產(chǎn)品簡介

 

16S （V3V4）細菌擴增子建庫試劑盒利用高通量測序技術(shù)對16S rDNA中V3-V4區(qū)片段進行擴增，結(jié)合生物信息學技術(shù)，檢測特定環(huán)境下的微生物（主要是細菌），鑒定所檢細菌種類，提供環(huán)境樣本物種分類、物種豐度、種群結(jié)構(gòu)、系統(tǒng)進化等諸多信息。本試劑盒中包含進行細菌16S rDNA擴增的所有試劑，16S擴增引物F/R用于擴增細菌16S rDNA前500 bp的DNA 片段，組合Hieff NGS^® Tagment Index Kit for Illumina（Cat#12416）用于全序列DNA片段的擴增。試劑盒中提供的所有試劑都經(jīng)過嚴格的質(zhì)量控制和功能驗證，最大程度上保證了文庫構(gòu)建的穩(wěn)定性和重復性。

16S rRNA位于原核細胞核糖體小亞基上，包括10個保守區(qū)域（Conserved Regions）和9個高變區(qū)域（Hypervariable Regions），其中保守區(qū)在細菌間差異不大，高變區(qū)具有屬或種的特異性，隨親緣關(guān)系不同而有一定的差異。因此，16S rDNA可以作為揭示生物物種的特征核酸序列，被認為是最適于細菌系統(tǒng)發(fā)育和分類鑒定的指標。16S rDNA擴增子測序（16S rDNA Amplicon Sequencing），通常是選擇某個或某幾個變異區(qū)域，利用保守區(qū)設計通用引物進行PCR擴增，然后對高變區(qū)進行測序分析和菌種鑒定，16S rDNA擴增子測序技術(shù)已成為研究環(huán)境樣本中微生物群落組成結(jié)構(gòu)的重要手段。對于不同環(huán)境樣品的DNA，擴增其中16S rDNA中V3-V4區(qū)片段，可以區(qū)分鑒定絕大多數(shù)細菌，是最常用的細菌分類標準。

?適用100 pg- 10 ng的Meta樣品，如糞便、土壤或Meta DNA樣品等

?多樣本驗證可獲得優(yōu)異的文庫與測序數(shù)據(jù)

?嚴格的批次性能與穩(wěn)定性質(zhì)控

 

產(chǎn)品應用

 

病原tNGS；DNA擴增子建庫

 

產(chǎn)品優(yōu)勢

 

• 優(yōu)異的擴增性能：檢出率高、特異性優(yōu)、均一性好
• 兼容逆轉(zhuǎn)錄體系：逆轉(zhuǎn)錄后無需純化，可直接進行多重擴增
• 嚴格的背景菌控制：車間潔凈、人員專業(yè)、質(zhì)控嚴格

 

產(chǎn)品數(shù)據(jù)

 

1. 16S測序微生物檢出占比分析情況

圖1.  微生物標準品16S測序?qū)偎綑z測的微生物占比分析

 

組分信息

 

組分編號		組分名稱	12983ES08	12983ES24	12983ES96
12983-A	?	2×Hieff® Multiplex PCR Master Mix	100 μL	300 μL	1200 μL
12983-B	?	16S Primer Mix	16 μL	48 μL	192 μL
12983-C	?	2×Hieff Canace® Amplification Mix	100 μL	300 μL	1200 μL

【注】：本試劑盒組分適應于Illumina^® 測序平臺，需要組合專屬于Illumina^® 平臺的Hieff NGS^® Tagment Index Kit for Illumina^®(Cat# 12416 )。

 

儲存條件

 

12983-A組分 4℃保存，其他組分-25~-15℃保存，有效期1年。

 

操作流程

 

圖1  文庫制備流程圖

 

Ver.CN20241030