Agarose 4FF是在Agarose 4B基礎(chǔ)上經(jīng)過交聯(lián)獲得的空白微球。其化學(xué)穩(wěn)定性及物理性能顯著增強(qiáng)，具有高流速、高載量、非特異性吸附低、回收率高、可多次重復(fù)使用等特點，可在此基礎(chǔ)上衍生功能基團(tuán)，也可用于病毒顆粒、大分子蛋白、超螺旋 DNA 等生物大分子物質(zhì)組分的凝膠過濾。

 

產(chǎn)品性質(zhì)

基質(zhì)	4%高交聯(lián)瓊脂糖凝膠
分離范圍	60 KD-20 MD
粒徑	45-165 µm
最大耐壓	0.3 MPa
最大流速	500 cm/h
PH穩(wěn)定性	2~12 (工作)，1~14 (CIP，短期)
化學(xué)穩(wěn)定性	1 M NaOH、8 M尿素、6 M 鹽酸胍、70%乙醇
工作溫度	4 - 40 ℃
耐熱性	120℃，pH7 水中，30min
儲存緩沖液	20%乙醇

 

運輸和保存方法

1.使用后的填料應(yīng)儲存于20%乙醇中，為了防止乙醇揮發(fā)以及微生物生長，建議3個月更換一次新鮮的20%乙醇。

2.放置在4~8℃冷庫中保存效果更好；有效期5年。

 

注意事項

1.凍結(jié)可能破壞介質(zhì)內(nèi)部結(jié)構(gòu)。

2.裝柱前最好將介質(zhì)懸液平衡到室溫。

3.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

4.本產(chǎn)品僅作科研用途！

 

使用方法

1 生物大分子凝膠過濾

1.1 裝柱

1）將所取凝膠抽干，用初始緩沖液（按凝膠∶緩沖液 = 3∶1 的比例）配成勻漿并脫氣。

2）將層析柱垂直固定，底端用水或緩沖液潤濕并保留1 cm高左右的水柱。

3）用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降，水封層析柱，沉降過夜。

4）連結(jié)好柱子頂端活動柱頭，打開蠕動泵，讓緩沖液用使用時操作流速流過 5 柱體積，再使用 1.5 倍的操作流速流過 5 柱體積，調(diào)節(jié)適配柱頭，使其盡量貼近膠面，最后用 2~3 倍柱體積的緩沖液平衡柱子。

1.2 平衡

將平衡緩沖液以操作流速平衡層析柱，觀察檢測器的變化，直到電導(dǎo)、pH 等參數(shù)不變。

1.3 上樣

切換轉(zhuǎn)換閥進(jìn)行上樣，上樣量根據(jù)樣品的性質(zhì)和層析介質(zhì)的量進(jìn)行選擇，一般而言，樣品上樣量不超過柱床體積的 25%。根據(jù)分離效果可以適當(dāng)調(diào)整上樣體積。

1.4 洗脫

繼續(xù)用平衡緩沖液沖洗層析柱，收集流出的不同組分，至不再有生物分子流出，至基線平衡。

1.5 再生

用 0.2 mol/L NaOH 或非離子洗滌劑洗 2 個柱體積；接著去離子水沖洗3-5個柱體積。若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。
1.6 在位清洗

對于強(qiáng)結(jié)合蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)，可采用以下流程進(jìn)行在位清洗：1 mol/L NaOH洗2個柱體積，4 mol/L 尿素或 3 mol/L 鹽酸胍洗2個柱體積，70%乙醇或30%異丙醇洗2個柱體積，平衡緩沖液洗2個柱體積。在位清洗可有效去除介質(zhì)上的雜質(zhì)，同時介質(zhì)上的熱源也可基本去除。

2 偶聯(lián)功能基團(tuán) 

選擇合適的偶聯(lián)方法，進(jìn)行功能配基的偶聯(lián)，需注意微球的化學(xué)穩(wěn)定范圍以及耐熱和耐壓等參數(shù)。偶聯(lián)完畢，依據(jù)配基的性質(zhì)和微球的性質(zhì)進(jìn)行使用。

 

                                          HB221104