Monkeypox Virus Real Time qPCR Kit（UDG plus）是一款用于檢測猴痘病毒的PCR試劑盒。包含猴痘病毒引物探針，采用公司新一代抗體法熱啟動Taq酶的2×Mix預(yù)混液試劑以及陽性對照，已包含Mg²⁺和dNTP等，并添加了有效抑制非特異性PCR擴(kuò)增的因子和提升多重qPCR反應(yīng)擴(kuò)增效率的因子，能夠提高反應(yīng)的擴(kuò)增效率，促進(jìn)低濃度模板的有效擴(kuò)增。本產(chǎn)品含有 UDG 酶，可有效防止氣溶膠污染的風(fēng)險(xiǎn)。

產(chǎn)品組分

組分編號	組分名稱	產(chǎn)品編號/規(guī)格
		13863ES25 (25 T)	13863ES60 (100 T)	13863ES80 (1000T)
13863-A	2×TaqMan qPCR Mix	313 μL	1.25 mL	12.5 mL
13863-B	Prime&Probe Mix	25 μL	100 μL	1 mL
13863-C	MPV Negative Control	125 μL	500 μL	5 mL
13863-D	MPV Positive Control	125 μL	500 μL	5 mL

【注】

a. 2×TaqMan qPCR Mix要包含有耐熱UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase、UDGase、dNTPs、dUTP, Mg2+ , stabilizers和enhancers等。

b. Prime&Probe Mix主要包含目的基因引物探針和內(nèi)源性內(nèi)標(biāo)引物探針。

c. MPV Negative Control為去酶水。

d. MPV Positive Control為含目的基因和內(nèi)源性內(nèi)標(biāo)的質(zhì)粒，目的基因?yàn)?/span>FAM通道，內(nèi)標(biāo)為VIC通道。

運(yùn)輸和保存方法

冰袋運(yùn)輸。-20°C儲存，有效期12個月。

反應(yīng)體系

組分	體積（μL）	終濃度
2×TaqMan qPCR mix	12.5	1×
Primer&Probe mix	1	-
模板	5	-
ddH2O	up to 25	-

適用機(jī)型

Applied Biosystems: 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™, 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex;

Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;

Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;

Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;

Roche Applied Science: LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;

Stratagene: MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™;

Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR.

參考擴(kuò)增程序

循環(huán)步驟	溫度	時間	循環(huán)數(shù)
預(yù)消化	37℃	5 min	1
預(yù)變性	95℃	5 min	1
變性	95℃	15sec	45
退火/延伸	60℃	30 sec

【注】：退火/延伸溫度可根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求適當(dāng)調(diào)整。

結(jié)果判讀

	FAM	VIC	結(jié)果判定
1	Ct＞38或UNDET	Ct≤35	陰性
2	Ct≤35	Ct≤35	陽性
3	35<Ct≤38	Ct≤35	需重新測試，Ct值仍在此區(qū)間且曲線呈標(biāo)準(zhǔn)“S”型，則判斷為陽性，否則判斷為陰性

注意事項(xiàng)

為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴實(shí)驗(yàn)手套進(jìn)行操作。

HB220805