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        1. Human IL-8 ELISA Kit 人白介素8 ELISA定量檢測試劑盒

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          產(chǎn)品說明書

          FAQ

          COA

          已發(fā)表文獻

           

          人白介素8(Human IL-8),又稱為趨化因子CXCL8,是巨噬細胞和上皮細胞等分泌的細胞因子。白介素-8結(jié)合趨化因子受體白介素-8受體α(IL8RA,又叫CXCR1)和白介素-8受體β(IL8RB,又叫CXCR2)而對中性粒細胞有細胞趨化作用而實現(xiàn)其對炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)。 白介素-8還有很強的促血管生成作用。白介素-8在小支氣管炎和囊性纖維化的發(fā)病中起重要作用。

          它是一種屬于趨化因子家族的細胞因子,近年來人們在研究中發(fā)現(xiàn)IL-8幾乎參與哺乳動物的整個生殖過程如排卵、黃體形成、子宮內(nèi)膜增殖、蛻膜化、胚胎著床及其生長發(fā)育等過程,許多臨床研究表明,IL-8還與某些生殖病理過程有關(guān),如子宮內(nèi)膜異位癥,不明原因的自然流產(chǎn)等。IL-8通過何種機制參與和調(diào)節(jié)人類生殖生理和病理過程備受國內(nèi)外研究者們的關(guān)注,較為肯定的一種觀點就是IL-8通過與其特異性的受體結(jié)合,引發(fā)一系列生物學事件,從而發(fā)揮作用。

          翌圣Human IL-8 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒,用于定量測定血清、細胞培養(yǎng)上清中的人白介素8(Human IL-8)。特異性抗人白介素8抗體預(yù)包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本,經(jīng)過孵育,樣本中存在的人白介素8與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入檢測抗體孵育結(jié)合,經(jīng)洗滌,再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中人白介素8的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。

           

          產(chǎn)品信息

          貨號

          97035ES48 / 97035ES96 

          規(guī)格

          48 T / 96 T

          檢測范圍

          7.81-500 pg/mL

          檢測方法

          雙抗夾心法

          檢測物種

          檢測時長

          5小時

          靈敏度

          0.382 pg/mL

          稀釋線性

          83.1 - 109.8 %

          回收率

          73.7 - 112.4%

          板內(nèi)差

          8.4%

          板間差

          7.0%

           

          實驗數(shù)據(jù)

          1. 標曲數(shù)據(jù)

          數(shù)據(jù)擬合繪制標準曲線,生成的標曲用于實驗數(shù)據(jù)分析。

           

          標準曲線

          濃度(pg/mL)

          顯色值

          平均值

          校準值

          500

          2.799

          2.618

          2.708

          2.690

          250

          1.917

          1.983

          1.950

          1.931

          125

          1.370

          1.233

          1.302

          1.283

          62.5

          0.811

          0.757

          0.784

          0.766

          31.25

          0.442

          0.436

          0.439

          0.421

          15.625

          0.252

          0.234

          0.243

          0.225

          7.81

          0.134

          0.131

          0.133

          0.114

          0

          0.021

          0.016

          0.019

          /

           

          1. 靈敏度檢測

          白介素8的最低檢測限為0.382 pg/mL,通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。

          1. 精密度檢測

          酶標板內(nèi)精密度

          3個已知濃度的樣本酶標板內(nèi)重復(fù)測定20次,評估酶標板內(nèi)的精密度。

          酶標板間精密度

          3個已知濃度的樣本酶標板間重復(fù)檢測30次,評估酶標板間的精密度。

          項目

          板內(nèi)精密度

          板間精密度

          樣本

          1

          2

          3

          1

          2

          3

          20

          20

          20

          30

          30

          30

          平均值

          14.0

          73.6

          251.6

          13.5

          71.0

          249.4

          標準差

          1.25

          5.49

          22.26

          0.87

          5.01

          18.69

          變異系數(shù)%

          8.9

          7.5

          8.8

          6.5

          7.1

          7.5

          1. 回收率檢測

            通過不同水平的人白介素8添加于樣本中來測定回收率,其回收率如下:

          樣本類型

          平均回收率(%)

          范圍(%)

          血清

          90.0

          73.7-111.6

          細胞培養(yǎng)上清

          90.9 

          81.6-112.4

          1. 稀釋線性檢測

          血清稀釋比例

          平均期望值(%)

          范圍(%)

          1:02

          90.1

          83.5-99.7

          1:04

          88.3

          87.0-89.0

          1:08

          91.6

          83.7-98.2

          1:16

          89.2

          83.1-95.2

           

          細胞培養(yǎng)上清稀釋比例

          平均期望值(%)

          范圍(%)

          1:02

          99.5

          90.6-106.6

          1:04

          99.1

          90.7-109.8

          1:08

          98.1

          92.2-106.1

          1:16

          99.9

          95.1-108.5

          1. 樣本值

          應(yīng)用本試劑盒,檢測若干健康志愿者的樣本,志愿者的用藥史不詳。

          樣本類型

          樣本數(shù)目

          平均值(pg/mL)

          樣本值(pg/mL)

          血清樣本

          10

          148.1

          24.0-280.0

          細胞上清

          10

          n.d.

          n.d.

          n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)的7.81 pg/mL。

          1. 測定特異性

          本試劑盒識別天然和重組人白介素8。下述因子進行了特異性的評估,沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。

          Recombinant human:

          Recombinant mouse:

          Recombinant amphibian:

          Natural proteins:

          IL-1α

          IL-6 R

          TGF-α

          IL-1α

          TGF-β5

          bovine FGF acidic

          IL-1β

          IL-7

          TGF-β1

          IL-3

           

          bovine FGF basic

          IL-1ra

          IL-9

          TGF-β3

          IL-4

           

          human PDGF

          IL-2

          IL-10

          TGF-β RII

          IL-5

           

          porcine PDGF

          IL-3

          IL-11

          TNF-α

          IL-6

           

          human TGF-β1

          IL-4 R

          IL-12

          TNF-β

          IL-9

           

          porcine TGF-β1

          IL-5

          IL-13

          TNF RI

          IL-10

           

          porcine TGF-β2

          IL-5 Rβ

          IP-10

          TNF RII

          IL-13

           

           

          IL-6

          SCF

          VEGF

          TNF-α

           

           

           

          檢測簡圖

           

          疑問解答

          問題

          造成原因

          解決方法

          標曲不好

          移液量不準確

          檢查移液器,按時校準,仔細操作,充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。

          稀釋方法不恰當

          顯色值偏低

          孵育時間太短

          給予足夠的孵育時間,樣本和溶解的標準品隔夜后更換。

          移液量不足或稀釋不當

          校準移液器和規(guī)范操作

          CV偏高

          酶標板清洗不當

          使用正確的洗滌工序;如果使用洗板機,檢查所有的端口是否堵塞。

          受污染的洗液

          準備新鮮洗液

          靈敏度較低

          試劑盒儲存不當

          按照產(chǎn)品組分表進行保存。

           

          Ver. CN20231116

          400-6111-883