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        1. Human GDF-15 ELISA Kit 人生長分化因子-15 ELISA檢測試劑盒

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          產(chǎn)品說明書

          FAQ

          COA

          已發(fā)表文獻

           

          人生長分化因子-15(GDF-15)又稱巨噬細胞抑制性細胞因子-1(Mic-1),是轉(zhuǎn)化生長因子β (TGF-β) 超家族的趨異成員。GDF-15的前體蛋白由308個氨基酸殘基組成,經(jīng)過酶切修飾后形成一個含有7個半胱氨酸殘基的C端結構域。在人體中,GDF-15在胎盤中高表達,腎臟、胰腺和前列腺中表達水平較低。白細胞介素-1和轉(zhuǎn)化生長因子-β等細胞因子可迅速誘導其表達。GDF-15具有多種生物學功能。GDF-15在腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移中也起著重要的作用,如結直腸癌、乳腺癌和前列腺癌,GDF-15的表達均有顯著增加。在腫瘤進展期間,GDF-15在細胞凋亡、分化、血管生成和轉(zhuǎn)移均有影響,并在成癌癥期間體重減輕方面有所影響。

          翌圣Human GDF-15 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒,用于定量測定血清、血漿中的人生長分化因子15(Human GDF-15)。特異性抗人生長分化因子15抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本,經(jīng)過孵育,樣本中存在的人生長分化因子15與固相抗體結合。洗滌去除未結合的物質(zhì)后,加入檢測抗體孵育結合,經(jīng)洗滌,再加入酶結合物(Streptavidin-HRP)孵育結合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中人生長分化因子15的濃度成正比。加入終止液終止反應,在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。

           

          產(chǎn)品信息

          貨號

          97021ES48 / 97021ES96 

          規(guī)格

          48 T / 96 T

          檢測范圍

          7.81-500 pg/mL

          檢測方法

          雙抗夾心法

          檢測物種

          檢測時長

          5小時

          靈敏度

          0.205 pg/mL

          稀釋線性

          85.7 - 105.0 %

          回收率

          80.9 - 98.9%

          板內(nèi)差

          4.3%

          板間差

          4.4%

           

          實驗數(shù)據(jù)

          1. 標曲數(shù)據(jù)

          數(shù)據(jù)擬合繪制標準曲線,生成的標曲用于實驗數(shù)據(jù)分析
          標準曲線

          1. 靈敏度檢測

          人生長分化因子15的最低檢測限為0.205 pg/mL,通過使用重復檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。

          1. 精密度檢測

          酶標板內(nèi)精密度

          3個已知濃度的樣本酶標板內(nèi)重復測定20次,評估酶標板內(nèi)的精密度。

          酶標板間精密度

          3個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測36次,評估酶標板間的精密度。

          項目

          板內(nèi)精密度

          板間精密度

          樣本

          1

          2

          3

          1

          2

          3

          20

          20

          20

          36

          36

          36

          平均值

          15.0

          59.4

          243.0

          14.7

          59.7

          246.2

          標準差

          0.72

          1.86

          12.18

          0.80

          2.01

          10.84

          變異系數(shù)%

          4.8

          3.1

          5.0

          5.4

          3.4

          4.4

          1. 回收率檢測

            通過不同水平的人生長分化因子15添加于樣本中來測定回收率,其回收率如下:

          樣本類型

          平均回收率(%)

          范圍(%)

          血清樣本

          92.1

          80.9-98.9

          血漿樣本

          91.4

          81.5-98.6

          1. 稀釋線性檢測

          血清稀釋比例

          平均期望值(%)

          范圍(%)

          1:02

          101.5

          99.8-103.8

          1:04

          101.4

          99.9-102.4

          1:08

          93.3

          90.3-95.3

          1:16

          88.7

          87.2-90.6

           

          血漿稀釋比例

          平均期望值(%)

          范圍(%)

          1:02

          100.2

          96.5-105.0

          1:04

          97.0

          94.0-100.0

          1:08

          91.1

          86.7-95.5

          1:16

          88.4

          85.7-90.5

          1. 樣本值

          應用本試劑盒,檢測若干健康志愿者的樣本,志愿者的用藥史不詳。

          樣本類型

          樣本數(shù)目

          平均值(pg/mL)

          樣本值(pg/mL)

          血清樣本

          10

          959.5

          260-3114.6

          肝素血漿

          10

          470.7

          145.1-1275.8

          EDTA血漿

          10

          1550.7

          197.8-6836.5

          枸櫞酸鈉血漿

          10

          1948.5

          247.7-9605.4

          1. 測定特異性

          本試劑盒識別天然和重組人生長分化因子15。下述因子進行了特異性的評估,沒有觀察到明顯的交叉反應和干擾影響。

          Recombinant human:

          Recombinant mouse:

          GDF-5

          GDF-5

          GDF-7

          GDF-6

          GDF-9

          GDF-7

          GDF-11

          GDF-8

          TGF-β RII/Fc

           

          TFG-β2

           

           

          檢測簡圖

           

          疑問解答

          問題

          造成原因

          解決方法

          標曲不好

          移液量不準確

          檢查移液器,按時校準,仔細操作,充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。

          稀釋方法不恰當

          顯色值偏低

          孵育時間太短

          給予足夠的孵育時間,樣本和溶解的標準品隔夜后更換。

          移液量不足或稀釋不當

          校準移液器和規(guī)范操作

          CV偏高

          酶標板清洗不當

          使用正確的洗滌工序;如果使用洗板機,檢查所有的端口是否堵塞。

          受污染的洗液

          準備新鮮洗液

          靈敏度較低

          試劑盒儲存不當

          按照產(chǎn)品組分表進行保存。

           

          400-6111-883