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          首頁(yè) / qPCR系列 / 產(chǎn)品應(yīng)用詳情
           
          一步完成gDNA去除與反轉(zhuǎn)錄,遠(yuǎn)離污染和降解風(fēng)險(xiǎn)！
           
          ——Hifair® AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR
          


          

          

          

          

          

          常見(jiàn)的gDNA消化去除通常在正式反轉(zhuǎn)錄步驟之前，加入gDNA消化去除組分后，需在特定溫度下反應(yīng)一段時(shí)間，反應(yīng)冷卻后再加入相關(guān)的反轉(zhuǎn)錄組分進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，步驟多且耗時(shí)通常在半小時(shí)左右。
          


          小翌今天給大家?guī)?lái)一款快速反轉(zhuǎn)錄預(yù)混液，gDNA去除和反轉(zhuǎn)錄一步完成，且只要5分鐘，“咻”的一下，就可拿到想要的cDNA啦！
          


           
          

          

          


          

           
          


          

           
          

          

          

          

          


          

           
          


          在檢測(cè)基因表達(dá)水平時(shí)，RNA樣品中的基因組DNA(gDNA)殘留是一個(gè)潛在的風(fēng)險(xiǎn)。gDNA可能會(huì)與目的RNA共同擴(kuò)增，從而產(chǎn)生假陽(yáng)性的現(xiàn)象，例如Ct值偏小、Ct值波動(dòng)以及熔解曲線雙峰。
          

          

          


          

          

          

          


          

          ▲ Ct值偏小/Ct值波動(dòng)
          


           
          

          


          

          如何避免RNA中殘留的gDNA帶來(lái)的干擾呢？通常情況下，我們可以選用帶gDNA去除的RNA提取試劑獲取高質(zhì)量的RNA或是針對(duì)提取的RNA在反轉(zhuǎn)錄時(shí)進(jìn)行g(shù)DNA消化去除處理。
          

          


          

           
          


           
          


          

          

          

          

           
          

          


          

          

          

          產(chǎn)品名稱(chēng)
          

          

          

          


          

           
          

          

          

          

          


          Hifair® AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR(Cat #11151ES)
          

          


          

           
          


           
          


          

          

          

          

           
          

          


          

          

          

          產(chǎn)品特點(diǎn)
          

          

          

          


          

           
          

          

          

          

          


          

          

           
          


          

          

          一步完成：一步完成gDNA去除和反轉(zhuǎn)錄；
          
快速反應(yīng)：消化&反轉(zhuǎn)僅需5分鐘；
          
高效合成：可保證100 pg RNA反轉(zhuǎn)錄；
          
產(chǎn)物穩(wěn)定：cDNA產(chǎn)物可長(zhǎng)久穩(wěn)定保存。
          

          

          

          

          


           
          


           
          

          


          

          

          

          

           
          

          


          

          

          

          產(chǎn)品性能
          

          

          

          


          

           
          

          

          

          

          


          

          

          

          

          

           
          

          


          反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)量高
          

          


          

           
          


           
          

          

          

          

          


          

          

          


          

          


          圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板，分別檢測(cè)三種基因。品牌A、品牌B、品牌C均為一步gDNA去除&反轉(zhuǎn)錄試劑。測(cè)試結(jié)果顯示，在1 μg和10 ng Total RNA 投入下，11151ES反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)量均優(yōu)于其他品牌，Ct值更小。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)
          


           
          


          


          

          


          

          圖. 以擬南芥RNA為模板，品牌A、品牌B、品牌C均為一步gDNA去除&反轉(zhuǎn)錄試劑。測(cè)試結(jié)果顯示，在1 μg和10 ng Total RNA 投入下，11151ES反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)量均優(yōu)于其他品牌，Ct值更小。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)
          


           
          


          

          

          

          

          

          

          

           
          

          


          優(yōu)異的靈敏度
          

          


          

           
          


           
          

          

          

          

          


          

          

          


          


          圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板，擴(kuò)增30%GC、50%GC、60%GC和70%GC的基因。分別投入100 pg、1 ng、10 ng、100 ng、1 μg的Total RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄并進(jìn)行熒光定量檢測(cè)。結(jié)果顯示，11151ES可滿(mǎn)足100 pg-1 μg RNA的反轉(zhuǎn)錄。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)
          

          

          

          


           
          

          

          


          

          

          

          

          

           
          

          


          cDNA產(chǎn)物穩(wěn)定性好
          

          


          

           
          


           
          

          

          

          

          


          

          


          圖.以人293T細(xì)胞RNA為模板進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，將獲得的cDNA產(chǎn)物進(jìn)行反復(fù)凍融，分別凍融10次、20次、30次。測(cè)試結(jié)果顯示11151ES反轉(zhuǎn)錄得到的cDNA產(chǎn)物在30次反復(fù)凍融處理后，仍保持高度的穩(wěn)定性，Ct值差異不大。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)
          


           
          

          


          

          


          圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，將獲得的cDNA產(chǎn)物在-20℃、4℃、25℃和37℃的溫度條件下放置7天。測(cè)試結(jié)果顯示11151ES反轉(zhuǎn)錄得到的cDNA產(chǎn)物在不同溫度下存儲(chǔ)7天，仍保持高度的穩(wěn)定性，Ct值差異不大。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)
          


           
          

          


          

          

          

          

          

           
          

          


          

          試劑盒穩(wěn)定性好 
          

          

          


          

           
          


           
          

          

          

          

          


          

          


          

          


          

          圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板，將分別在-20℃、4℃和37℃的溫度條件下放置3天和7天的試劑盒進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄。測(cè)試結(jié)果顯示不同溫度不同時(shí)間放置下的11151ES反轉(zhuǎn)錄結(jié)果差異不大，試劑盒具有良好的穩(wěn)定性。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)
          

          


          

           
          

          


          

          

          

          

          

           
          

          


          

          

          

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          方法
          
			          		
			
			
          分類(lèi)
          
			          		
			
			
          產(chǎn)品名稱(chēng)
          
			          		
			
			
          貨號(hào)
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          RNA提取 
          
			          		
			
			
          同Trizol提取 
          
			          		
			
			
          TRIeasy™ Total RNA Extraction Reagent 
          
			          		
			
			
          10606ES
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          免氯仿升級(jí)版 
          
			          		
			
			
          TRIeasy™ Total RNA Extraction Reagent(Tcm Free) 
          
			          		
			
			
          19202ES
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          動(dòng)物組織/細(xì)胞總RNA提取，避開(kāi)有毒試劑，最快15 min完成 
          
			          		
			
			
          MolPure® Cell/Tissue Total RNA Kit細(xì)胞/組織總RNA提取試劑盒 
          
			          		
			
			
          19221ES
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          qPCR染料法 
          
			          		
			
			
          高靈敏通用型定量預(yù)混液(染料法) 
          
			          		
			
			
          Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Master Mix 
          
			          		
			
			
          11184ES
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          超高性?xún)r(jià)比定量預(yù)混液 (染料法)，已發(fā)文章累計(jì)IF達(dá)到5000+ 
          
			          		
			
			
          Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox) 
          
			          		
			
			
          11201ES
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox) 
          
			          		
			
			
          11202ES
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox) 
          
			          		
			
			
          11203ES
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          反轉(zhuǎn)錄試劑 
          
			          		
			
			
          5 min快速反轉(zhuǎn)，最長(zhǎng)可滿(mǎn)足14 kb cDNA合成，含gDNA去除(下游應(yīng)用PCR/qPCR)-示蹤版New
          
			          		
			
			
          Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit 
          
			          		
			
			
          11149ES
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          5 min快速反轉(zhuǎn)，最長(zhǎng)可滿(mǎn)足14 kb cDNA合成，含gDNA去除(下游應(yīng)用PCR/qPCR)-常規(guī)版New
          
			          		
			
			
          Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit（No Dye） 
          
			          		
			
			
          11150ES
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          高質(zhì)量第一鏈cDNA合成預(yù)混液，含gDNA去除(下游應(yīng)用qPCR) 
          
			          		
			
			
          Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) 
          
			          		
			
			
          11141ES
          
			          		
		
          
	          

          

          

           
           
           
           
           
           
           
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