產(chǎn)品說明書
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已發(fā)表文獻(xiàn)
產(chǎn)品描述
RTGreen是一種與SYBR Green I具有相似光譜特性的DNA結(jié)合染料，獨特的工作特性使其不僅可用于熒光定量PCR（qPCR），而且可用于高分辨率溶解曲線（HRM）分析。相比較于SYBR Green I，優(yōu)勢主要表現(xiàn)在以下三個方面：
1）RTGreen對PCR 抑制性遠(yuǎn)小于SYBR Green I
智能化的“按要求釋放”DNA 結(jié)合技術(shù)賦予RTGreen對PCR的低抑制性。正因如此，PCR實驗中可使用高濃度的RTGreen從而獲得大大增強(qiáng)的擴(kuò)增信號。高濃度的RTGreen消除了“染料重分布”的缺陷，使其既可用于多重PCR，也可用于HRM分析。
2）RTGreen的穩(wěn)定性極強(qiáng)
在正常的儲存、操作和PCR過程中不會被破壞。在緩沖溶液中的染料可以安全的儲存在室溫或冰箱里，也可以反復(fù)凍融。然而SYBR Green I很不穩(wěn)定而且降解后對PCR 抑制性更強(qiáng)。
3）RTGreen降低細(xì)胞膜通透性，操作更加安全
細(xì)胞膜穿透性測試表明，RTGreen 幾乎不能穿透細(xì)胞膜，安全性高。RTGreen 既沒有誘變性也沒有細(xì)胞毒性。相反，雖然 SYBR Green I 本身誘變性很弱，但它在細(xì)胞中可能抑制了正常DNA 的修復(fù)機(jī)制，使其有誘變增強(qiáng)作用。
另外，RTGreen具有優(yōu)越的兼容性，能夠和各知名品牌的qPCR儀器兼容。用RTGreen替代SYBR Green I，無需改變?nèi)魏文壳笆褂玫牟僮鞑襟E和儀器設(shè)備，非常方便。
運輸與保存方法
冰袋運輸。4℃干燥避光保存。保質(zhì)期12個月。
注意事項
1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
2）本產(chǎn)品僅作科研用途！
操作步驟（亦可使用實驗室常用的SYBR Green I qPCR操作流程）
1.參照下表配制qPCR反應(yīng)體系（50 μL）
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組分 |
使用量 |
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10×polymerase buffer without magnesium |
5 μL |
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50 mM MgCl2 |
2.5 μL |
|
2 mM dNTP |
5 μL |
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20× RTGreen |
2.5 μL |
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Taq DNA polymerase |
1-5 U |
|
each of primers (final concentrations) |
0.1-1 μM |
|
ddH2O |
Up to 50 μL |
【注】：
1）使用RTGreen染料進(jìn)行qPCR反應(yīng)的Mg2+最佳推薦濃度是2.5 mM。
2）使用Hotstart Taq DNA polymerase可以得到更理想的擴(kuò)增效果，但需要根據(jù)經(jīng)驗調(diào)整工作體系。
2.熱循環(huán)熒光檢測儀內(nèi)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并在退火或延伸步驟實時記錄熒光信號。
相關(guān)產(chǎn)品
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產(chǎn)品名稱 |
貨號 |
規(guī)格 |
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10201ES03 |
1 mL |
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10202ES76 |
500 μL |
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10204ES76 |
500 μL |
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10208ES60/76 |
100/500 g |
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10214ES08/25 |
5/25 g |
|
|
10501ES60/80 |
100/1000 T |
HB210824
