螢火蟲螢光素酶是一種胞內(nèi)蛋白，大小為61KDa。在氧氣、ATP和鎂離子同時存在的條件下，催化底物螢火蟲螢光素氧化，生成氧化螢光素，并發(fā)出黃綠色光，其最強發(fā)光波長為560nm。

海腎螢光素酶也是一種胞內(nèi)蛋白，大小為36KDa。只需要氧氣就可以催化腔腸素，氧化生成高能產(chǎn)物coelenteramide，并發(fā)出藍(lán)光，其最強發(fā)光波長為465nm。

對于螢光素酶的化學(xué)發(fā)光與檢測模式上存在以下差異：
• 化學(xué)發(fā)光根據(jù)發(fā)光的形式和種類分為閃光型（flash-type）和輝光型（glow-type）兩種類型；
• 在檢測方法上分為非均質(zhì)檢測與均質(zhì)檢測；

那么在螢光素酶檢測實驗中如何進(jìn)行報告基因檢測試劑的選擇呢？接下來讓我們一探究竟~

◎ 閃光型與輝光型差異

◎ 非均質(zhì)型與均質(zhì)型差異

• 非均質(zhì)型

優(yōu)勢：可留樣檢測（裂解液可保存用于后續(xù)檢測）；

劣勢：操作繁瑣。

• 均質(zhì)型

優(yōu)勢：操作簡單（裂解檢測僅需一步）；

劣勢：不可留樣檢測。

◎ 非均質(zhì)閃光型報告基因檢測（貨號：11401、11402）

• 產(chǎn)品特點

1. 裂解能力更強：能夠徹底裂解絕大部分種類細(xì)胞。

2. 信號更強：能夠精準(zhǔn)檢測弱啟動子的表達(dá)。

3. 靈敏度更高：可檢測低至10‐20摩爾螢光素酶分子。

4. 線性范圍更廣：線性檢測范圍超過酶濃度的8個數(shù)量級。

• 應(yīng)用方向

精準(zhǔn)測量轉(zhuǎn)錄調(diào)控，miRNA靶基因驗證，轉(zhuǎn)錄因子和啟動子研究等。

• 數(shù)據(jù)展示

圖1. Yeasen（貨號：11402）熒光強度與P品牌相當(dāng)，可完美替換進(jìn)口品牌。

◎ 均質(zhì)型輝光型報告基因檢測（貨號：11404、11405）

• 產(chǎn)品特點

1. 信號穩(wěn)定：半衰期長（達(dá)2h），非常適用于高通量檢測，再也不用擔(dān)心螢光信號淬滅的問題。

2. 操作簡便：只需要加樣-讀值，即可完成實驗，擠出更多時間發(fā)paper。

3. 準(zhǔn)確度高：我有海腎螢光素酶的底物——腔腸素，可校正孔間細(xì)胞數(shù)量、轉(zhuǎn)染效率的誤差。

4. 兼容性好：可用于多種常用細(xì)胞培養(yǎng)液，如RPMI 1640、DMEM 、MEM-α、F12、DMEM/F12等。

5. 無刺激性氣味：還你一個清新愉快的實驗室環(huán)境。

• 應(yīng)用方向

Fc effector檢測系統(tǒng)，免疫檢查點檢測系統(tǒng)( immune checkpoint assays)，細(xì)胞因子、生長因子檢測和抗體內(nèi)化研究的檢測系統(tǒng)等。

• 數(shù)據(jù)展示

 圖2. Yeasen（貨號：11405）熒光強度和穩(wěn)定性與P進(jìn)口品牌相當(dāng)。