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        1. Human CXCL10/IP-10 ELISA Kit 人干擾素誘導(dǎo)蛋白10 ELISA檢測試劑盒

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          產(chǎn)品說明書

          FAQ

          COA

          已發(fā)表文獻

           

          IP-10最初被鑒定為單核細胞、成纖維細胞和內(nèi)皮細胞中的IFN-γ誘導(dǎo)基因。人IP-10的小鼠同系物,CRG-2,與人IP-10有大約67%的氨基酸序列同一性。IP-10的氨基酸序列確定該蛋白是CXC趨化因子亞家族的成員。

          翌圣Human CXCL10 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒,用于定量測定血清、血漿和細胞培養(yǎng)上清中的人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(Human CXCL10)。特異性抗干擾素誘導(dǎo)蛋白10抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本,經(jīng)過孵育,樣本中存在的干擾素誘導(dǎo)蛋白10與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入檢測抗體(生物素標(biāo)記)孵育結(jié)合,經(jīng)洗滌,再加入酶結(jié)合物(HRP標(biāo)記鏈霉親和素)孵育結(jié)合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中干擾素誘導(dǎo)蛋白10的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm 主波長,630nm次波長測定吸光度值。

           

          產(chǎn)品信息

          貨號

          97013ES48 / 97013ES96 

          規(guī)格

          48 T / 96 T

          檢測范圍

          15.6-1000 pg/mL

          檢測方法

          雙抗夾心法

          檢測物種

          檢測時長

          4小時45分鐘

          靈敏度

          4.460 pg/mL

          稀釋線性

          72.2 - 119.4%

          回收率

          73.3 - 129.6%

          板內(nèi)差

          9.2%

          板間差

          6.5%

           

          實驗數(shù)據(jù)

          1. 標(biāo)曲數(shù)據(jù)

          數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,生成的標(biāo)曲用于實驗數(shù)據(jù)分析。

           

          1. 靈敏度檢測

          人干擾素誘導(dǎo)蛋白10的最低檢測限為4.460 pg/mL,通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計算得出。

          1. 精密度檢測

          酶標(biāo)板內(nèi)精密度

          3個已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測定20次,評估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。

          酶標(biāo)板間精密度

          3個已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測36次,評估酶標(biāo)板間的精密度。

          項目

          板內(nèi)精密度

          板間精密度

          樣本

          1

          2

          3

          1

          2

          3

          20

          20

          20

          36

          36

          36

          平均值

          553.0

          137.2

          37.4

          630.1

          142.2

          37.6

          標(biāo)準(zhǔn)差

          46.9

          12.4

          3.8

          55.3

          7.3

          1.8

          變異系數(shù)%

          8.5

          9.0

          10.0

          9.7

          5.2

          4.7

          1. 回收率檢測

            通過不同水平的人干擾素誘導(dǎo)蛋白10添加于樣本中來測定回收率,其回收率如下:

          樣本類型

          平均回收率(%)

          范圍(%)

          血清

          107.7

          94.5-125.3

          血漿

          105.1

          75.6-129.6

          細胞培養(yǎng)上清

          97.6

          73.3-121.3

          1. 稀釋線性檢測

          血清稀釋比例

          平均期望值(%)

          范圍(%)

          1:02

          108.4

          94.0-111.9

          1:04

          98.6

          88.3-112.6

          1:08

          104.7

          93.4-119.4

          1:16

          97.6

          88.4-112.0

           

          血漿稀釋比例

          平均期望值(%)

          范圍(%)

          1:02

          101.5

          90.2-113.6

          1:04

          100.3

          90.6-115.4

          1:08

          97.5

          84.4-111.9

          1:16

          91.1

          81.0-107.7

           

          細胞培養(yǎng)上清稀釋比例

          平均期望值(%)

          范圍(%)

          1:02

          93.9

          87.4-97.4

          1:04

          84.1

          73.9-95.7

          1:08

          86.2

          74.5-107.0

          1:16

          82.3

          72.2-100.1

          1. 樣本值

          應(yīng)用本試劑盒,檢測若干健康志愿者的樣本,志愿者的用藥史不詳。

          樣本類型

          樣本數(shù)目

          平均值(pg/mL)

          樣本值(pg/mL)

          血清

          10

          128

          40-490

          EDTA血漿

          4

          117

          35-340

          肝素血漿

          3

          138

          48-272

          枸櫞酸鈉血漿

          4

          172

          n.d.-424

          細胞培養(yǎng)上清

          10

          n.d.

          n.d.

          n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得15.6 pg/mL

          1. 測定特異性

          本試劑盒識別天然和重組人干擾素誘導(dǎo)蛋白10。下述因子進行了特異性的評估,沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。

          Recombinant human:

          Recombinant mouse:

          GROα

          IP-10/CRG-2

          NRG1-β1/HRG1-β1

           

          Lymphotactin

           

          MIG

           

          TNF-α

           

          TYK-2

           

           

          檢測簡圖

           

           

          疑問解答

          問題

          造成原因

          解決方法

          標(biāo)曲不好

          移液量不準(zhǔn)確

          檢查移液器,按時校準(zhǔn),仔細操作,充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。

          稀釋方法不恰當(dāng)

          顯色值偏低

          孵育時間太短

          給予足夠的孵育時間,樣本和溶解的標(biāo)準(zhǔn)品隔夜后更換。

          移液量不足或稀釋不當(dāng)

          校準(zhǔn)移液器和規(guī)范操作

          CV偏高

          酶標(biāo)板清洗不當(dāng)

          使用正確的洗滌工序;如果使用洗板機,檢查所有的端口是否堵塞。

          受污染的洗液

          準(zhǔn)備新鮮洗液

          靈敏度較低

          試劑盒儲存不當(dāng)

          按照產(chǎn)品組分表進行保存。

           

          400-6111-883