產(chǎn)品說明書
FAQ
COA
已發(fā)表文獻
熱敏UDG（尿嘧啶-DNA 糖基化酶）能催化水解含有尿嘧啶的DNA鏈的尿嘧啶堿基和糖磷酸骨架的N-糖苷鍵，釋放游離尿嘧啶。熱敏UDG酶與普通UDG酶相比，避免了常規(guī)UDG酶滅活后可能存在的殘留活性在常溫下對含dU擴增產(chǎn)物的降解作用。本產(chǎn)品在室溫下起作用，且對溫度敏感、易于滅活。
產(chǎn)品組分
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編號 |
組分 |
產(chǎn)品編號/規(guī)格 |
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10707ES60 (100 U) |
10707ES76 (500 U) |
10707ES90 (5 KU) |
10707ES92 (10 KU) |
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10707 |
Uracil DNA Glycosylase (UDG), Heat-Labile (1 U/μL) |
100 μL |
500 μL |
5 mL |
10 mL |
產(chǎn)品應(yīng)用
1. 去除含dU的PCR產(chǎn)物氣溶膠污染。
2. 去除單鏈或雙鏈DNA尿嘧啶堿基。
酶活定義
以25℃，30 min內(nèi)完全降解1 μg含有尿嘧啶的dsDNA所需酶量定義為1個活性單位 (U)。
失活方式
94℃，2-5 min。
運輸儲存方法
冰袋運輸。4℃保存，有效期1年。
注意事項
1. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2. 熱敏UDG在多數(shù)PCR反應(yīng)緩沖液中均有活性。
應(yīng)用實例
1. 按下列組份配制PCR反應(yīng)液：
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試劑 |
體積 |
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10×PCR Buffer (Mg2+ Plus) |
5 μL |
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25 mmol/L MgCl2 |
3 μL |
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dUTP |
0.6 mmol/L |
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dCTP / dGTP/ dATP |
0.2 mmol/L each |
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模板DNA |
Optional |
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引物1 (10 μmol/L) |
2 μL |
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引物2 (10 μmol/L) |
2 μL |
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Taq DNA Polymerase (5 U/μL) |
0.5 μL |
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Heat-Labile UDG (1 U/μL) |
1 μL |
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ddH2O |
To 50 μL |
【注】：根據(jù)實驗需要，dUTP終濃度可在0.2-0.6 mmol/L之間調(diào)整?？蛇x擇性摻入0.2 mmol/L dTTP。
2. PCR反應(yīng)：
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反應(yīng)溫度 |
反應(yīng)時間 |
循環(huán)數(shù) |
目的 |
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25℃ |
10 min |
1 |
降解含U模板 |
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94℃ |
2 min |
1 |
UDG酶失活，模板預(yù)變性 |
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95℃ |
10 sec |
30-35 |
變性 |
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60℃ |
20 sec |
退火 |
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72℃ |
30 sec/kb |
延伸 |
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72℃ |
5 min |
1 |
終延伸 |
【注】：25℃反應(yīng)時間可以根據(jù)實驗需要在5-10 min內(nèi)調(diào)整。
相關(guān)產(chǎn)品
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產(chǎn)品定位 |
產(chǎn)品名稱 |
產(chǎn)品貨號 |
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dUTP |
10128ES |
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鼠源RNase抑制劑 |
10603ES |
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10703ES |
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逆轉(zhuǎn)錄酶 |
Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase, 600 U/μL |
13158ES |
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11300ES |
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熱啟動Taq酶 |
10718ES |
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Hieff UNICON® Hotstart E-Taq DNA Polymerase, 5 U/μL |
10726ES |
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Hieff Unicon® Hotstart J-Taq DNA Polymerase, 6 U/μL, Glycerol-free |
13705ES |
HB220916
