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        1. SYBR Green I (10,000× in DMSO) 核酸凝膠染料

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          產(chǎn)品說明書

          FAQ

          COA

          已發(fā)表文獻(xiàn)

          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

           

          SYBR Green I,一種靈敏度非常高的dsDNA熒光染料,常用于核酸瓊脂糖凝膠/聚丙烯酰胺凝膠電泳。SYBR Green I染料的最大激發(fā)波長(zhǎng)為497 nm,但是在~290 nm和~380 nm處有二級(jí)激發(fā)峰。與DNA結(jié)合的SYBR Green I染料的熒光發(fā)射集中在520 nm。因此,該染料可適用于多種凝膠檢測(cè)儀。

          本品是溶于DMSO的SYBR Green I 10,000×染液。

           

          產(chǎn)品信息

           

          貨號(hào)

          10222ES60 / 10222ES76 / 10222ES86 / 10222ES90

          規(guī)格

          100 µL / 500 µL / 5×500 µL / 10×500 µL

           

          儲(chǔ)存條件

           

          -25~-15℃保存,有效期1年。

           

          使用說明

           

          【開始使用前】

          使用前將本品取出并回溫至室溫,使DMSO徹底解凍、溶液均一。于離心機(jī)上短暫離心確保所有溶液至管底。第一次使用時(shí)可將本品分裝成多個(gè)小份后凍存,小份染料將更快速溶解。

          1. 染色

          1)電泳后DNA染色

          a. 在瓊脂糖或非變性聚丙烯酰胺凝膠上進(jìn)行電泳。

          *TBE和TAE緩沖液均適合于SYBR Green I染料。

          b. 用TE、TAE或TBE將SYBR Green I進(jìn)行10,000倍稀釋。

           SYBR Green I染色對(duì)pH敏感,為獲得最佳的靈敏度,應(yīng)確認(rèn)在染色溫度下染色液的pH值在7.5-8.0之間(pH8.0更佳)。

           用水配制的染色液不如用緩沖液配制的穩(wěn)定,為得到較好靈敏度,必須在24 h內(nèi)使用。

          c. 染液要充分覆蓋凝膠,室溫輕搖孵育10-40 min。

           推薦用塑料而不是玻璃容器來儲(chǔ)存染色液,因?yàn)槿玖蠒?huì)吸附到玻璃表面。

           染色過程避光進(jìn)行,建議在容器上加蓋鋁箔或置于暗處。

           凝膠厚度及瓊脂糖或聚丙烯酰胺的比例不同,染色時(shí)間將有所不同。

           無需脫色。

           染液可置暗處(最好是冷藏)放置至少1周,重復(fù)使用最多4次。

          2)電泳前DNA染色

          a. 一般選擇配制成SYBR Green I預(yù)制凝膠來實(shí)驗(yàn)。

          臨灌膠前將SYBR Green I儲(chǔ)存液按照1:10,000倍稀釋到凝膠溶液中,預(yù)制成含有SYBR Green I染料的瓊脂糖或非變性聚丙烯酰胺凝膠。預(yù)制的SYBR Green I凝膠的DNA檢測(cè)下限(大約為30-40 pg/條帶),略高于電泳后染色(<20 pg/條帶)。此外,在SYBR Green I凝膠中的DNA片段遷移率明顯比無染料凝膠中的相同片段慢。

          b. 作為DNA模板預(yù)染標(biāo)記。

          一般而言,DNA在電泳前與染料工作液至少孵育15 min。

          1. 凝膠成像(紫外或藍(lán)光透射儀或紫外頂置光源直射)

          可在紫外或藍(lán)光光源下輕松觀察到用SYBR Green I染色的DNA。

          1. 從雙鏈DNA中去除SYBR Green I

          SYBR Green I染色的DNA移至100 mM NaCl中,加入2.5倍體積的無水或95%的乙醇。在冰上孵育約20 min,在4℃離心至少10 min。去除乙醇,并用70%乙醇洗滌沉淀。讓乙醇揮發(fā),用TE重懸雙鏈DNA即可。

           

          注意事項(xiàng)

           

          1. 獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行的艾姆斯試驗(yàn)表明SYBR Green I 的致突變性明顯比溴化乙錠要低得多,目前尚無關(guān)于SYBR Green I 染料對(duì)人體的致突變性或毒性的數(shù)據(jù),但我們必須提醒用戶注意,該染料能與DNA結(jié)合,因此,它應(yīng)當(dāng)被看作潛在誘變劑,在使用前小心謹(jǐn)慎。另外,在處理DMSO儲(chǔ)存液時(shí)應(yīng)特別小心,因?yàn)镈MSO能促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織。染料的處理應(yīng)當(dāng)符合當(dāng)?shù)氐囊?guī)定。
          2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
          3. 本產(chǎn)品僅作科研用途!

          Ver.CN20240126

           

          400-6111-883