小鼠干擾素γ (Mouse IFN-γ)是可溶性二聚體細(xì)胞因子，是II型干擾素的唯一成員。它主要由自然殺傷細(xì)胞(NK)和自然殺傷T細(xì)胞(NKT)細(xì)胞分泌，發(fā)揮免疫作用。干擾素-γ對(duì)抵抗病毒、某些細(xì)菌和原生動(dòng)物感染的固有免疫和適應(yīng)性免疫具有重要作用。干擾素-γ 是巨噬細(xì)胞重要的激活劑，也是II型主要組織相容性復(fù)合物(MHC II)表達(dá)的誘導(dǎo)劑。IFN-γ的異常表達(dá)和很多自身炎癥和自身免疫疾病相關(guān)。除了直接抑制病毒復(fù)制，IFN-γ對(duì)免疫系統(tǒng)的重要性更體現(xiàn)在其免疫刺激和免疫調(diào)控功能。干擾素γ可以有效抑制細(xì)胞增殖，當(dāng)體內(nèi)出現(xiàn)異常細(xì)胞繁殖速度過快，機(jī)體產(chǎn)生干擾素γ來抑制分裂異常的細(xì)胞生長，臨床中常用來治療原發(fā)性血小板增多癥、慢性粒細(xì)胞白血病、真性紅細(xì)胞增多癥、原發(fā)性骨髓纖維化等不良疾病。

翌圣Mouse IFN-γ ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒，用于定量測定血清、血漿中的小鼠干擾素γ(Mouse IFN-γ)。特異性抗小鼠干擾素γ抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本，經(jīng)過孵育，樣本中存在的小鼠干擾素γ與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入檢測抗體孵育結(jié)合，經(jīng)洗滌，再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中小鼠干擾素γ的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。

 

產(chǎn)品信息

貨號(hào)	98023ES48 / 98023ES96
規(guī)格	48 T / 96 T
檢測范圍	31.25-2000 pg/mL
檢測方法	雙抗夾心法
檢測時(shí)長	4.5小時(shí)
靈敏度	5.65 pg/mL
稀釋線性	82 - 120%
回收率	79 - 108%
板內(nèi)差	4.5%
板間差	6.4%

 

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

1. 標(biāo)曲數(shù)據(jù)

數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，生成的標(biāo)曲用于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析。標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

2. 靈敏度檢測

IFN-γ的最低檢測限為5.65 pg/mL，通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計(jì)算得出。

3. 精密度檢測

酶標(biāo)板內(nèi)精密度

3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測定8次，評(píng)估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。

酶標(biāo)板間精密度

3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測24次，評(píng)估酶標(biāo)板間的精密度。

項(xiàng)目	板內(nèi)精密度			板間精密度
樣本	1	2	3	1	2	3
	8	8	8	24	24	24
平均值	1093.5	274.5	61.2	1062.9	272.2	59.8
標(biāo)準(zhǔn)差	70.3	8.5	2.4	100.6	15.9	2.3
變異系數(shù)（%）	6.4	3.1	3.9	9.5	5.9	3.9

4. 回收率檢測

 通過不同水平的IFN-γ添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:

樣本類型	平均回收率(%)	范圍（%）
血清	84.3	80.3-89.1
血漿	87.5	79.1-97.5
細(xì)胞培養(yǎng)上清	98.7	86.4-108.6

5. 稀釋線性檢測

血清稀釋比例	平均期望值(%)	范圍（%）
1:02	100.9	91.7-112.3
1:04	100.9	94.3-107.0
1:08	108.6	96.7-119.3
1:16	117.8	115.9-120.2

 

血漿稀釋比例	平均期望值(%)	范圍（%）
1:02	106.8	96.3-113.0
1:04	97.6	93.0-103.1
1:08	108.1	104.6-114.4
1:16	112.8	111.4-115.6

 

細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例	平均期望值(%)	范圍（%）
1:02	91.1	87.0-94.1
1:04	96.5	93.9-101.3
1:08	99.7	92.1-104.3
1:16	90.3	82.4-104.1

6. 樣本值

應(yīng)用本試劑盒，檢測若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。

樣本類型	樣本數(shù)目	平均值（mg/mL）	樣本值（mg/mL）
血清	4	n.d.	n.d.
血漿	4	51.1	n.d.-118.6
細(xì)胞培養(yǎng)上清	4	28.3	n.d.-66.8

n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得31.25 pg/mL

7. 測定特異性

本試劑盒識(shí)別天然和重組小鼠干擾素γ。下述因子進(jìn)行了特異性的評(píng)估，沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。

Recombinant human:		Recombinant Mouse:
IFN-γ	IL-6	IL-1α	IL-10
IL-1α	IL-10	IL-1β	IL-12
IL-1β	IL-12	IL-2	IL-13
IL-2	IL-13	IL-3	TNF-α
IL-3	TNF-α	IL-4	VEGF
IL-4	VEGF	IL-6