產(chǎn)品簡介

 

9°N DNA Ligase為高溫連接酶，它能催化與同一互補靶DNA鏈雜交的兩條相鄰寡核苷酸鏈的5´-磷酸和3´-羥基之間形成磷酸二酯鍵。該催化反應只有當兩條寡核苷酸鏈與互補靶DNA完全配對，且兩條寡核苷酸鏈之間沒有間隙的條件下才會發(fā)生。因此可以用于檢測單堿基替換。該酶以ATP作為輔因子，在45-70℃區(qū)間內(nèi)均有活性。

 

產(chǎn)品信息

 

貨號	14959ES84 / 14959ES92
規(guī)格	2,000 U / 10,000 U
酶活定義	1單位活性單位(U)定義為：在45℃條件下，孵育15 min能使50%的1 μg經(jīng)BstEII消化的λDNA片段（12 bp粘性末端）發(fā)生連接所需要的酶量
酶儲存液	10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA ，200 µg/ml BSA，50% Glycerol，10 mM (NH4)2SO4，pH 7.4 @ 25°C
濃度	40 U/µL

 

組分信息

 

組分編號	組分名稱	14959ES84	14959ES92
14959-A	9°N DNA Ligase (40 U/µL)	50 µL	250 µL
14959-B	10× 9°N DNA Ligase Buffer	200 µL	1 mL

 

產(chǎn)品應用

 

1. 通過連接酶檢測反應（LDR）和連接酶鏈式（LCR）反應，檢測等位基因特異性

2. 連接酶鏈式反應（LCR）中連接磷酸化寡核苷酸

3. 高溫下連接 DNA 鏈上的切刻位點

 

儲存條件

 

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

使用說明

 

1. 反應體系配制：

組分	用量
10× 9°N DNA Ligase Buffer	2 µL
底物：互補粘性末端>8 nt的DNA	100 ng-1 µg
9°N DNA Ligase (40 U/µL)	1-2 µL
ddH2O	To 20 µL

2. 反應條件：45-50℃連接15min。

3. 對于較長的雙鏈DNA底物，瓊脂糖電泳檢測產(chǎn)物；對于短于100bp的短片段DNA，聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測產(chǎn)物。

 

注意事項

 

1. 本產(chǎn)品可有效連接12 bp的互補片段，但無法連接4 bp的互補片段（典型限制酶消化產(chǎn)物）。

2. 本產(chǎn)品需要輔助因子ATP參與反應。

3. 酶使用時宜存放在冰盒內(nèi)或冰浴上，使用完畢后宜立即放置于-20℃保存。

4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

5. 本產(chǎn)品僅做科研用途！

 

 

Ver.CN20250106