Q：提取的 DNA 存在降解

A：（1）樣本采集與保存降解：

1.應(yīng)盡可能選擇新鮮的樣本；

2.樣本起始投入量不要超過(guò)所用方法的起始量標(biāo)準(zhǔn)；

3.樣品保存時(shí)要盡可能的避免反復(fù)凍融；

（2）樣本前處理不當(dāng)：

1.選擇合適的處理方式并進(jìn)行充分的樣本前處理；

2.前處理結(jié)束后在樣本解凍前添加裂解液；

（3）樣本裂解：

1.需對(duì)樣本進(jìn)行充分裂解；

2.正確添加所需試劑種類及使用量，樣本量增加時(shí)裂解液也需成倍增加；

（4）樣品保存：

對(duì)得到的 DNA 產(chǎn)物進(jìn)行分裝保存，避免反復(fù)凍融且保存時(shí)間不易太久。

Q：提取的 DNA 產(chǎn)量低

A：（1）樣本采集與保存：

1.事先了解提取樣本中 DNA 含量水平；

2.樣本保存時(shí)要盡可能的避免反復(fù)凍融，保存時(shí)間不宜太久；

3.樣本投入量適量，不宜過(guò)多或過(guò)少；

（2）樣本前處理和裂解：

選擇合適的前處理及裂解方式（比如延長(zhǎng)裂解和沉淀DNA 的時(shí)間等），避免堵柱，并盡可能的將樣本中的DNA 完全釋放出來(lái)

（3）提取純化：

1.使用沉淀法提取DNA 時(shí)，可以 1/10 體積的醋酸鈉（pH5.2）有助于 DNA 沉淀；

2.在消化液中加入有乙醇后有沉淀析出時(shí)，用移液槍吸打幾次打散沉淀有利于提高產(chǎn)量困難；

3.洗脫buffer 中無(wú)水乙醇添加量不準(zhǔn)確，按照說(shuō)明書正確添加無(wú)水乙醇；

4.添加洗脫液前過(guò)度干燥吸附柱：開蓋時(shí)間不宜超過(guò) 5min，否則易造成 DNA 洗脫

5.洗脫液?jiǎn)栴}：請(qǐng)使用Elution Buffer 洗脫；若用 ddH2O 或其他洗脫液時(shí)，確認(rèn)其

PH 值在 7.0-8.5 之間；

6.洗脫不充分：使用柱式試劑盒對(duì) DNA 產(chǎn)物洗脫的時(shí)候，預(yù)熱洗脫液并滴加在膜中央位置，盡可能的覆蓋整個(gè)吸附膜，增加洗脫體積或者二次洗脫也可增加產(chǎn)量。

Q：提取的 DNA 純度低，影響下游實(shí)驗(yàn)結(jié)果

A：樣本投入量不要太多；樣本應(yīng)進(jìn)行充分裂解：不同污染；