產(chǎn)品說明書
FAQ
COA
已發(fā)表文獻(xiàn)
人骨成型蛋白-7 (Human BMP-7)是TGF-β超家族的成員，被認(rèn)為是軟骨細(xì)胞最有效的合成代謝因子之一。人BMP-7的生長(zhǎng)因子結(jié)構(gòu)域與小鼠和大鼠BMP-7具有98%的氨基酸序列同一性。BMP-7在多種器官系統(tǒng)中發(fā)揮作用。它促進(jìn)新骨的形成和腎單位的發(fā)育，抑制前列腺上皮的分化，并拮抗上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化。骨形態(tài)發(fā)生蛋白（BMP）信號(hào)傳導(dǎo)調(diào)節(jié)一系列細(xì)胞過程，并在早期胚胎的模式化中發(fā)揮重要作用。已知BMP-7的表達(dá)對(duì)糖尿病腎病期間的腎損傷具有保護(hù)作用，并且在糖尿病腎病進(jìn)展期早期消失。BMP7的可能臨床應(yīng)用還有基于其在中風(fēng)動(dòng)物模型中的神經(jīng)保護(hù)作用。
翌圣Human BMP-7 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒，用于定量測(cè)定血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中的BMP-7。特異性抗BMP-7抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本，經(jīng)過孵育，樣本中存在的BMP-7與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入檢測(cè)抗體孵育結(jié)合，經(jīng)洗滌，再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中BMP-7的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm 波長(zhǎng)(參考波長(zhǎng)570 - 630 nm)測(cè)定吸光度值。
產(chǎn)品信息
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貨號(hào) |
97007ES48 / 97007ES96 |
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規(guī)格 |
48 T / 96 T |
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檢測(cè)范圍 |
62.5-4000 pg/mL |
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檢測(cè)方法 |
雙抗夾心法 |
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檢測(cè)時(shí)長(zhǎng) |
4.5小時(shí) |
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靈敏度 |
44.6 pg/mL |
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稀釋線性 |
86 - 127% |
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回收率 |
81 - 126% |
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板內(nèi)差 |
3.3% |
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板間差 |
4.2% |
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
- 標(biāo)曲數(shù)據(jù)
數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，生成的標(biāo)曲用于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析。標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
- 靈敏度檢測(cè)
BMP-7的最低檢測(cè)限為44.6 pg/mL，通過使用重復(fù)檢測(cè)20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計(jì)算得出。
- 精密度檢測(cè)
酶標(biāo)板內(nèi)精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測(cè)定10次，評(píng)估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。
酶標(biāo)板間精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測(cè)30次，評(píng)估酶標(biāo)板間的精密度。
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項(xiàng)目 |
板內(nèi)精密度 |
板間精密度 |
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樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
10 |
10 |
10 |
30 |
30 |
30 |
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平均值 |
2004.8 |
458.1 |
115.7 |
1999.2 |
453.6 |
114.2 |
|
標(biāo)準(zhǔn)差 |
106.5 |
12.6 |
2.0 |
101.1 |
17.1 |
4.1 |
|
變異系數(shù)（%） |
5.3 |
2.7 |
1.8 |
5.1 |
3.8 |
3.6 |
- 回收率檢測(cè)
通過不同水平的BMP-7添加于樣本中來測(cè)定回收率，其回收率如下:
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樣本類型 |
平均回收率(%) |
范圍（%） |
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血清 |
101.3 |
86.1-126.4 |
|
血漿 |
103.9 |
81.8-122.1 |
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細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
103.6 |
89.0-126.4 |
- 稀釋線性檢測(cè)
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血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
113.9% |
105.8-127.8 |
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1:04 |
107.7% |
104.1-113.9 |
|
1:08 |
97.4% |
90.7-101.4 |
|
1:16 |
95.3% |
87.2-101.6 |
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血漿稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
110.8% |
106.8-113.5 |
|
1:04 |
113.9% |
95.8-122.2 |
|
1:08 |
96.5% |
86.3-106.6 |
|
1:16 |
103.9% |
91.5-118.6 |
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細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
102.0% |
101-103.1 |
|
1:04 |
110.9% |
104.3-119.7 |
|
1:08 |
97.8% |
94.3-102.0 |
|
1:16 |
98.6% |
94.9-103.3 |
- 樣本值
應(yīng)用本試劑盒，檢測(cè)若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。
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樣本類型 |
樣本數(shù)目 |
平均值（pg/mL） |
樣本值（pg/mL） |
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血清 |
6 |
n.d. |
n.d. |
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血漿 |
12 |
n.d. |
n.d. |
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細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
8 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測(cè)范圍內(nèi)得62.5 pg/mL
- 測(cè)定特異性
本試劑盒識(shí)別天然和重組BMP-7，沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。
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Recombinant human: |
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BMP-2 |
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BMP-3 |
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BMP-4 |
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BMP-5 |
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BMP-6 |
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TGF-β1 |
檢測(cè)簡(jiǎn)圖
疑問解答
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問題 |
造成原因 |
解決方法 |
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標(biāo)曲不好 |
移液量不準(zhǔn)確 |
檢查移液器，按時(shí)校準(zhǔn)，仔細(xì)操作，充分混勻時(shí)蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
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稀釋方法不恰當(dāng) |
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顯色值偏低 |
孵育時(shí)間太短 |
給予足夠的孵育時(shí)間，樣本和溶解的標(biāo)準(zhǔn)品隔夜后更換。 |
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移液量不足或稀釋不當(dāng) |
校準(zhǔn)移液器和規(guī)范操作 |
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CV偏高 |
酶標(biāo)板清洗不當(dāng) |
使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機(jī)，檢查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
準(zhǔn)備新鮮洗液 |
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靈敏度較低 |
試劑盒儲(chǔ)存不當(dāng) |
按照產(chǎn)品組分表進(jìn)行保存。 |
