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          翌圣逆轉(zhuǎn)錄酶助力高質(zhì)量cDNA合成
           
          

          當(dāng)檢測靶標(biāo)為RNA時，需要使用逆轉(zhuǎn)錄酶將RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，再通過Taq酶進(jìn)行PCR擴增，逆轉(zhuǎn)錄酶的表現(xiàn)，直接影響分子診斷試劑的最終性能。針對分子診斷試劑廠家使用痛點，翌圣生物對逆轉(zhuǎn)錄酶進(jìn)行了定向改造，去除了RNase H活性，提高了逆轉(zhuǎn)錄酶的熱穩(wěn)定性，兼容復(fù)雜結(jié)構(gòu)模板，性能優(yōu)越，備受客戶好評！
          


           
          

          


          

          

          

          

          

          耐受65℃高溫
          

          

          

          

          

          


          

          以500ng 293T細(xì)胞的總RNA為模板,使用第三代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶在42℃-65℃下進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，取1μL cDNA為模板，擴增TFRC基因(4.4kb)。
          

          


          

          

          


          

          圖1.在42℃-65℃下進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄
          


           
          

          


          

          

          

          

          

          兼容復(fù)雜模板
          

          

          

          

          

          


          

          反應(yīng)溫度55℃可滿足常規(guī)模板及二級結(jié)構(gòu)模板的轉(zhuǎn)錄，高GC模板可適當(dāng)提高到65℃反應(yīng)。
          

          


          

          

          


          

          圖2.適合二級結(jié)構(gòu)模板、高GC模板
          


           
          

          


          

          

          

          

          

          延伸性能優(yōu)越
          

          

          

          

          

          


          

          以500ng 293T細(xì)胞的總RNA為模板，oligodT為引物，使用第三代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶合成cDNA。取1 μL cDNA為模板，擴增DY1C1N1基因(19.9kb)的5’的500bp。結(jié)果顯示，Hifair®  III Reverse Transcriptase可合成長達(dá)19.8kb的cDNA。
          

          


          

          

          


          

          圖3.最長可合成19.8kb的cDNA
          


          

           
          

          

          


          

          

          

          

          

          合成速度快
          

          

          

          

          

          


          

          以293T細(xì)胞的RNA為模板，按說明書標(biāo)準(zhǔn)程序進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，逆轉(zhuǎn)錄時間按5、10、15、30、45、60min分別進(jìn)行設(shè)置。Hifair® III Reverse Transcriptase 5min內(nèi)可合成6kb的cDNA，特異性和產(chǎn)量均優(yōu)于V品牌。
          

          


          


          圖4.5min內(nèi)可合成6kb的cDNA
          


           
          


          

          

          

          

          

          線性范圍廣
          

          

          

          

          

          


          

          以5pg-5μg的293T細(xì)胞的總RNA為模板，使用第三代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶合成cDNA。取1μL cDNA為模板，對4個基因進(jìn)行qPCR檢測，結(jié)果顯示擴增效率均在98%-100.10%之間。說明在寬廣的模板線性范圍內(nèi)均可高效合成cDNA。
          

          


          

          

          


          

          圖5.在很寬的模板范圍內(nèi)均可高效合成cDNA
          


           
          

          


          

          

          

          

          

          質(zhì)量控制嚴(yán)
          

          

          

          

          

          


          

          為了保證翌圣的逆轉(zhuǎn)酶的性能穩(wěn)定，翌圣在生產(chǎn)過程中嚴(yán)格執(zhí)行要求，以穩(wěn)定生產(chǎn)工藝，保證批次穩(wěn)定性。同時加強質(zhì)檢，對包括核酸外切酶、切口酶、RNase等殘留進(jìn)行檢測，確保無殘留，從而不影響下游的實驗。
          

          


          

          

          


          

          圖6.殘留檢測
          


          

           
          

          


          翌圣逆轉(zhuǎn)錄酶表現(xiàn)出優(yōu)異的性能，充分滿足了客戶對更高性能的需求，除此之外，翌圣還提供無甘油可凍干逆轉(zhuǎn)錄酶，搭配翌圣其它無甘油產(chǎn)品，可快速調(diào)試出可凍干試劑，滿足客戶凍干需求，讓客戶的試劑更有競爭力。
          


           
          

          


          

          

          

          

          

          相關(guān)產(chǎn)品
          

          

          

          

          

          


          

          
	
		
          
			
			
          產(chǎn)品貨號
          
			          		
			
			
          產(chǎn)品名稱
          
			          		
			
			
          產(chǎn)品定位
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          11111ES
          
			          		
			
			
          Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase 第三代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶
          
			          		
			
			
          逆轉(zhuǎn)錄酶
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          11300ES
          
			          		
			
			
          Hifair® V Reverse Transcriptase 第五代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          11302ES
          
			          		
			
			
          Hifair® III Reverse Transcriptase,200 U/μl,Glycerol-free 第三代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶(無甘油版)
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          11301ES
          
			          		
			
			
          Hifair® V Reverse Transcriptase 第五代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶(無甘油版)
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          10603ES
          
			          		
			
			
          Murine RNase Inhibitor(40 U/µL) 鼠源RNase抑制劑
          
			          		
			
			
          鼠源RNase抑制劑
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          10718ES
          
			          		
			
			
          Hieff Unicon® Hotstart Direct Taq DNA Polymerase,50 U/μL
          
			          		
			
			
          熱啟動Taq酶
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          10726ES
          
			          		
			
			
          Hieff UNICON® Hotstart E-Taq DNA Polymerase, 5 U/μL
          
			          		
		
          
	          

          

          

           
           
           
           
           
           
           
          400-6111-883