產(chǎn)品簡(jiǎn)介

 

Gravity Desalting Column,8.3 mL（重力脫鹽柱，8.3 mL）適用于分子量大于5 kDa的蛋白或其他大分子樣品的脫鹽、緩沖液置換或小分子的去除。

Gravity Desalting Column,8.3 mL（重力脫鹽柱，8.3 mL）裝有8.3 mL Dextran G-25 M。Dextran G-25 M系列介質(zhì)是一類以葡聚糖為基質(zhì)的凝膠過(guò)濾層析介質(zhì)，其工作原理主要是利用具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的葡聚糖凝膠的分子篩作用，根據(jù)被分離物質(zhì)的分子大小不同來(lái)進(jìn)行分離。
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產(chǎn)品信息

 

貨號(hào)	20741ES03/20741ES08
規(guī)格	1個(gè)/盒 / 5x1個(gè)/盒

 

產(chǎn)品性質(zhì)

 

基質(zhì)	Dextran G-25 M
粒徑	85-260 µm
柱體積	8.3 mL
最大上樣量	2.5 mL
脫鹽效率	>90%
排阻極限	5 kDa
保存溶液	20%乙醇

 

儲(chǔ)存條件

 

2~8℃保存，有效期2年。

 

使用說(shuō)明

 

1. 需準(zhǔn)備試劑

平衡液可選用樣品期望置換的緩沖液，所用水和平衡液在使用前用0.22 μm或0.45 μm濾膜過(guò)濾。

2. 樣品準(zhǔn)備

樣品在上樣前建議離心或用0.22 μm或0.45 μm濾膜過(guò)濾，減少雜質(zhì)影響。

3. 樣品脫鹽

1）準(zhǔn)備：將Gravity Desalting Column,8.3 mL（重力脫鹽柱，8.3 mL）垂直置于重力柱支架上，或用鐵架臺(tái)固定，先后打開(kāi)上蓋、下蓋，依靠重力流干保護(hù)液。

2）平衡：加入4 mL平衡液對(duì)預(yù)裝介質(zhì)進(jìn)行平衡，重復(fù)5次，最終使用平衡液體積約3倍介質(zhì)體積。

3）上樣：加入樣品，樣品上樣體積范圍1.0-2.5 mL, 最大不超過(guò)2.5 mL, 上樣體積不足時(shí)用平衡液稀釋樣品至1.0 mL。

4) 洗脫：待樣品加入填料后，繼續(xù)加入平衡液進(jìn)行洗脫，分離收集洗脫液，從加入樣品開(kāi)始，先收集前端2.0 mL, 然后再按照固定體積（建議0.5-1 mL/管）收集樣品，檢測(cè)每管蛋白濃度和鹽濃度，計(jì)算回收率和脫鹽效率。平衡液至少添加至蛋白洗脫完全再停止。

5）再平衡：加入4 mL平衡液對(duì)介質(zhì)進(jìn)行再平衡，重復(fù)至少5次，將殘留的鹽沖洗干凈，方可進(jìn)行下一次脫鹽。同一個(gè)柱子不建議用于不同樣品的脫鹽。

4. 清洗與再生

如果柱子的流速或者脫鹽效果變差，為除去殘留的雜質(zhì)，如變性蛋白或脂質(zhì)等，有時(shí)需要對(duì)脫鹽柱進(jìn)行在位清洗。常用的清洗液為 0.1-0.2 M NaOH或非離子型去垢劑。

1）使用一倍柱體積 0.1-0.2 M NaOH，依靠重力清洗介質(zhì)。

2）用足夠量的去離子水，沖洗介質(zhì)，直至 pH 值至中性。

3）用至少三倍柱體積20%乙醇溶液沖洗介質(zhì)，然后分別蓋上下堵頭和上塞，在介質(zhì)上端保留至少1cm高的 20%乙醇保護(hù)液，置于2-8℃保存。

【注】不建議介質(zhì)多次重復(fù)再生和使用。

 

注意事項(xiàng)

 

1. 請(qǐng)勿冷凍保存本產(chǎn)品

2. 本產(chǎn)品僅作科研用途。

3. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20231222