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        1. 3:1Agarose 3:1瓊脂糖

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          產(chǎn)品說明書

          FAQ

          COA

          已發(fā)表文獻(xiàn)

          產(chǎn)品描述

          瓊脂糖(Agarose)是純化的線性半乳聚糖親水膠體,提取自瓊脂或者含瓊脂的海藻,結(jié)構(gòu)上是一種線性聚合物,由β-D-吡喃半乳糖(1-4)連接3,6-脫水α-L-吡喃半乳糖基構(gòu)成。作為一種凝膠試劑,常用于通過凝膠電泳或者印跡法(如Northern或Southern)來進(jìn)行日常核酸分析,也適用于蛋白應(yīng)用,如輻射狀免疫擴(kuò)散(RID)實(shí)驗(yàn)。

          本品為3:1 瓊脂糖,與常規(guī)瓊脂糖相比,對(duì)PCR產(chǎn)物,小片段DNA(1000 bp以下)具有很高的分辨率。此外,還具有如下特點(diǎn):1)易溶解,膠液更清澈,可以配制高達(dá)5%的凝膠;2)很低的背景;3)品質(zhì)穩(wěn)定等。

          瓊脂糖的基本參數(shù),包括:

          1)硫酸鹽含量(sulfate content)——純度指標(biāo),因?yàn)榱蛩岣谴嬖诃傊莾?nèi)的主要離子基團(tuán);

          2)凝膠強(qiáng)度(gel strength)——施加于凝膠使之?dāng)嗔训耐饬Γ?/span>

          3)膠凝點(diǎn)(Gel point)——水溶性瓊脂糖溶液冷卻后形成凝膠時(shí)的溫度。液體向凝膠轉(zhuǎn)化的過程中,瓊脂糖溶液具有滯后性,因此,膠凝點(diǎn)不等同于膠熔點(diǎn)。

          4)電滲(EEO)——液體穿透凝膠的一種電動(dòng)運(yùn)動(dòng)。瓊脂糖凝膠內(nèi)的陰離子基團(tuán)吸附在基質(zhì)上不會(huì)發(fā)生遷移,但是解離的陽離子就會(huì)朝負(fù)極遷移,從而產(chǎn)生電滲。由于生物聚合物的電泳遷移通常是朝負(fù)極運(yùn)動(dòng),則EEO產(chǎn)生的內(nèi)部對(duì)流會(huì)干擾分離效率。


          產(chǎn)品性質(zhì)

          外觀(Appearance)

          白色粉末

          凝膠強(qiáng)度(Gel Strength)

          ≥650g/cm2(1.5% gel)

          凝膠溫度(Gel Point)

          ≤36℃(1.5% gel)

          融膠溫度(Melting Point)

          ≤80℃(1.5% gel)

          電滲值(EEO, -mr)

          ≤0.10

          外觀(Appearance)

          無色清澈膠液

          硫酸鹽(Sulfate, %)

          ≤0.10%

          水分(Moisture)

          ≤10%

          灰分(Ash Content)

          ≤0.5%

          DNA酶(DNase)

          Not detected

          RNA酶(RNase)

          Not detected

          蛋白酶(Protease)

          Not detected

          核酸內(nèi)切酶(Endonuclease)

          Not detected


          運(yùn)輸和保存方法

          室溫運(yùn)輸。室溫干燥保存。有效期5年。

            

          使用方法

          1)配制適量電泳及制膠用的緩沖液(根據(jù)電泳需要,配制合適濃度的電泳及制膠緩沖液),倒入合適三角瓶中。

          【注】:用于電泳的緩沖液和用于制膠的緩沖液必須是相同的。
          2)根據(jù)制膠量及凝膠濃度,加入準(zhǔn)確稱量的瓊脂糖粉(總液體量不宜超過三角錐瓶的50%容量)。

          3)在微波爐中加熱溶解瓊脂糖,設(shè)置中火加熱至沸騰,保持膠液沸騰約30 Sec,戴上防熱手套,移開三角錐瓶,小心搖動(dòng)三角錐瓶,重懸未溶解顆粒,再次用高火加熱1 min(或加熱直至瓊脂糖完全溶解)。請(qǐng)戴上防熱手套,小心搖動(dòng)三角錐瓶,使瓊脂糖膠液充分均勻。

          【注】:必須保證瓊脂糖充分完全溶解,此時(shí)瓊脂糖膠液清澈,否則,會(huì)造成電泳圖像模糊不清。加熱時(shí)如膠液劇烈沸騰發(fā)泡,停止加熱。微波爐中加熱時(shí)間不宜過長(zhǎng)。

          4)使溶液冷卻至60℃左右,如需要可在此時(shí)加入溴化乙錠(EB)溶液使其終濃度為0.5 µg/ml,并充分混勻。

          【注】:溴化乙錠是一種致癌物質(zhì)。使用含有溴化乙錠的溶液時(shí),請(qǐng)戴用手套。建議使用我司提供的EB無毒替代品(YeaRed 核酸染料,Cat# 10202),使用時(shí)僅需用制膠緩沖液稀釋至1×工作液即可。

          5)將瓊脂糖溶液倒入制膠模具中,在適當(dāng)位置處插上梳子。凝膠厚度一般在3-5 mm之間。

          6)在室溫下使膠凝固(大約30 min-1 h),然后放置于電泳槽中進(jìn)行電泳。

          【注】:凝膠不立即使用時(shí),請(qǐng)用保鮮膜將凝膠包好后在4℃下保存,一般可保存 2~5 天。


          瓊脂糖濃度與DNA分離范圍

          線性DNA片段大小(bp)

          10-100 bp

          100-500 bp

          500-1000 bp

          瓊脂糖濃度(%),1×TAE Buffer

          6.0

          4.0

          3.0

          瓊脂糖濃度(%),1×TBE Buffer

          5.0

          3.0

          2.0


          注意事項(xiàng)

          1)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
          2)本產(chǎn)品僅作科研用途!


          相關(guān)產(chǎn)品

          產(chǎn)品名稱

          貨號(hào)

          規(guī)格

          Goldview核酸染料(10,000×)

          10201ES03

          1 mL

          YeaRed 核酸染料(10,000× 水溶液)HOT

          10202ES76

          500 μL

          YeaGreen核酸染料(10,000× 水溶液)

          10204ES76

          500 μL

          Agarose瓊脂糖HOT

          10208ES60/76

          100/500 g

          Low Melting Point Agarose 低熔點(diǎn)瓊脂糖

          10214ES08/25

          5/25 g

          2000 DNA Marker HOT

          10501ES60/80

          100/1000 T

          HB210824

          400-6111-883