產(chǎn)品說明書
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COA
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產(chǎn)品描述
Anti-HA親和純化凝膠（Anti-HA Affinity Gel）由高質(zhì)量的鼠源 IgG1 單克隆抗體與sepharose 4B gel 通過供價偶聯(lián)制備，本產(chǎn)品具有較高的HA標(biāo)簽融合蛋白加載容量（至少為1.5 mg protein/mL凝膠），雜蛋白非特異結(jié)合少，可用于帶有HA標(biāo)簽的融合蛋白免疫沉淀（IP）和純化。
推薦使用量：每500 μL蛋白粗體液需使用5 μL凝膠。
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產(chǎn)品性質(zhì)
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克隆號（Clone） |
1A4 |
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亞型（Isotype） |
Mouse IgG1 |
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純化方法（Purity） |
Protein A |
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抗體濃度（Antibody Concentration） |
7.5g抗體/L凝膠 |
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應(yīng)用（Application） |
蛋白純化，免疫沉淀（IP） |
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蛋白結(jié)合量（Protein） |
≥1.5mg蛋白/mL凝膠 |
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儲存緩沖液（Buffer） |
10 mM Na3PO4，150 mM NaCl，50%甘油，pH 7.4，含有0.02%（w/v）疊氮鈉 |
運輸和保存方法
冰袋運輸。未開封的產(chǎn)品在-20℃下可穩(wěn)定保存1年。禁止在不含甘油的溶液中凍存。
注意事項
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。本產(chǎn)品僅作科研用途！
使用方法
1）輕微重懸Anti-HA Affinity Gel，形成均一溶液。轉(zhuǎn)移10 μL混合液（5μL gel）至新的離心管中。
2）加入500 μL TBS，輕輕的重懸Anti-HA Affinity Gel，5,000 rpm 離心30 s, 棄上清，重復(fù)上述步驟 3-4 次。
注意：盡可能去除上清，但不要吸到凝膠。
3）在上述沉淀中加入200-1000 μL細胞裂解液。4℃緩慢孵育2小時。
4）5,000 rpm 離心30 s，上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中保存以后檢測。
5）沉淀用0.5 mL TBS 洗3-4次，去盡上清。
6）洗脫：具體選擇哪種洗脫條件取決于目的蛋白的特性或下游應(yīng)用。
A．加入100 μL HA多肽（150 μg/mL）（Cat 20574ES）洗脫HA融合蛋白，4℃緩慢孵育30 min，5,000 rpm 離心30 s，收集上清。
B．用于SDS-PAGE電泳：加入10 μL 2×蛋白上樣緩沖液，煮沸5 min。5,000 rpm 離心30 s，小心轉(zhuǎn)移上清，用于SDS-PAGE檢測。上樣緩沖液中SDS會破壞抗體，所以親和純化凝膠不能重復(fù)使用。
HB221229
