產(chǎn)品描述

Anti-V5 Affinity Gel（Anit-V5親和純化凝膠）由高質(zhì)量的鼠源 IgG2b單克隆抗體與Sepharose 4B gel通過(guò)供價(jià)偶聯(lián)制備，本產(chǎn)品具有較高的V5標(biāo)簽融合蛋白加載容量（至少為0.5 mg protein/mL凝膠），雜蛋白非特異結(jié)合少，可用于帶有V5標(biāo)簽的融合蛋白免疫沉淀（IP）和純化。

推薦使用量：每500 μL蛋白粗體液需使用5 μL凝膠。

 

產(chǎn)品性質(zhì)

克隆號(hào)（Clone）	10B5
亞型（Isotype）	Mouse IgG1
純化方法（Purity）	Protein A
抗體濃度（Antibody Concentration）	7.5g抗體/L凝膠
應(yīng)用（Application）	蛋白純化，免疫沉淀（IP）
蛋白結(jié)合量（Protein）	≥0.5mg蛋白/mL凝膠
儲(chǔ)存緩沖液（Buffer）	10 mM Na3PO4，150 mM NaCl，50%甘油，pH 7.4，含有0.02%（w/v）疊氮鈉

 

運(yùn)輸和保存方法

冰袋運(yùn)輸。未開(kāi)封的產(chǎn)品在-20℃下可穩(wěn)定保存1年。禁止在不含甘油的溶液中凍存。

 

注意事項(xiàng)

1. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2. 本產(chǎn)品僅作科研用途！

 

使用方法

1）輕微重懸Anti-V5 Affinity Gel，形成均一溶液。轉(zhuǎn)移10 μL混合液（5 μL gel）至新的離心管中。

2）加入600 μL TBS，輕輕的重懸Anti-V5 Affinity Gel，10,000 rpm離心30 s, 棄上清，重復(fù)上述步驟 3-4 次。

注意：盡可能去除上清，但不要吸到凝膠。重復(fù)該步驟3-4次。

3）在上述沉淀中加入200-1000 μL細(xì)胞裂解液。4℃，輕搖孵育2小時(shí)。

4）10,000 rpm離心30 s，上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中保存以后檢測(cè)。

5）凝膠沉淀用0.5 mL TBS洗3-4 次，直至上清OD280 < 0.05。

6）洗脫：具體選擇哪種洗脫條件取決于目的蛋白的特性或下游應(yīng)用。

A．加入100 μL V5多肽（150 μg/mL）（Cat 20575ES）洗脫V5融合蛋白，4℃輕搖孵育30 min，10,000 rpm離心30 s，收集上清。

B．用于SDS-PAGE電泳：加入10 μL 2×蛋白上樣緩沖液，煮沸5 min。10,000 rpm 離心30 s，小心轉(zhuǎn)移上清，用于SDS-PAGE檢測(cè)。上樣緩沖液中SDS會(huì)破壞抗體，所以親和純化凝膠不能重復(fù)使用。

HB230112