dsDNA BR Assay Kit 是一種簡(jiǎn)便、靈敏、準(zhǔn)確、寬范圍的雙鏈 DNA（dsDNA BR)熒光定量檢測(cè)試劑盒，在2~1000 ng 區(qū)間具有良好的線性關(guān)系。本試劑盒包含熒光檢測(cè)試劑、緩沖液及相關(guān)的 dsDNA BR 標(biāo)準(zhǔn)品，使用前先將熒光檢測(cè)試劑用緩沖液稀釋成工作液，然后加入待測(cè) dsDNA 樣品，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線后，使用熒光酶標(biāo)儀或 Qubit®熒光儀進(jìn)行讀數(shù)。該產(chǎn)品對(duì)常規(guī)的污染物如蛋白質(zhì)、鹽類等具有較好的耐受性。

 

組分信息

產(chǎn)品編號(hào)	組分名稱	濃度	100 T	500 T
12643-A	dsDNA BR Reagent	200×concentrate in DMSO	250 μL	1.25 mL
12643-B	dsDNA BR Buffer	Not applicable	50 mL	250 mL
12643-C	dsDNA BR Standard 1	0 ng/μL in TE buffer	1 mL	5×1 mL
12643-D	dsDNA BR Standard 2	100 ng/μL in TE buffer	1 mL	5×1 mL

 

儲(chǔ)存條件

2-8℃避光保存 6 個(gè)月，冰袋運(yùn)輸，請(qǐng)注意避免反復(fù)凍融。

 

注意事項(xiàng)

1）熒光染料均存在淬滅問(wèn)題，請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅；

2）檢測(cè)試劑 dsDNA BR Buffer 略起泡，使用時(shí)上下顛倒混勻，避免劇烈震蕩；

3）dsDNA BR 標(biāo)準(zhǔn)品，每次使用輕柔震蕩或顛倒混勻，瞬時(shí)離心數(shù)秒收集管蓋及管壁上的液體；

4）為保證定量結(jié)果的精確，請(qǐng)使用校準(zhǔn)后的移液器操作，樣品濃度較低時(shí)請(qǐng)?jiān)龃蟠郎y(cè)樣品投入體積；

5）檢測(cè)工作液請(qǐng)現(xiàn)用現(xiàn)配，當(dāng)天使用完畢，使用前請(qǐng)用標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)。

6）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作；

7）本產(chǎn)品僅用作科研用途！

 

實(shí)驗(yàn)步驟

使用 Qubit熒光儀進(jìn)行 dsDNA BR 定量檢測(cè)分析

1.實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

1）在使用前，將試劑盒中的各組分恢復(fù)至室溫（室溫放置約半小時(shí)）。檢查 dsDNA BR Reagent（組分 A）是否有沉淀，若有沉淀物，可將該試劑至于 37℃水浴鍋中溫育，并輕柔混勻直至沉淀物完全溶解。

準(zhǔn)備足夠量 0.5 mL PCR 薄壁管并標(biāo)注。請(qǐng)勿在 PCR 管側(cè)壁標(biāo)注，以免影響熒光信號(hào)采集。

2.配制檢測(cè)工作液

在避光塑料容器中，使用 dsDNA BR Buffer 按比例將適量 dsDNA BR Reagent 稀釋至 1×（例：取 1 μL dsDNA BR Reagent， 加入 199 μL dsDNA BR Buffer），上下顛倒混勻。工作液現(xiàn)用現(xiàn)配，每次配制檢測(cè)工作液時(shí)要使用潔凈的容器。

3.配制待檢樣品

1）配制待檢標(biāo)準(zhǔn)品 1 和標(biāo)準(zhǔn)品 2。取 190 μL 檢測(cè)工作液至標(biāo)準(zhǔn)品 PCR 管中，分別加入 10 μL dsDNA BR Standard 1 和 dsDNA BR Standard 2 至相應(yīng)標(biāo)記的標(biāo)準(zhǔn)品 PCR 管中，輕柔渦旋振蕩 2-3 sec，盡量避免氣泡產(chǎn)生，瞬時(shí)離心數(shù)秒。

2）配制待檢樣品。取 180-199 μL 檢測(cè)工作液至樣本 PCR 管中，分別加入 1-20 μL 待檢樣本，使 PCR 管中每個(gè)樣本終體積為 200 μL，輕輕渦旋振蕩 2-3 sec，盡量避免氣泡產(chǎn)生。

4.檢測(cè)

1）將所有待檢 PCR 管置于室溫避光孵育 2 min。

2）按照 Qubit熒光儀的操作說(shuō)明，選擇 dsDNA BR 檢測(cè)程序，使用待檢標(biāo)準(zhǔn)品校正熒光曲線后進(jìn)行待檢樣品的濃度測(cè)定。

Ver.CN20230524