據(jù)分析。

2. 靈敏度檢測

IL-6的最低檢測限為9.37 pg/mL，通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。

3. 精密度檢測

酶標板內(nèi)精密度

3個已知濃度的樣本酶標板內(nèi)重復(fù)測定8次，評估酶標板內(nèi)的精密度。

酶標板間精密度

3個已知濃度的樣本酶標板間重復(fù)檢測24次，評估酶標板間的精密度。

項目	板內(nèi)精密度			板間精密度
樣本	1	2	3	1	2	3
	8	8	8	24	24	24
平均值	614.01	165.44	39.27	622.44	161.44	42.01
標準差	16.25	5.85	1.29	24.60	6.54	3.82
變異系數(shù)（%）	2.6	3.5	3.3	4.0	4.0	9.1

4. 回收率檢測

 通過不同水平的IL-6添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:

樣本類型	平均回收率(%)	范圍（%）
血清	94.4	85.5-108.6
血漿	96.3	81.6-111.1
細胞培養(yǎng)上清	90.2	77.5-102.2

5. 稀釋線性檢測

血清稀釋比例	平均期望值(%)	范圍（%）
1:02	81.6	77.8-87.1
1:04	94.4	91.3-98.9
1:08	96.8	92.7-103.9
1:16	97.6	88.5-103.6

 

血漿稀釋比例	平均期望值(%)	范圍（%）
1:02	94.5	84.0-107.2
1:04	96.2	88.9-100.2
1:08	102.3	99.0-106.7
1:16	82.2	74.4-92.5

 

細胞培養(yǎng)上清稀釋比例	平均期望值(%)	范圍（%）
1:02	86.3	82.5-89.6
1:04	95.4	93.3-98.1
1:08	97.7	91.7-102.7
1:16	97.2	96.0-99.4

6. 樣本值

應(yīng)用本試劑盒，檢測若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。

樣本類型	樣本數(shù)目	平均值（pg/mL）	樣本值（pg/mL）
血清	10	n.d.	n.d.
血漿	8	33.6	n.d.-59.0
細胞培養(yǎng)上清	4	n.d.	n.d.

n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得15.63 pg/mL

7. 測定特異性

本試劑盒識別天然和重組小鼠白介素6。下述因子進行了特異性的評估，沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。

Recombinant human:		Recombinant Mouse:
IL-1α	IL-8	IL-1α	IL-10
IL-1β	IL-10	IL-1β	IL-12
IL-2	IL-12	IL-2	IFN-γ
IL-4	IFN-γ	IL-4	VEGF
IL-5	VEGF	IL-5	TNF-α
IL-6	TNF-α