本產(chǎn)品為一種II型限制性內(nèi)切酶，來源于大腸桿菌(E. coli)表達(dá)的球形芽孢桿菌(Bacillus sphaericus)內(nèi)BspQI基因編碼的重組蛋白。其識(shí)別序列為5'-GCTCTTCN₁/N₄-3'，主要用于酶切質(zhì)粒以制備poly (A/T/G/C)結(jié)尾的線性化DNA片段，獲得特定的粘性末端。

 

產(chǎn)品組分

組分編號(hào)	組分名稱	產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格
		15202ES76  (500 U)	15202ES86  (2500 U)	15202ES92  (10000 U)
15202-A	BspQI (10 U/μL)	50 μL	250 μL	1 mL

 

單位定義

在50 μL體系中，50℃條件下1 h內(nèi)消化1 μg λDNA所需的酶量定義為1個(gè)活性單位(U)。

 

識(shí)別位置

5'······GCTCTTC(N)↓··············3'

3'······CGAGAAG(NNNN)↑······5'

 

產(chǎn)品應(yīng)用

1) 酶切質(zhì)粒以制備含有poly(A/T/G/C)末端的線性化DNA片段；

2) 酶切DNA獲得特定的粘性末端。

 

運(yùn)輸與保存方法

干冰運(yùn)輸。-20^oC保存，有效期1年。

 

注意事項(xiàng)

1) 限制性內(nèi)切酶添加體積不超過反應(yīng)體積的1/10；

2) 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作；

3) 本產(chǎn)品僅做科研用途！

 

使用方法

該步驟適用于1 μg DNA (≥100 nt)的線性化，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要按比例放大。

1) 按如下建議的加樣順序配制體系反應(yīng)液：

組分	體積
質(zhì)粒DNA	1-2 μg
10 × Digestion Buffer 3	5 μL
BspQI (10 U/μL)	1 μL
RNase-free ddH2O	Up to 50 μL

【注】：10 × Digestion Buffer 3 (Cat#10667)：500 mM Tris-HCl, 1 M NaCl, 100 mM MgCl₂, 1 mg/mL OsrHSA, pH 7.9@25℃

2) 50℃孵育1 h；

3) DNA線性化完成，可繼續(xù)進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

 

HB220607