產(chǎn)品簡(jiǎn)介

 

Lambda核酸外切酶來(lái)源于lambda噬菌體，作用于雙鏈DNA，沿5'→3' 方向逐步切去5' 單核苷酸。最適底物是5' 磷酸化的雙鏈DNA，也能緩慢降解單鏈 DNA 和非磷酸化雙鏈DNA底物。其中，降解非磷酸化雙鏈DNA，單鏈DNA底物的效率只有磷酸化雙鏈DNA的5%，1%。另外，該酶不能從DNA的切刻或缺口處起始消化。

 

產(chǎn)品信息

 

貨號(hào)	14527ES80 / 14527ES90
規(guī)格	1,000 U / 5,000 U
酶活定義	1單位活性(U)定義為：在37℃下，1×Lambda exonuclease反應(yīng)緩沖體系下，30 min內(nèi)從5' 磷酸化的雙鏈DNA中水解產(chǎn)生10 nmol 酸可溶性脫氧核糖核苷酸所需的酶量。
酶儲(chǔ)存液	25 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 50% Glycerol, pH 8 @ 25°C
濃度	5 U/µL
失活條件	75℃, 10 min

 

組分信息

 

組分編號(hào)	組分名稱(chēng)	14527ES80	14527ES90
14527-A	Lambda exonuclease (5 U/μL) Lambda核酸外切酶	200 μL	1,000 μL
14527-B	10×Lambda exonuclease Buffer	1 mL	5 mL

 

產(chǎn)品應(yīng)用

 

1. 從5' 端高效降解平末端或帶缺口的雙鏈DNA，生成單鏈DNA

2. 優(yōu)選底物為5' -磷酸化的雙鏈DNA

 

儲(chǔ)存條件

 

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

使用說(shuō)明

 

1. 酶切反應(yīng)

按照下表配置反應(yīng)體系：

組分	體積
一條鏈或2條鏈為5' 磷酸化修飾的雙鏈DNA*	1-5 μg
10×Lambda exonuclease Buffer	5 μL
Lambda exonuclease (5 U/μL) Lambda核酸外切酶	1 μL
H2O	Up to 50 μL

*若只有1條鏈為5’磷酸化修飾的線性雙鏈DNA，則水解產(chǎn)物主要為單鏈DNA，可以用來(lái)制備單鏈DNA。若2條鏈都是5’磷酸化修飾的線性雙鏈DNA，則水解產(chǎn)物主要為單核苷酸，即DNA完全水解。

2. 37°C反應(yīng)30 min。

3. 75°C加熱10 min，使酶失活。

4. 電泳檢測(cè)DNA消化程度。

 

注意事項(xiàng)

 

1. 若底物為只有1條鏈為5' 磷酸化修飾的線性雙鏈DNA，則水解產(chǎn)物主要為單鏈DNA，可以用來(lái)制備單鏈DNA；若底物為兩條鏈都是5' 磷酸化修飾的線性雙鏈DNA，則水解產(chǎn)物主要為單核苷酸，即DNA完全水解。

2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

3. 本產(chǎn)品僅用作科研用途！

 

 

Ver.CN20250106