產(chǎn)品簡介

DNase I，即Deoxyribonuclease I，中文名稱為脫氧核糖核酸酶I，是一種可以消化單鏈或雙鏈DNA的核酸內(nèi)切酶。它水解磷酸二酯鍵，產(chǎn)生含有5'-磷酸基團和3'-OH基團的單脫氧核苷酸和寡脫氧核苷酸。DNase I最佳的工作pH范圍是7-8，DNase I的活性依賴于Ca²⁺，并可被二價金屬離子如Co²⁺，Mn²⁺，Zn²⁺等激活。在Mg²⁺存在下，DNase I可隨機剪切雙鏈DNA的任意位點；而在Mn²⁺存在的條件下，DNase I可在同一位點剪切DNA雙鏈，形成平末端或有1-2個核苷酸突出的粘末端?？梢杂糜诟鞣NRNA樣品的處理。

 

產(chǎn)品信息

貨號	10325ES80/10325ES90/10325ES91
規(guī)格	1,000 U /5×1000 U / 5,000 U
來源	大腸桿菌重組表達
酶活定義	以小牛胸腺DNA為底物，在25℃、pH 5.0條件下，1 min內(nèi)使反應(yīng)液的260 nm吸光度增加0.001所需要的酶量定義為1個活性單位（Kunitz Unit）。

 

組分信息

組分編號	組分名稱	10325ES80	10325ES90	10325ES91
10325-A	Recombinant DNase I (RNase-free) -2 U/μL	500 μL	5×500 μL	2.5 mL
10325-B	DNase I Reaction Buffer (10×)	1 mL	5×1 mL	5 mL

 

儲存條件

-25~-15℃保存，有效期2年。推薦分裝保存，避免反復(fù)凍融。

 

使用說明

應(yīng)用于RNA樣品中DNA的去除實驗，僅供參考。

1. 反應(yīng)體系

請使用RNase-free離心管及槍頭配制如下反應(yīng)體系：

組分	體積（μL）
DNase I Reaction Buffer (10×)	1
Recombinant DNase I (RNase-free) -2 U/μL	1
RNA	X
RNase-free ddH2O	Up to 10

2. 反應(yīng)條件

37℃，15-30 min后，加入終濃度2.5 mM EDTA溶液混勻后65℃ 10 min。處理后的模板可用于后續(xù)RT-PCR或RT-qPCR等。

 

注意事項

1. DNase I對物理變性敏感，混合時輕輕顛倒試管搖勻，請勿劇烈振蕩。

2. 酶使用時宜存放在冰盒內(nèi)或冰浴上，使用完畢后宜立即放置于-20℃保存。

3. 本產(chǎn)品僅作科研用途。

4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。