PerfCell Tryzyme™ Express酶是一種非動物來源的重組胰蛋白酶，能裂解賴氨酸和精氨酸C端肽鍵，可直接替代胰蛋白酶，適用于解離各類貼壁哺乳動物細胞，包括 CHO、HEK 293、A529等細胞。產(chǎn)品純度高，其特異性比天然胰蛋白酶制劑更強，對細胞損害低。產(chǎn)品溶于DPBS/ 1mM EDTA中，室溫穩(wěn)定，使用方便。

 

運輸和保存方法

室溫保存，避光。有效期24個月。

 

注意事項

1）單用稀釋劑即可使 PerfCell Tryzyme™ Express酶失活，無需使用胰蛋白酶抑制劑（如 FBS）。

2）PerfCell Tryzyme™ Express酶在 2°C至8°C和-20°C至-5°C保存時也很穩(wěn)定，可避光長達24個月。

3）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

4）本產(chǎn)品僅作科研用途！

 

操作方法

PerfCell Tryzyme™ Express酶被設(shè)計為現(xiàn)有方案中胰蛋白酶的直接替代品。

1.使用前預(yù)熱PerfCell Tryzyme™ Express酶和完全生長培養(yǎng)基至37°C。盡量減少停留時間。

【注意】：PerfCell Tryzyme™ Express酶可在室溫環(huán)境下用于多種類型的細胞。

2.吸取用過的培養(yǎng)基并丟棄。

3.用5 mL不含鈣和鎂的磷酸緩沖鹽水(DPBS)沖洗單層細胞，吸取和丟棄。

4.向培養(yǎng)瓶中加入適量的PerfCell Tryzyme™ Express酶(如75 cm²培養(yǎng)瓶加入5 mL)。用PerfCell Tryzyme™ Express酶確保單層細胞被完全覆蓋。

5.在37°C孵育直到細胞分離。用倒置顯微鏡觀察細胞單層，以確保細胞完全脫離培養(yǎng)瓶表面。如有必要，輕敲培養(yǎng)瓶以去除細胞。

6.向培養(yǎng)瓶中加入5-10 mL預(yù)熱過的完全培養(yǎng)基。向各個方向傾斜培養(yǎng)瓶以徹底沖洗培養(yǎng)瓶。細胞懸浮液加到15 mL離心管中。

7.100 g離心5-10 min。

8.丟棄上清，用2-5 mL預(yù)熱過的完全培養(yǎng)基重懸細胞。

 

HB230801