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        1. 抗體
          一抗
          內(nèi)參抗體
          標(biāo)簽抗體
          二抗
          HRP偶聯(lián)
          TRITC偶聯(lián)
          Biotin偶聯(lián)
          熒光偶聯(lián)
          ALP偶聯(lián)
          無(wú)偶聯(lián)
          Elisa Kit

          二抗

          免疫印記(WB)二抗選擇 免疫組化(IHC/ICC)二抗選擇 免疫熒光(IHF/ICF)二抗選擇 免疫沉淀免疫共沉淀二抗選擇 特殊二抗選擇
          選擇HRP(辣根過(guò)氧化物酶)堿性磷酸酶標(biāo)記的二抗
          熒光WB可自行選擇對(duì)應(yīng)的熒光素標(biāo)記二抗

          A. HC(免疫組織化學(xué))使用小鼠抗HCN1單克隆抗體 對(duì)小鼠小腦的免疫組化分析.

          固定:室溫下10% 福爾馬林溶液處理12-24小時(shí).

          一抗:小鼠抗HCN1單克隆抗體,1:1000,室溫下孵育1小時(shí).

          二抗:HRP/DAB

          檢測(cè)系統(tǒng):生物素偶聯(lián)的山羊抗小鼠,鏈霉親和素過(guò)氧化物酶,DAB 色原(棕色),室溫下孵音30分鐘.

          復(fù)染色:Maver氏蘇木素(紫色/藍(lán)色) 細(xì)胞核染色,250-500uL,室溫下5分鐘.

          B.ICC(免疫細(xì)胞化學(xué))使用小鼠抗Hsp70單克隆抗體對(duì)小鼠熱休克的黑素瘤細(xì)胞的免疫細(xì)胞化學(xué)分析.

          固定:福爾馬林.

          一抗: 小鼠抗Hsp70單克隆抗體,1:1000,室溫下隔夜孵育.

          二抗: Biotin山羊抗小鼠

          圖片來(lái)自: Dr, Ewa Malusecka,Maria Sklodowska-Curie Memorial Cancer Ceter and Inst. Of Oncology, Poland.

          C.IHF(免疫組織熒光)使用小鼠抗Neuroligin 4單克隆抗體對(duì)小鼠齒狀回的免疫組織熒光分析.

          固定:甲醛固定石蠟包埋。

          一抗: 小鼠抗Neuroligin 4單克隆抗體,1:100.

          二抗: FITC 山羊抗小鼠(綠色).

          復(fù)染色: DAPI(藍(lán)色) 細(xì)胞核染色,1:1000.

          圖片來(lái)自: Rachel Reith, NIH/NIMH.

          D.ICF(免疫細(xì)胞熒光)使用小鼠抗HO-1單克隆抗體對(duì)人HeLa Cels的免疫細(xì)胞熒光分析.

          固定:室溫下2% 甲醛處理20分鐘.

          一抗: 小鼠抗HO-1單克隆抗體,1:100,4℃下孵育12小時(shí).

          二抗: FITC 山羊抗小鼠 (綠色),1:200,室溫下孵育2小時(shí).

          復(fù)染色: DAPI(藍(lán)色) 細(xì)胞核染色,1:40000,室溫下2小時(shí).

          染色定位: 微粒體,內(nèi)質(zhì)網(wǎng),低氧時(shí)定位至細(xì)胞核.

          放大倍數(shù): 100x.

          通常用二抗是用免疫球Fc,Fab片段免疫制備如IgG( H&L),這類(lèi)抗體和lgG分子的重鏈和輕鏈都可以反應(yīng),實(shí)驗(yàn)中為避免重輕鏈干擾可選擇只用Fc或者只用fab免疫的二抗,從而避開(kāi)重鏈(大小約55KDa)輕鏈(大小約25KDa)干擾.
          F(ab')2片段形式的二抗可避免與Protein A/G或與Fc受體的結(jié)合,其分子本身比較小,更容易滲透入細(xì)胞組織結(jié)構(gòu)內(nèi)而靈敏度更高。
          Fab片段形式的二抗是只含有一個(gè)結(jié)合位點(diǎn),可用來(lái)封閉內(nèi)源性的免疫球蛋白;它是最常用也是性?xún)r(jià)比最高的二抗形式,這類(lèi)抗體和laG分子的重鏈和輕鏈都可以反應(yīng),也可以和其他的免疫球蛋白家族(IlqM,IgA,lgD,IgE)和亞家族反應(yīng),因?yàn)樗械拿庖咔虻鞍锥加邢嗤妮p鏈.

           

          400-6111-883