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Blasticidin S 殺稻瘟菌素S(滅瘟素) | CAS 3513-03-9

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產(chǎn)品說明書

FAQ

COA

已發(fā)表文獻(xiàn)

Blasticidin S是一種來自Streptomyces griseochromogenes的核苷類抗生素，通過干擾核糖體中肽鍵的形成來特異性地抑制原核和真核生物的蛋白質(zhì)合成。Blasticidin S用于篩選攜帶有bsr或BSD耐受基因的轉(zhuǎn)染細(xì)胞。殺稻瘟菌素具有快速而強(qiáng)效的作用模式，很低的抗生素濃度便能導(dǎo)致細(xì)胞迅速死亡。

Cat#60218ES10、60218ES50、60218ES60均以液體形式提供，濃度為10 mg/mL（in HEPES緩沖液，pH 7.5）。

Cat#60218ES80為粉末形式提供，使用時(shí)可用無菌水或者緩沖液配制成5-10 mg/mL的儲(chǔ)存液。

產(chǎn)品信息

貨號(hào)	60218ES10 / 60218ES50 / 60218ES60 / 60218ES80
規(guī)格	10 mg / 5 X 10 mg / 10 X 10 mg / 1 g
CAS號(hào)（CAS NO.）	3513-03-9
分子式（Molecular Fomular）	C₁₇H₂₆N₈O₅·HCl
分子量（Molecular Weight）	458.9 g/mol
純度（Purity）	>95%（HPLC）
結(jié)構(gòu)（Structure）

組分信息

組分名稱	60218ES10	60218ES50	60218ES60	60218ES80
規(guī)格	10 mg	5×10 mg	10×10 mg	1 g
外觀	液體	液體	液體	粉末

儲(chǔ)存條件

-25~-15℃保存。粉末有效期3年，液體有效期2年，避免反復(fù)凍融。

使用說明

1. 應(yīng)用濃度

1）Escherichia coli

E. coli對(duì)Blasticidin S的敏感性稍差，但是轉(zhuǎn)化子對(duì)Blasticidin S具有耐受性，可以用低鹽LB培養(yǎng)基（pH 8）進(jìn)行篩選，濃度范圍為50-100 μg/mL Blasticidin S。高pH值可以提高Blasticidin S的活性。

2）哺乳動(dòng)物細(xì)胞

哺乳動(dòng)物細(xì)胞中Blasticidin S的工作濃度范圍在1-50 μg/mL。初次實(shí)驗(yàn)建議通過滅殺曲線來確定最佳使用濃度。一些哺乳動(dòng)物細(xì)胞的建議工作濃度：

細(xì)胞	種屬	組織	培養(yǎng)基	Blasticidin S濃度 (μg/mL)
HeLa	Human	Uterus	DMEM	3-10
293	Human	Kidney	DMEM	3-10
B16	Mouse	Melanoma	RPMI	3-10
PC1.0	Hamster	Adenocarcinoma	RPMI	10-30

2. 操作步驟（哺乳動(dòng)物穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選）

Blasticidin S通常使用濃度為10 μg/mL。攜帶bsr或BSD基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，在含有Blasticidin S的正常生長(zhǎng)培養(yǎng)基中孵育，用于篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。

1）轉(zhuǎn)染后48 h，用含有適宜濃度Blasticidin S的新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞傳代（注：細(xì)胞處于活躍分裂期時(shí)抗生素工作最好。細(xì)胞密度太高，抗生素效率降低。細(xì)胞分盤時(shí)覆蓋率最好不超過25%）。

2）每3-4天去除培養(yǎng)基，加入含抗生素的新鮮培養(yǎng)基。

3）7天后檢測(cè)細(xì)胞集落形成。根據(jù)宿主細(xì)胞種類和轉(zhuǎn)染/篩選效率，集落形成可能需要增加一周或更久。

4）轉(zhuǎn)移5-10個(gè)耐受克隆到35 mm細(xì)胞盤中，加入選擇培養(yǎng)基維持培養(yǎng)7天。隨后用細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)。

注意事項(xiàng)

1. 本產(chǎn)品僅作科研用途。

2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

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