Ficoll 400是通過蔗糖和表氯醇的共聚作用，形成的一種高度支化的、完全非離子的聚合物。Ficoll 400聚合物中富含羥基，所以具有很強的親水性，且極易溶于水。Ficoll 400常被作為密度梯度介質(zhì)，來分離和隔離真核細胞、細胞器和細菌細胞，以及分離淋巴細胞的穩(wěn)定劑和分離介質(zhì)，密度范圍可高達1.2 g/mL。除此之外，在免疫學(xué)研究中，Ficoll 400還可被用作半抗原載體。在濃縮透析研究中，F(xiàn)icoll 400分子量較高，無法穿過透析膜，可作為一種有效地濃縮敏感材料。在生理和細胞穩(wěn)定中，F(xiàn)icoll 400可以監(jiān)測血管中的蛋白質(zhì)排泄。甚至將Ficoll 400加到電泳液中，充當(dāng)電解質(zhì)穩(wěn)定劑。

Ficoll 400分子量大，與蔗糖相比可透析物質(zhì)含量較低，因此在Ficoll 400中分離細胞，通常不會滲透細胞膜，可以更好地保持細胞功能和形態(tài)。

產(chǎn)品性質(zhì)

產(chǎn)品名稱（English Synonym）	Ficoll 400
分子式（Formula）	C42H40N3O4Cl
分子量（Molecular Weight）	400,000±100,000（由本征粘度決定）
比旋光度（Specific Rotation）	+56.5°（在20°C，C = 水中1％）
本征粘度（Intrinsic viscosity）	0.17 dL/g
外觀（Appearance）	白色至淺黃色粉末
斯托克斯半徑（Stokes Radius）	10 nm
干燥失重（Loss on drying）	≤5％

運輸和保存方法

常溫運輸。粉末直接保存于室溫下，避光保存，有效期至少5年。

注意事項

1）配置時，將Ficoll緩慢并不斷攪拌下加入水中。

2）將1 g的Ficoll 400溶解在10 mL去離子水中，不斷攪拌，得到的是澄清至輕微渾濁的、無色至淡黃色的溶液。

3）Ficoll在堿性和中性溶液中較穩(wěn)定。當(dāng)pH值小于3時，它迅速水解，特別是在高溫下。

4）Ficoll可以在中性pH、110 ℃下高壓滅菌30分鐘。

5）避免Ficoll 400中加入強氧化劑和還原劑。

6）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

7）粉末溶解前請先短暫離心，以保證產(chǎn)品在管底。

8）本產(chǎn)品僅用于科研用途，禁止用于人身上。

使用方法

可通過不連續(xù)和連續(xù)梯度離心Ficoll 400，也可用于單位重力分離。不連續(xù)梯度離心優(yōu)點：a. Ficoll 400密度的突然變化，意味著在不同密度層之間的界面處的急劇變化條帶中存在分離的細胞。這樣，用移液器就能很容易地移除樣品。b.密度差異很大的細胞只需用兩個密度層即可快速分離。這是通過選擇密度來實現(xiàn)的，這些密度將阻止一種或多種細胞類型進入較低的相，將這些細胞類型隔離在界面處。具體密度請參考下表格：

來源	浮力密度	條件
膜	1.05	100,000 g，16 h
色素細胞	1.07	195,000 g 36 h
肝細胞	1.10-1.15	6,000 g，2 h
成纖維細胞	1.05	8,000 g，1 h
Ehrlich腹水癌細胞	1.07	1,400 g，45 min

不連續(xù)梯度制備：

1.用合適的緩沖溶液或0.25 M的等滲蔗糖溶液配置Ficoll 400，配置的濃度應(yīng)能分離目標(biāo)材料，在Ficoll 400中，大多數(shù)細胞和細胞器的浮力密度在1.0至1.2 g/mL之間，通常兩層梯度即可。

注：配置好的溶液可以儲存在冰箱中，但應(yīng)在室溫下使用。

2.將配置好的不同梯度的Ficoll 400放入標(biāo)準(zhǔn)離心管中，制層（約1 cm深），密度最大的層在最下面。

3.小心地將樣品放在最上層，用玻璃棒前輕輕攪拌樣品和最上面的Ficoll 400層消除之間的界面。離心， 在離心過程中，各種顆粒的密度不同將聚集在Ficoll層內(nèi)或之間。

4.離心后移除各相，取出目的細胞，用合適緩沖液沖洗，稀釋，從分離的細胞和細胞器中除去Ficoll。重復(fù)4-5次。

注：a.可以用蒽酮反應(yīng)估算樣品中殘留的Ficoll 400量。

b.在某些情況下，可能需要連續(xù)或線性密度梯度來分離樣品。對于簡單的分離，可以使用不含梯度的均質(zhì)Ficoll 400溶液，通過逐步增加離心速度來完成分離。

c.密度梯度單位重力沉降法被廣泛用于分離對離心敏感的細胞。具有相似密度但不同尺寸的細胞也可以用單位重力法有效分離。

相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品編號	規(guī)格
Percoll	40501ES60	100 mL
Lymphocyte Separation Medium 1.077  淋巴細胞分離液1.077	40503ES60	100 mL
	40503ES76	5×100 mL
Lymphocyte Separation Medium 1.084 淋巴細胞分離液1.084	40504ES60	100 mL
Rat lymphocyte seperation medium 大鼠淋巴細胞分離液	40505ES70	200 mL

 

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