巨噬細(xì)胞清除小課堂|第一課：注射方法及給藥
巨噬細(xì)胞在身體的不同部位發(fā)揮著獨(dú)特而關(guān)鍵的作用，然而，為了更深入地研究特定部位巨噬細(xì)胞的具體功能以及它們在疾病發(fā)生發(fā)展中的影響，精準(zhǔn)地清除巨噬細(xì)胞成為了關(guān)鍵的研究手段。氯磷酸鹽脂質(zhì)體（Clodronate Liposomes）是目前最為成熟，最為經(jīng)濟(jì)且最為理想的一種有效的巨噬細(xì)胞清除工具。借助腹腔，尾靜脈等多種給藥方式實現(xiàn)不同組織部位中巨噬細(xì)胞的清除。
接下來，我們將通過一系列專題分享，為大家展示在不同部位進(jìn)行巨噬細(xì)胞清除的方法與成效，希望能為各位科研工作者提供有益的參考和借鑒。
注射方法介紹
尾靜脈注射
尾靜脈注射在24h后即達(dá)到最大耗竭，應(yīng)注意檢測時間節(jié)點(diǎn)。
將小鼠放在倒扣的飯盒內(nèi)，從孔口拉出尾巴，小鼠的尾部有2條動脈和3條靜脈，2條動脈分別在尾部的背側(cè)面和腹側(cè)面，3條靜脈呈品字型分布，一般采用左右兩側(cè)的靜脈；
將紗布浸泡于約70℃溫水中（或浸泡在酒精中），拿出后包裹尾巴，以達(dá)到使尾部血管擴(kuò)張及軟化表皮角質(zhì)的目的；
有的實驗需連日反復(fù)尾靜脈注射給藥，注射部位應(yīng)盡可能從尾端開始，按次序向尾根部移動，更換血管位置注射給藥。拔出針頭后，用棉球按住注射部位輕壓1-2 min，止血；
腹腔注射
腹腔注射在48-72h后達(dá)到最大耗竭，應(yīng)注意檢測時間點(diǎn)。
首先采用背側(cè)保定法抓取小鼠，使其頭部稍向后仰，腹部向上，小鼠左后肢用小指固定住，再用75%酒精棉球消毒注射部位；
小鼠腹腔注射的位置在：下腹部腹中線兩側(cè)0.5cm（與大腿根部平齊）處，未免傷及臟器，保定小鼠時需使其頭部稍向后仰，以使其下腹部臟器上移；
回抽針?biāo)?，如無回血或液體即可注入藥物；
注射完畢后，輕輕旋轉(zhuǎn)針頭，再緩慢拔出注射器，以免液體外漏。
不同研究部位，也會有不同的注射方法，如：皮下注射、氣管給藥、顱內(nèi)注射等。實驗前應(yīng)參考相關(guān)文獻(xiàn)及咨詢Yeasen技術(shù)團(tuán)隊。
給藥周期及計量
即需要超過一周或以上實現(xiàn)巨噬細(xì)胞清除。以WT小鼠為例，一般首次給藥200 μl（20-25g體重），之后每2 - 3天給藥一次，每次用量 200μl。
參考試驗方案
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器官/ 巨噬細(xì)胞 |
劑量用法 (20-25g/每只小鼠 ) |
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脾臟/紅髓區(qū)巨噬細(xì)胞 |
單次給藥：200 µl/小鼠 (靜脈注射或腹腔注射)。 長期耗竭：第一次給藥劑量200 µl/小鼠（25g左右），以后按2-3天一次給藥200 µl/小鼠 |
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肝臟/Kuffer細(xì)胞 |
單次給藥：200 µl/小鼠 (靜脈注射或腹腔注射)。 長期耗竭：第一次給藥劑量200 µl/小鼠，以后按2-3天一次給藥200 µl/小鼠 |
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肺/肺泡巨噬細(xì)胞 |
靜脈注射（150-200 µl）聯(lián)合氣管內(nèi)或鼻內(nèi)（50 µl）獲得最佳效果。 |
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淋巴結(jié) |
注射(100-200 µl)/小鼠，具體給藥方案可參考文獻(xiàn)。 |
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腦/小膠質(zhì)細(xì)胞 |
腦室內(nèi)進(jìn)入腦脊液，10 µl/小鼠，50 µl/大鼠。 |
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血液/單核細(xì)胞 |
150-200 µl/小鼠（靜脈注射），24小時內(nèi)可達(dá)最大耗竭率，但1-7天的最大耗竭率與小鼠品系有關(guān)。 |
注：以上僅參考，實驗前應(yīng)參考相關(guān)文獻(xiàn)及咨詢YEASEN技術(shù)團(tuán)隊
產(chǎn)品推薦
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產(chǎn)品名稱 |
貨號 |
規(guī)格 |
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Clodronate Liposomes(From Vrije Universiteit Amsterdam) 體內(nèi)巨噬細(xì)胞清除劑 |
40337ES08 |
5 mL |
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40337ES10 |
10 mL |
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40338ES08 |
5 mL |
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40338ES10 |
10 mL |
