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RPA等溫擴增│Bsu DNA polymerase (Large fragment)

重組酶聚合酶擴增RPA是一種近年來發(fā)展起來的等溫擴增技術(shù)，具有反應靈敏度高、特異性強、對儀器依賴程度低且檢測時間短等優(yōu)點，特別適用于基層和現(xiàn)場即時檢測。

RPA等溫擴增技術(shù)簡介

RPA技術(shù)的原理是重組酶蛋白與引物（A）形成復合物，能在雙鏈DNA中尋找同源序列（B）。然后通過重組酶（C）的鏈置換活性將引物插入同源位點，并且單鏈結(jié)合蛋白穩(wěn)定置換DNA鏈（D）。隨后重組酶被分解，使得引物的3'末端被鏈置換并與Bsu DNA polymerase (Large fragment) 結(jié)合（E），使其延長引物（F），通過循環(huán)重復該過程對模板上的目標區(qū)域進行指數(shù)式擴增。

該技術(shù)可用于不同種類的目標生物檢測，樣本耐受性高，可廣泛覆蓋疫病防控、醫(yī)學診斷、食品安全、環(huán)境衛(wèi)生、農(nóng)業(yè)病害、動物健康、生物制品質(zhì)控等應用領域。

圖1.RPA等溫擴增技術(shù)原理圖[1]

Bsu DNA polymerase (Large fragment)是RPA等溫擴增的核心酶，具有較強的鏈置換活性和聚合酶活性，能在恒溫條件（37~42℃）下快速、高效、特異性的擴增模板，在10~30 min內(nèi)即可將痕量的核酸模板（低至單拷貝）擴增至可以檢出的水平。

翌圣Bsu DNA polymerase (Large fragment)

翌圣生物Bsu DNA polymerase (Large fragment, 5 U/μL) （Cat#11078ES）來源于嗜熱脂肪芽孢桿菌，該酶保留了Bsu DNA polymeras I的5´-3´聚合酶活性，但缺失了5´-3´核酸外切酶結(jié)構(gòu)域，具備純度高、殘留控制嚴格、單次產(chǎn)能高，可確保批間穩(wěn)定性的產(chǎn)品優(yōu)勢，可廣泛應用于基于等溫擴增RPA技術(shù)的病原體即時檢測。

性能展示

1. 無核酸外切酶、切口酶及RNase殘留

圖2. Bsu DNA polymerase (Large fragment, 5 U/μL) 核酸外切酶、切口酶殘留檢測。

注：C代表陰性對照；1、2代表不同批次Bsu DNA polymerase (Large fragment, 5 U/μL)

圖3. Bsu DNA polymerase (Large fragment, 5 U/μL) RNase殘留檢測。

注：C代表陰性對照；1、2代表不同批次Bsu DNA polymerase (Large fragment, 5 U/μL)

2. 高效鏈置換活性，構(gòu)建RPA擴增體系靈敏度低至10 copies/T

圖4. 用翌圣Bsu DNA polymerase (Large fragment, 5 U/μL)進行RT-RPA反應，擴增RNA病毒，靈敏度低至10 copies/T。

選擇指南

產(chǎn)品定位	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品貨號
RPA相關酶原料	Bsu DNA polymerase (Large fragment, 5 U/μL)	11078ES
	T4 UvsX Recombinase(2 μg/μL)	11079ES
	T4 UvsY protein (2 μg/μL)	11080ES
	T4 gene 32 protein (gp 32) T4噬菌體基因32編碼蛋白	11081ES
	肌酸激酶Creatine Kinase (2 μg/μL)	14502ES
高靈敏度Bst酶	Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)	14402ES
無甘油Bst酶	Lyophilized Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL，Glycerol-Free)	14405ES
適合RT-Lamp的逆轉(zhuǎn)錄酶	Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase 第三代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶	11111ES
	第五代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶Hifair® V Reverse Transcriptase(1000 U/μL)	14603ES
	Hifair® III Reverse Transcriptase,600U/μL,Glycerol-free 第三代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶(無甘油版)	11297ES
鼠源RNase抑制劑	Murine RNase Inhibitor(40 U/µL) 鼠源RNase抑制劑	10603ES
	鼠源RNase抑制劑 Murine RNase Inhibitor(200 U/µL)	10610ES
	鼠源RNase抑制劑 Murine RNase Inhibitor(300 U/µL)	14671ES
	Murine RNase Inhibitor(200 U/µL,Glycerol-free)	10703ES
防污染UDG酶	Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), 1 U/μL	14455ES
染料法RT-Lamp顯示試劑盒	RT-LAMP Dye Assay Kit(UDG plus)	13762ES
pH敏感染料法RT-Lamp顯示試劑盒（可凍干）	RT-LAMP pH Sensitive Dye Chromogenic Version Freeze-Dryable Kit	13920ES

參考文獻

[1] 施奕,徐昌平,余蓓蓓,盧亦愚,梅玲玲.重組酶聚合酶擴增技術(shù)研究進展[J].病毒學報, 2020,36(03):522-532.

[2] Zhao Y, Chen F, Li Q, Wang L, Fan C. Isothermal Amplification of Nucleic Acids. Chem Rev. 2015 Nov 25;115(22):12491-545. doi: 10.1021/acs.chemrev.5b00428. Epub 2015 Nov 9. PMID: 26551336.

400-6111-883

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