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          Hieff NGS? DNA Selection Beads 分選磁珠(完美替代AMPure XPBeads)
           
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          產(chǎn)品說明書
                  
          FAQ
                  
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          產(chǎn)品信息
          


          
	
		
          
			
			
          產(chǎn)品名稱
          
			          		
			
			
          產(chǎn)品編號
          
			          		
			
			
          規(guī)格
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          Hieff NGS® DNA Selection Beads DNA分選磁珠
          
			          		
			
			
          12601ES03
          
			          		
			
			
          1 mL
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          12601ES08
          
			          		
			
			
          5 mL
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          12601ES56
          
			          		
			
			
          60 mL
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          12601ES75
          
			          		
			
			
          450 mL
          
			          		
		
          
	          

          


          產(chǎn)品描述
          


          Hieff NGS® DNA Selection Beads基于SPRI (Solid Phase Reverse Immobilization)原理，配合精心優(yōu)化過的緩沖體系，可用于二代測序文庫構(gòu)建過程中的DNA片段分選、純化。本產(chǎn)品可適用于各品牌的DNA、RNA建庫試劑盒，和目前廣泛使用的AMPure XP Beads使用方式相同，片段回收效率和文庫大小分布均與AMPure XP Beads高度吻合。
          


           
          


          運輸與保存方法
          


          冰袋運輸。2 ~ 8℃保存，效期18個月。避免冷凍！
          


           
          


          注意事項
          


          1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
          


          2）磁珠使用前須在室溫平衡至少30 min。
          


          3）80%乙醇需現(xiàn)用現(xiàn)配，否則將影響回收效率。
          


          4）進行長度分選時，初始樣品體積需≥100μL，不足時請用超純水補齊。樣品體積太小，將導(dǎo)致移液誤差增大，進而影響分選的準確性。
          


          5) 本產(chǎn)品僅用作科研用途！
          


           
          


          使用方法 
          


          1. 準備工作
          


          將磁珠由冰箱中取出，室溫平衡至少30 min。配制80%乙醇。
          


          2. 長度分選（雙輪法）
          


          長度分選操作流程如圖1所示，具體操作如下。
          


          


           
          


          圖1雙輪分選操作流程
          


          1）請渦旋振蕩或充分顛倒磁珠以保證混勻。
          


          2）根據(jù)要求，參考表1向DNA溶液中加入第一輪分選磁珠，渦旋混勻或移液器吹打10次混勻。
          


          3）室溫孵育5 min。
          


          4）將離心管短暫離心并置于磁力架中，待溶液澄清后（約5 min），小心轉(zhuǎn)移上清到干凈的離心管中。
          


          注意：轉(zhuǎn)移上清時，請殘留2 μL液體于管底，切勿全部吸出上清，避免吸到磁珠并影響分選效果。
          


          舉例：當(dāng)初始體積為100 μL，第一輪使用0.8×比例，即加入80 μL磁珠，推薦吸出178 μL的上清。
          


          5）參考表1向上清中加入第二輪分選磁珠。
          


          6）渦旋混勻或移液器吹打10次混勻，室溫靜置5 min。
          


          7）將離心管短暫離心并置于磁力架中，待溶液澄清后（約5 min），小心移除上清。
          


          8）保持離心管始終處于磁力架中，加入200 μL新鮮配制的80%乙醇漂洗磁珠，室溫孵育30 s，小心移除上清。
          


          9）重復(fù)步驟8。
          


          10）保持離心管始終處于磁力架中，開蓋干燥磁珠至剛剛出現(xiàn)龜裂（約5 min）。
          


          注意：切記磁珠不要干燥時間太久，磁珠干燥過度將影響純化效果。
          


          11）將離心管從磁力架中取出，加入適量ddH2O（≥20 μL），渦旋振蕩或使用移液器輕輕吹打充分混勻，室溫孵育5 min。
          


          12）將離心管短暫離心并置于磁力架中分離磁珠和液體。待溶液澄清后（約5 min），小心吸取上清至干凈的管中，即完成分選。
          


          3. DNA片段分選參考條件
          


          通過超聲法將小牛胸腺DNA進行片段化，制備100-1000 bp的Smear片段，根據(jù)表1進行雙輪分選。結(jié)果使用Agilent 2100 Bioanalyzer進行分析（圖2）。
          


          表1磁珠文庫分選推薦比例
          


          
	
		
          
			
			
          DNA片段大小
          
			          		
			
			
          250-350 bp
          
			          		
			
			
          320-420 bp
          
			          		
			
			
          450-550 bp
          
			          		
			
			
          550-700 bp
          
			          		
			
			
          700-900 bp
          
			          		
			
			
          800-1000 bp
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          第一輪體積比（Beads:DNA）
          
			          		
			
			
          0.80×
          
			          		
			
			
          0.70×
          
			          		
			
			
          0.60×
          
			          		
			
			
          0.55×
          
			          		
			
			
          0.50×
          
			          		
			
			
          0.45×
          
			          		
		
          
		
          
			
			
          第二輪體積比（Beads:DNA）
          
			          		
			
			
          0.20×
          
			          		
			
			
          0.20×
          
			          		
			
			
          0.20×
          
			          		
			
			
          0.15×
          
			          		
			
			
          0.15×
          
			          		
			
			
          0.15×
          
			          		
		
          
	          

          


          注：表中“×”表示樣品DNA體積。如文庫插入片段長度為250 bp，樣品DNA體積為100mL，則第一輪分選磁珠使用體積為0.80×100 mL=80 mL；第二輪分選磁珠使用體積為0.20×100 mL=20 mL。
          


          


          圖2 Agilent 2100 high sensitivity DNA chip electopherogram
          


          Smear fragments溶于ddH2O，使用0.80×/0.20×至0.45×/0.15×磁珠進行片段分選
          


           
          


          HB240401
          


           
          

             
           
           
           
           
           
           
           
          400-6111-883