翌圣 PET4迷你垂直電泳槽操作手冊(cè)可運(yùn)行市場(chǎng)多個(gè)品牌的預(yù)制膠和手灌膠，最多可4塊凝膠同時(shí)運(yùn)行；兼容1-D垂直和2-D雙向電泳應(yīng)用。配件齊全，滿足制膠及電泳所有環(huán)節(jié)，也使得手灌膠變得簡(jiǎn)便快捷。

該設(shè)備質(zhì)保期為2年。

該產(chǎn)品標(biāo)配1.5mm梳子

翌圣為您提供Western Blot實(shí)驗(yàn)整體解決方案，相關(guān)產(chǎn)品選購請(qǐng)參考：WB實(shí)驗(yàn)系列產(chǎn)品-選購指南
儀器詳細(xì)操作指南請(qǐng)參考：WB電泳全套設(shè)備操作詳細(xì)教程

儀器詳細(xì)操作指南請(qǐng)參考WB電泳電源設(shè)置操作詳細(xì)教程

結(jié)構(gòu)信息

1. 凝膠版準(zhǔn)備：

1)  正確放置保證灌膠框水平于操作臺(tái)上，并打開灌膠框手柄；按所需凝膠厚度選擇邊條玻璃板，將短玻璃放置其上；帶邊條玻璃板的標(biāo)記端向上，將兩塊玻璃板滑入灌膠框與水平定位結(jié)構(gòu)（紅圈）對(duì)齊，使短玻璃板一面朝向前方（圖1，A）；【注】：確認(rèn)標(biāo)記方向正確；玻璃板方向錯(cuò)誤或者未對(duì)齊會(huì)造成漏膠。

2) 玻璃板到位后關(guān)閉灌膠框手柄，將玻璃板夾緊在灌膠框中，并檢查玻璃板底部是否平齊（圖1，B）；

3) 保持灌膠框手柄關(guān)閉，將灌膠框放置于制膠底座的制膠密封墊上。同時(shí)將凸輪杠桿壓在帶邊條的玻璃板上（圖1，C）；

4) 重復(fù)上述步驟可制作另一塊膠板。

A                                                                         B                                                                              C

 圖1 凝膠板準(zhǔn)備

2. 灌膠：

不連續(xù)聚丙烯酰胺凝膠

1) 預(yù)先可將梳子完全放入組合好的凝膠夾中，在梳齒下端1 cm處作標(biāo)記。用來粗略估計(jì)分離膠添加高度；

2) 混合所有試劑來制作分離膠單體溶液。將溶液注入玻璃板之間至標(biāo)記處。注入溶液時(shí)須平穩(wěn)以防止其與空氣混合；立即以水或者異丙醇覆蓋溶液表面。注意：如果用水覆蓋須小心緩慢平穩(wěn)加入以防與溶液混合；

3) 放置45 min到 1 h使凝膠聚合（或者根據(jù)不同品牌的配膠試劑盒要求，進(jìn)行判斷凝膠情況）?？捎秒p蒸水徹底清洗凝膠表面。不要讓醇類物質(zhì)在膠上超過1小時(shí)以防止上部凝膠脫水；

4) 準(zhǔn)備濃縮膠單體溶液。注入濃縮膠溶液前用濾紙使分離膠表面干燥；將溶液注入玻璃板之間直至與短玻璃板平齊；在邊條之間從上部插入所需的梳子，確認(rèn)梳子兩端突起在邊條之間引導(dǎo)，完全插入直至梳子背脊與短玻璃板對(duì)齊；

5) 放置30-45 min使?jié)饪s膠聚合（或者根據(jù)不同品牌的配膠試劑盒要求，進(jìn)行判斷凝膠情況）；

6) 輕輕取出梳子并以蒸餾水或緩沖液徹底清洗凝膠表面。以蒸餾水，去離子水清洗用過的灌膠架和制膠底座。

連續(xù)聚丙烯酰胺凝膠

1) 混合所有試劑來制作凝膠單體溶液，將溶液注入玻璃板之間直至與短玻璃板平齊；

2) 在邊條之間從上部插入所需的梳子，確認(rèn)梳子兩端突起在邊條之間引導(dǎo)。完全插入直至梳子背脊與短玻璃板對(duì)齊；

3) 放置45 min到 1 h使凝膠聚合（或者根據(jù)不同品牌的配膠試劑盒要求，進(jìn)行判斷凝膠情況）；

4) 輕輕取出梳子并以蒸餾水或緩沖液徹底清洗凝膠表面；

5) 以蒸餾水，去離子水清洗用過的夾膠框和制膠架。

3. 電泳模塊組裝與上樣所需材料：

1) 準(zhǔn)備潔凈干燥的電泳緩沖液槽；電泳芯模塊（1個(gè)電泳芯模塊只能用于1或2塊膠，做3或4塊膠需要2個(gè)模塊）；電泳緩沖液（1-2塊膠700 mL；3-4塊膠1,000 mL）；

【注】：只運(yùn)行2塊膠時(shí)只需使用電極插頭的電泳芯。運(yùn)行4塊膠時(shí)，電極插頭的電泳芯和蘑菇頭電泳芯均要使用，每個(gè)組件2塊膠。

2) 打開灌膠架并放置于干凈平整操作臺(tái)上（圖2，A）；

3) 將第一塊凝膠三明治以短玻璃板朝內(nèi)側(cè)放置于凝膠支撐架上，凝膠支撐架模鑄于組件底部且每側(cè)均有兩個(gè)。放置第一塊膠時(shí)須小心確認(rèn)夾膠框保持平衡狀態(tài)不會(huì)翻倒。在另一側(cè)凝膠支撐架上放置第二塊膠，共有兩塊膠相對(duì)中心傾斜；如果運(yùn)行奇數(shù)膠（1或3塊膠），則須使用緩沖液擋板（圖2，B）；

4) 同時(shí)將2塊膠板向中心捏緊，使膠板緊貼密封條，并且需短玻璃板頂住密封條臺(tái)階；然后雙手同時(shí)向內(nèi)合攏兩側(cè)的邊卡，使其鎖定到位；邊卡會(huì)推動(dòng)膠板使短玻璃板緊貼U型密封條的凹槽，以防止漏液（請(qǐng)確認(rèn)短玻璃板沒有壓住密封條臺(tái)階）（圖2，C）；

5) 此時(shí)可以用緩沖液清洗樣品孔和上樣（圖2，D），請(qǐng)不要嘗試在膠板壓住密封條臺(tái)階時(shí)合攏夾膠框夾。

【注】：只運(yùn)行1-2塊膠時(shí)請(qǐng)不要把蘑菇頭電泳芯放入電泳儀中，那樣做會(huì)產(chǎn)生額外的熱，影響電泳分離效果。

  A                                                       B                                                          C                                                         D       

圖 2 安裝迷你垂直電泳槽的電泳模塊

4. 蛋白上樣：

1) 向電泳槽中注入電泳緩沖液，外槽至外玻璃板上沿之下，內(nèi)槽加滿；

2) 樣本可在電泳芯被放入電泳儀之前或之后進(jìn)行；

3) 使用注射器或加樣槍將樣品加入樣品孔中（加樣孔體積可參考附件1）。

【注】：加樣時(shí)應(yīng)緩慢使樣品均勻沉降于樣品孔底部。注意不要用針頭或加樣器頭刺破膠孔底部；正極和負(fù)極均需注入緩沖液，建議正負(fù)極緩沖液的液面等高。

5. 在緩沖液槽中放置電泳模塊：

【注】：所需緩沖液體積：2塊膠700 mL；4塊膠1,000 mL；緩沖液槽具有兩個(gè)位置可放置兩個(gè)模塊：帶插頭電泳芯在后，蘑菇頭電泳芯在前。

1) 首先把緩沖液槽放置于平整桌面上，使正面（具有2-Gels和4-Gels標(biāo)記的那一面）朝前。如果方向正確，槽邊緣的紅色標(biāo)記應(yīng)該在右邊，黑色標(biāo)記在左邊；

2) 如果只運(yùn)行2塊膠則只需用帶插頭電泳芯，將其放在后部位置上使得紅色（+）極與槽右側(cè)的紅色標(biāo)記相對(duì)應(yīng)；

3) 如需做4塊膠，除放入帶插頭電泳芯外，還要將蘑菇頭電泳芯放入前部位置。確認(rèn)兩者的紅色（+）極與槽右側(cè)的紅色標(biāo)記相對(duì)應(yīng)。注意，位置和方向的錯(cuò)誤會(huì)使上蓋無法蓋合；

4) 在緩沖液槽中加入緩沖液至標(biāo)記位置。

6. 緩沖液槽裝配：

將上蓋蓋在緩沖液槽上。確認(rèn)顏色標(biāo)記的插頭與插座相對(duì)應(yīng)，插頭、插座的匹配可以使定位準(zhǔn)確，上蓋上的障礙物可以防止定位錯(cuò)誤。注意，緩沖液槽兩側(cè)的尖突出部分應(yīng)該從上蓋的狹縫中穿出，以保證上蓋的正確閉合。此時(shí)用拇指持續(xù)用力按壓上蓋，直到壓緊在緩沖液槽上。

7. 電源條件：

1) 將電源插頭認(rèn)準(zhǔn)正負(fù)極插入電泳儀電源插孔內(nèi)；

2) 給迷你垂直電泳槽通電開始電泳。恒壓200 V是SDS-PAGE和多數(shù)native PAGE電泳的推薦條件，可以被用于2塊膠和4塊膠上，不同應(yīng)用其優(yōu)化的電壓條件會(huì)不同。在200 V電壓條件下運(yùn)行SDS-PAGE 大約需要35 min。