產(chǎn)品簡介

磁珠法48孔樣本前處理試劑盒FN（預(yù)封裝）適用于生物制品樣本的前處理，樣本類型包含抗體藥物和基因細(xì)胞治療的病毒液等。本試劑盒采用獨(dú)特磁珠和精心優(yōu)化的緩沖體系，可最大限度從復(fù)雜樣本基質(zhì)中分離純化生物制品中的微量DNA（如宿主細(xì)胞殘留DNA、支原體DNA等），且主要搭配翌圣生物48通道自動化核酸提取儀(Cat#80511ES01)使用，實(shí)現(xiàn)核酸的高通量提取。

該前處理試劑盒可與本公司的多種宿主細(xì)胞殘留DNA檢測試劑盒配合使用，包括CHO殘留DNA檢測試劑盒（Cat#41305ES）、HEK293殘留DNA檢測試劑盒（Cat#41306ES）、Vero殘留DNA檢測試劑盒（Cat#41307ES）和E.coli殘留DNA檢測試劑盒(Cat#41308ES)等。此外，該前處理試劑盒還可配套支原體qPCR檢測試劑盒（探針法）(Cat#40618ES)使用。

 

產(chǎn)品信息

貨號	18467ES48 / 18467ES59
規(guī)格	3×16 T / 6×16 T

 

組分信息

類別*	組分編號	組分名稱	18467ES48	18467ES59
Part I	18467-A	蛋白酶K (20 mg/mL)	1 mL/支×1	1 mL/支×2
Part II	18467-B	96孔預(yù)裝板	1塊×3	1塊×6
	18467-C	8聯(lián)磁棒套	2條/包×3	2條/包×6
	18467-D	裂解液	6 mL	12 mL
Part III	18467-E	糖原	450 μL	900 μL
	18467-F	Poly A鉀鹽	300 μL	600 μL

^*本試劑盒適用機(jī)型為翌圣生物48通道自動化核酸提取儀(Cat#80511ES01)及同類型儀器（加熱槽位為1、5、7、11）。

 

運(yùn)輸和儲存條件

1. Part I組分冰袋運(yùn)輸，4℃可保存1年，長期保存于-20℃。

2. Part II組分室溫運(yùn)輸，室溫保存，有效期1年。

3. Part Ⅲ組分干冰運(yùn)輸，-20℃保存1年。

4. 收到貨后，請檢查Part I、Part II和Part Ⅲ共3個組分中的試劑是否齊全，并立即放入對應(yīng)的保存溫度中儲存。

 

注意事項(xiàng)

1. 本產(chǎn)品僅作科研用途。為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

2. 使用前請仔細(xì)閱讀使用說明書，嚴(yán)格按照說明書操作，樣本處理建議在超凈臺或生物安全柜中進(jìn)行。

3. 注意觀察室溫保存溶液是否有析出或渾濁（尤其冬季室溫為低溫環(huán)境時），可37℃水浴至溶液澄清，避免影響使用效果。

4. 自動化核酸提取儀使用前與使用后，需使用75%酒精擦拭提取儀內(nèi)部，并進(jìn)行紫外消毒30 min。

5. 處理樣本及加樣時，勤換槍頭，避免交叉污染。

6. 洗脫時可能存在磁珠殘留，吸取樣本時應(yīng)盡量避免吸入磁珠。

 

使用說明

1. 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

1）自備設(shè)備：漩渦振蕩器、水浴鍋或金屬浴、翌圣48通道自動化核酸提取儀或其他品牌自動化核酸提取儀。

2）自備耗材：10 μL~1000 μL不等的低吸附帶濾芯槍頭、1.5 mL低吸附離心管。

3）自備試劑：1×PBS緩沖液（pH 7.4，無Mg和Ca離子）、超純水^*。

^*推薦您購買本公司的超純水（Cat#10116ES）。

2. 實(shí)驗(yàn)方法

1）預(yù)封裝試劑準(zhǔn)備

a. 從試劑盒中取出預(yù)裝板，顛倒混勻數(shù)次使磁珠重懸，輕甩孔板，使試劑及磁珠都集中到孔板底部。小心撕去預(yù)裝板封膜，避免振動，防止液體濺出。

b. 根據(jù)處理樣本數(shù)量，向預(yù)裝板樣品處理孔（第1、7列）加入9 μL糖原和6 μL Poly A鉀鹽。

2）樣本處理

a. 待測樣本為疫苗等本身含有較高DNA含量的樣本，可用1×PBS（pH7.4，無Mg和Ca離子）對樣本進(jìn)行適當(dāng)比例稀釋后提取（對樣本進(jìn)行稀釋是為了保證檢測的準(zhǔn)確性，使樣本的檢測值在標(biāo)曲線性范圍內(nèi)，通?？煽紤]進(jìn)行100倍稀釋）。

b. 待測樣本為干粉時，可用超純水將樣本稀釋成10 mg/mL或100 mg/mL后使用。

c. 待測樣本為復(fù)雜背景基質(zhì)時，可根據(jù)需要進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，以確定合適的樣本稀釋倍數(shù)。

d. 取100 μL樣本置于1.5 mL離心管中，再加入100 μL裂解液和10 μL蛋白酶K^*，渦旋混勻10 sec。

^*樣本蛋白濃度為0~100 mg/mL時，蛋白酶K用量為10 μL；樣本蛋白濃度為100~200 mg/mL時，蛋白酶K用量為20 μL。

e. 60℃孵育20 min，即為預(yù)處理樣本，待用。

3）自動化提取

a. 將預(yù)處理樣本加入樣品處理孔（第1、7列）。

b. 按照提取儀的位置，正確安放上述96孔預(yù)裝板，并放置8聯(lián)磁棒套。

c. 運(yùn)行如下程序，程序結(jié)束后，將洗脫板轉(zhuǎn)移至新的離心管中，溶液可置于-20℃短期保存，-80℃長期保存。

步驟		第1步（移磁珠）	第2步（結(jié)合）	第3步（清洗1）	第4步（清洗2）	第5步（洗脫）	第6步（棄磁珠）
工位		3	1	2	3	5	3
等待時間		0 min	0 min	0 min	0 min	4 min	0 min
混合模式	混合速度	200000	200000	300000	300000	200000	100000
	混合時間*	10 s	10 s	10 s	10 s	10 s	10 s
混合時間**		20 s	15 min	1 min	1 min	8 min	10 s
是否暫停		否	否	否	否	否	否
吸磁時間		60 s	90 s	60 s	60 s	90 s	0 s
體積		500μL	600μL	500μL	500μL	100μL	500μL
溫度		/	/	/	/	65℃	/

表1 翌圣48通道自動化提取儀提取程序

^*此處的混合時間是混合模式設(shè)置中的混合時間。

^**此處的混合時間是程序編輯頁面中的混合時間。

 

Ver.CN20240220