高靈敏通用型qPCR mix——致力于簡化熒光定量實驗進程的性能怪獸
Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix用Universal ROX替代了傳統(tǒng)ROX，彌補不同儀器平臺的光程差，實現(xiàn)了適合所有qPCR儀器。另外，該產(chǎn)品采用抗體法修飾，同時配方添加了基因擴增的促進因子，大大提升了該產(chǎn)品的擴增性能。
產(chǎn)品特點
全儀器平臺通用：預混特定類型參比染料，無需調(diào)整ROX濃度；
易于示蹤：藍色預混液，觀察顏色可直接區(qū)分是否加樣；
強穩(wěn)定性：室溫配制體系，配制后的體系可4℃放置24 h，檢測結(jié)果無變化；
上機快速：兼容常規(guī)程序與快速程序，最快46 min完成定量實驗；
擴增性能好：擴增效率高，特異性好，可檢測個位拷貝數(shù)基因。
產(chǎn)品優(yōu)勢
圖1. Hieff UNICON® Universal Blue 預混液可實現(xiàn)全平臺通用。針對不同儀器平臺，與T品牌對比，Hieff UNICON® Universal Blue 預混液Ct值起峰更加靠前。以2 µL的質(zhì)粒10倍梯度稀釋液為模板，擴增IL23R基因。
靈敏度高，可檢測低至單拷貝的質(zhì)粒DNA
圖2.Hieff UNICON® Universal Blue 預混液可有效檢測7個數(shù)量級范圍的模板量，擴增效率高，可在寬廣的線性范圍內(nèi)獲得良好的線性關(guān)系。以2 µL的106-100拷貝/µL的質(zhì)粒為模板，擴增人IL23R基因。
檢出率和特異性良好，廣泛適用于不同GC含量基因
圖3. Hieff UNICON® Universal Blue預混液可實現(xiàn)不同引物的高特異性擴增。 以293T細胞cDNA為模板，利用Primer5軟件設(shè)計200 bp擴增長度的片段（GC%含量30%-70%）的引物共1000對，隨機挑選27對，使用Hieff UNICON® Universal Blue預混液檢測引物的擴增效率和反應(yīng)特異性，在寬廣的基因GC范圍內(nèi)，該預混液可保證極高的特異性基因檢出。
靈敏度高，可檢測低至單拷貝的質(zhì)粒DNA
圖4. Hieff UNICON® Universal Blue預混液可精準分辨2倍表達量差異，且具備良好的重復性 A: 以293T細胞cDNA原液進行2倍梯度稀釋，擴增GAPDH基因，Hieff UNICON® Universal Blue預混液可精準區(qū)分2倍模板濃度差異。B: 以293T細胞20倍cDNA稀釋液為模板，擴增GAPDH基因，設(shè)置90個復孔，Ct值標準偏差＜0.2。
兼容快速程序與標準程序
|
GC含量 |
30% |
40% |
50% |
55% |
60% |
65% |
70%-1 |
70%-2 |
|
標準程序 |
24.95 |
24.175 |
23.79 |
15.615 |
23.22 |
23.675 |
24.905 |
28.21 |
|
快速程序 |
25.39 |
24.435 |
23.995 |
15.835 |
23.915 |
23.655 |
25.16 |
29.27 |
|
△Ct值 |
0.44 |
0.26 |
0.21 |
0.22 |
0.70 |
-0.02 |
0.25 |
1.06 |
圖5.Hieff UNICON® Universal Blue預混液可大大縮短擴增時間 以293T細胞cDNA的20倍稀釋液為模板，分別使用標準程序和快速程序擴增不同GC的基因片段（30%-70%），結(jié)果顯示，可兼容標準程序和快速程序，縮短擴增時間。對于個別△Ct＞0.5的基因建議使用標準程序。
良好的穩(wěn)定性，讓體系配制更加靈活
|
4℃體系保存 |
0h |
24h |
48h |
72h |
|
Ct均值 |
23.29 |
23.33 |
23.33 |
23.04 |
|
△Ct值 |
0.04 |
0.04 |
-0.25 |
圖6. Hieff UNICON® Universal Blue預混液在體系配制后4℃放置不同時間條件下，檢測人C2orf68基因擴增情況。結(jié)果顯示體系配制后4℃保存24 h，擴增性能無變化。
翌圣qPCR mix已發(fā)表文獻（部分）
【1】Yu Qiong, et al. "RNA demethylation increases the yield and biomass of rice and potato plants in field trials." Nature biotechnology. (2021): doi:10.1038/S41587-021-00982-9. (IF=54.908)
【2】Dong, W., et al. "An SHR–SCR module specifies legume cortical cell fate to enable nodulation." Nature. (2020). (IF=42.778)
【3】Lu, X. Y., et al. "Feeding induces cholesterol biosynthesis via the mTORC1–USP20–HMGCR axis." Nature (2020):1-6. (IF=42.778)
【4】Bi, X., et al. "Tracing the genetic footprints of vertebrate landing in non-teleost ray-finned fishes." Cell W1(2021). (IF=38.637)
【5】Liu, S. , et al. "RNA polymerase III is required for the repair of DNA double-strand breaks by homologous recombination." Cell 184.5(2021). (IF=38)
【6】Liu, C. X., et al. "Structure and Degradation of Circular RNAs Regulate PKR Activation in Innate Immunity." Cell (2019). (IF=31.398)
【7】Han, X., et al. "Mapping the Mouse Cell Atlas by Microwell-Seq." Cell 172.5(2018):1091-1107.e17. （IF=30.410）
訂購信息
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產(chǎn)品定位 |
產(chǎn)品名稱 |
貨號 |
規(guī)格 |
|
高靈敏通用型定量預混液（SYBR Green法） |
11184ES08 |
5 mL |
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貨號 |
規(guī)格 |
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低豐度基因定量預混液(SYBR Green法) |
Hieff Unicon® qPCR SYBR Green Master Mix (No/Low/High Rox Plus) |
11198/11199/ 11200ES08 |
5 mL |
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高特異性定量預混液(SYBR Green法) |
Hieff Unicon® Power qPCR SYBR Green Master Mix (No/Low/High Rox Plus) |
11195/11196/ 11197ES085 |
5 mL |
|
普通型定量預混 液 (SYBR Green法） |
11201/11202/ 11203ES08 |
5 mL |
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Kit |
11119ES60 |
100 T |
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|
Kit(含gDNA去除步驟) |
Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (gDNA digester plus) |
11121ES60 |
100 T |
|
高靈敏度Kit (含gDNA去除步驟) |
Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (gDNA digester plus) |
11139ES60 |
100 T |
|
預混液(含gDNA去除步驟) |
Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) |
11123ES60 |
100 T |
|
高靈敏度預混液(含gDNA去除步驟) |
Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) |
11141ES60 |
100 T |
HB210926
