Cebrary^®Tissue Digestion Solution組織消化液（10x）可將生物組織樣本溫和、快速地消化解離為細胞懸液或細胞團塊，可用于后續(xù)類器官的構建和細胞分離培養(yǎng)。該組織消化液廣泛適用于實體腫瘤（如腸癌、肺癌、乳腺癌、子宮內膜癌、胰腺癌等）及大部分正常組織標本在體外原代培養(yǎng)的消化解離。本品為10x原液，使用前請稀釋。

 

產品組分

組分編號	組分名稱	產品編號/規(guī)格
		41423ES10	41423ES30	41423ES60
41423	Cebrary®Tissue Digestion Solution  組織消化液	10 mL	30 mL	100 mL

 

保存方法

-20℃保存，避免反復凍融，有效期 24個月；稀釋至使用濃度后，-20℃有效期1個月，2-8℃保存，建議48h內使用。

 

產品應用（以腫瘤組織為例）

1. 從冰箱取出組織消化液（10x），恢復至室溫，上下振蕩數(shù)次混勻。為了盡量減少凍融次數(shù)對產品效果的影響，請按照日常使用量將組織消化液母液分裝后儲存于-20℃。

2. 無菌條件下配制腫瘤組織消化液，本品為母液，使用時可用DMEM/F12基礎培養(yǎng)基適當稀釋，可依據組織性質稀釋8-10倍使用，對較難消化的結締組織和質地堅硬的間質組織可在使用時加入終濃度為3mM的CaCl2溶液。

3. 腫瘤組織樣本的消化

1）在消化之前利用手術剪或手術刀將腫瘤組織剪切成體積約為1~3 mm³的碎片。

2）根據原組織塊大小加入適當體積的（消化液體積需是原腫瘤組織體積的25-50倍）稀釋好腫瘤組織消化液后置于37℃恒溫培養(yǎng)箱或恒溫搖床中進行組織消化。不同種類腫瘤的樣本，因其組織來源、腫瘤亞型及個體化差異，其消化所需時間可能會有所不同，總體消化時間在20min-120min。

注意：在此操作過程中須仔細監(jiān)測消化過程，因為過度消化可能會對分離細胞的活性有明顯影響。消化過程中，可以對消化懸液進行鏡檢，在鏡下觀察到較多的單個細胞或70μm以下的細胞簇后，即可認為消化完成。

3）在確認消化完成的組織懸液中加入胎牛血清（FBS）至終濃度達2-5%或終濃度為0.1%的BSA后吹打混合均勻以終止消化。

4）上步驟所獲得消化懸液可直接用于離心或篩網過濾等細胞分離操作，在使用分離的細胞前需利用類器官基礎培養(yǎng)基對樣本進行兩次以上的離心清洗方可使用（推薦水平離心速度200-300g離心3-5min）。

 

注意事項

1.  使用時，請注意無菌操作， 避免接觸污染；

2.  樣品首次溶解后，可進行分裝，避免反復凍融。

 

Ver.CN20231029