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        1. 首頁(yè) / 病原檢測(cè) / 產(chǎn)品應(yīng)用詳情

          非洲豬瘟病毒——全預(yù)混/直擴(kuò)qPCR解決方案

          非洲豬瘟(ASF)是由非洲豬瘟病毒(ASFV)感染家豬或野豬引起的一種急性、烈性、高度接觸性傳染病,其發(fā)病率和死亡率可達(dá)100%,嚴(yán)重危害著全球養(yǎng)豬業(yè),造成難以估量的經(jīng)濟(jì)損失。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為法定報(bào)告動(dòng)物疫病,我國(guó)將其列為一類動(dòng)物疫病。

           

          目前非洲豬瘟還未有疫苗和有效的治療手段,通過(guò)實(shí)驗(yàn)室診斷方法對(duì)非洲豬瘟進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的診斷,對(duì)于防止疫病的傳播至關(guān)重要。在實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)中,qPCR法是OIE推薦使用的非洲豬瘟常規(guī)診斷的重要工具,也是中國(guó)在現(xiàn)階段非洲豬瘟流行情況下首選的檢測(cè)技術(shù)。

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          圖1. Yeasen非洲豬瘟qPCR產(chǎn)品
           
           

          產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):

          操作高效便捷——預(yù)混合Mix,無(wú)需繁瑣操作,一步添加

          檢測(cè)靈敏度高——基因改造的抗體法熱啟動(dòng) Taq 酶,3 copies/反應(yīng)穩(wěn)定檢出,高靈敏度助力精準(zhǔn)“拔牙”

          預(yù)混穩(wěn)定性強(qiáng)——預(yù)混37℃放置7天、反復(fù)凍融性能穩(wěn)定

          試劑批間差小——4個(gè)不同批次進(jìn)行20次重復(fù),CV<1%

          血液耐受性好——可耐受抗凝劑樣本(EDTA、檸檬酸鈉)及0.5%全血

          多平臺(tái)均適用——Bio-Rad CFX96、ABI Q5及Slan均適配

           

          ASFV檢測(cè)解決方案一:

          UDG全預(yù)混qPCR,超強(qiáng)穩(wěn)定性

           
          產(chǎn)品搭配:磁珠法拭子樣本病毒DNA/RNA提取試劑盒(Cat#18300)+超強(qiáng)全預(yù)混穩(wěn)定性qPCR試劑(Cat#13171)
           
          1.MolPure® Magnetic Swab Viral DNA/RNA Kit(Cat#18300)
           
          2.Hieff Unicon® C55P1 TaqMan Multiplex qPCR Master Mix(UDG plus)(Cat#13171)
           

          產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):

          1.UDG防污染體系
          2.超強(qiáng)全預(yù)混穩(wěn)定性
          3.高擴(kuò)增效率,重復(fù)性好
          4.多平臺(tái)多體系適用
           
          案例展示:

          超強(qiáng)全預(yù)混穩(wěn)定性

           
          將Cat#13171配制成含引物探針的全預(yù)混液,分別在37℃放置7天,反復(fù)凍融15次,對(duì)ASF質(zhì)粒體系進(jìn)行擴(kuò)增。結(jié)果證明,37℃放置7天,對(duì)Ct值和靈敏度均無(wú)任何影響,且反復(fù)凍融15次后Ct值無(wú)明顯變化。
           
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          圖2. Yeasen(Cat#13171)全預(yù)混37℃及凍融穩(wěn)定性穩(wěn)定性
           

          試劑穩(wěn)定,重復(fù)性好

          選取Yeasen 探針?lè)╭PCR Mix 4個(gè)不同批次做20次重復(fù)試驗(yàn),對(duì)非洲豬瘟ASFV質(zhì)粒體系進(jìn)行擴(kuò)增,發(fā)現(xiàn)Ct值無(wú)明顯差異,CV小于1%。
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          圖3. 重復(fù)性測(cè)試
           

          多平臺(tái),多體系適用

          分別使用Yeasen qPCR Mix在Bio-Rad CFX96、ABI Q5及Slan平臺(tái)上對(duì)非洲豬瘟ASFV/ACT雙質(zhì)粒進(jìn)行擴(kuò)增,可以看到Y(jié)easen qPCR Mix適配各種機(jī)型的儀器,且數(shù)據(jù)可靠穩(wěn)定。
           
          1.Bio-Rad CFX96 Real-Time PCR System
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          2.ABI Q5 Real-Time PCR System
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          3.Slan Real-Time PCR System
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           圖4. 不同機(jī)型下的qPCR結(jié)果
           

          ASFV檢測(cè)解決方案二:

          免提取直擴(kuò)qPCR,操作更便捷

           
          產(chǎn)品搭配:核酸釋放劑(Cat#13720)+耐抑制qPCR預(yù)混液(Cat#11211)
           
          1.Nucleic Acid Release Reagent V2 (Cat#13720)
           

          產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):

          1.一步法免提取,無(wú)需加熱或提取純化
          2.樣本適用范圍廣,血清、血漿、肺泡灌洗液及拭子樣本均可
          3.快速裂解,室溫僅需10min
          4.可室溫運(yùn)輸和保存,4℃長(zhǎng)期儲(chǔ)存,適合基層養(yǎng)殖場(chǎng)
           
          2.Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix (Cat#11211)
           

          產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):

          1.血液雜質(zhì)耐受性強(qiáng)
          2.超高靈敏度
          3.超強(qiáng)穩(wěn)定性
           

          案例展示:

           

          血液雜質(zhì)耐受性強(qiáng),應(yīng)用范圍廣

          分別檢測(cè)Yeasen 探針?lè)╭PCR Mix及各品牌qPCR試劑對(duì)血液樣本中抑制物的耐受性,結(jié)果發(fā)現(xiàn),對(duì)于EDTA、檸檬酸鈉,Yeasen 探針?lè)╭PCR Mix顯示有很高的耐受性,且可以耐0.5%的全血。
           
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          圖5. Yeasen(Cat#11211)及各品牌同類型試劑在不同血液雜質(zhì)背景中的耐受能力表現(xiàn)
           

          超高靈敏度,3copies/反應(yīng)穩(wěn)定檢出

          使用ASFV引物探針,對(duì)ASFV單質(zhì)粒(終體系3 copies)進(jìn)行20個(gè)復(fù)孔的檢測(cè),比較各個(gè)品牌試劑的檢出率,可以看到Y(jié)easen產(chǎn)品的檢出率更高。
           
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          圖6. ASFV單質(zhì)粒(終體系3 copies,20個(gè)復(fù)孔)檢出率比對(duì)
           

          超強(qiáng)穩(wěn)定性,7天性能穩(wěn)定

          非洲豬瘟ASFV/ACT雙質(zhì)粒體系,在4℃、25℃和37℃下分別放置7天后,Ct值和熒光值不變化,性能穩(wěn)定。
           
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          圖7. ASFV單質(zhì)粒穩(wěn)定性
           
           

          ASFV檢測(cè)解決方案三:

          等溫?cái)U(kuò)增PCR,快速更高效

           

          產(chǎn)品搭配:Bst  DNA Polymerase(Cat#12908)+熱敏UDG酶(Cat#10303)

           

          1.Bst  DNA Polymerase Bst  DNA聚合酶 (Cat#12908

           

          產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):

          1.高擴(kuò)增效率

          2.高產(chǎn)量擴(kuò)增

          3.dUTP耐受性

           

          2.Uracil DNA Glycosylase(UDG/UNG),heat-labile,1 U/μL (Cat#10303)

           

          產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):

          1.對(duì)溫度敏感、易于滅活

          2.較常規(guī)UDG酶大幅度降低對(duì)含dU擴(kuò)增產(chǎn)物的降解作用

           

          案例展示:

          使用翌圣和進(jìn)口品牌N*的同類型Bst DNA聚合酶,擴(kuò)增結(jié)果表明Ct值和熒光強(qiáng)度無(wú)顯著差異。

           

          完美替代進(jìn)口品牌N*產(chǎn)品

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          圖8. 不同品牌同類型Bst DNA聚合酶的擴(kuò)增曲線

           

           

          產(chǎn)品訂購(gòu)

           

          類型

          描述

          名稱

          貨號(hào)

          樣本提取試劑

          直擴(kuò)免提取

          MolPure® Magnetic Swab Viral DNA/RNA Kit

          18300ES

          磁珠法提取

          Nucleic Acid Release Reagent V2

          13720ES

          檢測(cè)預(yù)混液

          全預(yù)混(含UDG)

          Hieff Unicon® C55P1 TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (UDG plus)

          13171ES

          耐抑制高靈敏度

          Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix

          11211ES

          單酶

          等溫?cái)U(kuò)增

          Bst  DNA Polymerase

          12908ES

          熱敏UDG酶

          Uracil DNA Glycosylase (UDG), heat-labile

          10303ES

           
           

          相關(guān)產(chǎn)品

           
          類型
          描述
          名稱
          貨號(hào)
          單酶原料
          可凍干等溫?cái)U(kuò)增
          Bst  DNA 聚合酶(無(wú)甘油)
          12909ES
          熱啟動(dòng)Taq酶
          HieffUNICON® HotStartDirectTaqDNAPolymerase
          10717ES
          Taq酶抗體
          Taq酶雙封閉抗體
          Hieff® Double-Block anti-Taq DNA Polymerase Antibody
          31303ES
          聚合酶活性封閉抗體
          Hieff® anti-Taq DNA Polymerase Antibody Taq酶單克隆抗體
          31301ES
          外切酶活性封閉抗體
          Hieff® anti-exonuclease of Taq Antibody Taq酶5'→3'外切酶單克隆抗體
          31302ES
           
           

          試用申請(qǐng)

           

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