Hifair^® AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR是Hifair^® V one-step RT-gDNA digestion SuperMix for qPCR的升級版，在滿足了可在同一管中進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄和基因組去除兩個(gè)反應(yīng)的同時(shí)，既簡化了反應(yīng)過程、大幅縮短了反應(yīng)時(shí)間，又提高了反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的產(chǎn)量。本產(chǎn)品4×Hifair^® AdvanceFast One-Step RT SuperMix中含反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)所需的全部試劑，反應(yīng)時(shí)只需加入gDNA Remover Mix、模板RNA和水即可高效地合成第一鏈cDNA，同時(shí)去除基因組DNA污染。本產(chǎn)品適合具有復(fù)雜的RNA模板的反轉(zhuǎn)錄，也非常適合少量模板以及低拷貝基因的反轉(zhuǎn)錄。

本產(chǎn)品反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物兼容探針法與染料法qPCR，探針法與染料法qPCR Mix分別推薦翌圣Hieff Unicon^® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix (Cat#11211)和Hieff UNICON^® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix (Cat#11184)，進(jìn)行高性能基因表達(dá)分析。本產(chǎn)品反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物不適用于后續(xù)基因克隆等長片段擴(kuò)增，如果需要，推薦翌圣Hifair^® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Cat#11149、Cat#11150)進(jìn)行高效反轉(zhuǎn)錄。

 

組分信息

組分編號	組分名稱	11151ES10	11151ES60
11151-A	4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix	50 μL	500 μL
11151-B	gDNA Remover Mix	10 μL	100 μL
11151-C	RNase-free Water	1 mL	2×1 mL

 

儲存條件

-25~-15℃保存，有效期1年。

 

使用說明

1. 在冰上融化11151-A/B/C組分，將試劑各組分充分震蕩混勻，并在RNase-free離心管中配置如下體系：

組分	體積 （μL）
RNase-free Water	To 20 μL
4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix	5 μL
gDNA Remover Mix	1 μL
Total RNA	10 pg -5 μg*
or mRNA	10 pg-500 ng*

表1 反應(yīng)體系

*建議Total RNA的投入量不超過2 μg。如果目的基因的表達(dá)豐度低，可增加投入量至最多5 μg Total RNA。

2. 反應(yīng)程序

溫度	時(shí)間
37℃	5 min*
85℃	30 s

表2 反應(yīng)程序

*該過程包含反轉(zhuǎn)錄及gDNA消化。

3. 反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可立即用于qPCR反應(yīng)，也可-20°C短期保存，長期保存建議分裝后于-80°C存放，避免反復(fù)凍融。

 

注意事項(xiàng)

1.所有操作均應(yīng)在冰上進(jìn)行，且操作過程應(yīng)避免RNase污染。

2.為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

3.本產(chǎn)品僅作科研用途！

 

Ver.CN20230530