Hieff NGS^® Complete Adapter Kit for MGI^®是針對MGI^®高通量文庫構(gòu)建專用配套試劑盒，共分為3個Set，每個Set中包含8到96種不同的Barcode接頭，適用于MGI^®高通量測序平臺多樣品DNA文庫構(gòu)建。試劑盒中提供的所有試劑都經(jīng)過嚴格的質(zhì)量控制和功能驗證，最大程度保證了文庫構(gòu)建的穩(wěn)定性和可重復性。

Set 1：8 index ，41-48

Set 2：16 index ，57-72

Set 3：96 index

產(chǎn)品組分

編號	組分	2 T	4 T	100 T
13360	8 index	10 μL each	20 μL each	500 μL each
13361	16 index	10 μL each	20 μL each	500 μL each
13362	96 index	10 μL each	20 μL each	500 μL each

運輸和保存方法

冰袋運輸，-20℃保存，有效期18個月。

注意事項

1）切勿加熱接頭，應在室溫讓其緩慢溶解，實驗室溫度最好設(shè)置為20-25℃。接頭避免反復凍融，可短暫存放于4℃。

2）使用Hieff NGS^® Complete Adapter Kit for MGI^®試劑盒構(gòu)建的DNA文庫結(jié)構(gòu)如下：

   5’ - Bottom Adapter - Insert DNA Sequence - Barcode Adapter- 3’

3) 試劑盒中提供的每種DNA Adapter中都包含Bottom Adapter，且提供一種Barcode序列標簽，用于高通量測序時區(qū)分樣品。

4）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

5）MGI接頭最多有96種index，當使用96 index規(guī)格的產(chǎn)品進行建庫測序時，index的選擇需按照MGI推薦的組合進行操作，具體規(guī)格見使用方法。

6）本產(chǎn)品index序列請索要excel格式的文件，或在官網(wǎng)上下載。

7）接頭濃度為10μM。

 

使用方法

DNA Adapter的序列如下：

Barcode Adapter：5’-phos-AGTCGGAGGCCAAGCGGTCTTAGGAAGACAAXXXXXXXXXXCAACTCCTTGGCTCACA-3’

Bottom Adapter：5’-TTGTCTTCCTAAGGAACGACATGGCTACGATCCGACTT-3’

¹XXXXXXXXXX表示接頭的Barcode區(qū)域，其在每個接頭中的序列見下表。測序前在Sample Sheet中只需輸入這個Barcode序列（10 bp）即可。

圖1. 96種MGI index成組規(guī)則

 

Index序列如下：

紅色框中的8種index

Adapter編號	Index序列	Adapter編號	Index序列
01	TAGGTCCGAT	13	CGGCAATCCG
02	GGACGGAATC	14	ATCAGGATTC
03	CTTACTGCCG	15	TCATTCCAGA
04	ACCTAATTGA	16	GATGCTGGAT

 

藍色框中的64種index

Adapter編號	Index序列	Adapter編號	Index序列
41	TTAGATGCAT	57	ATTCAACGGA
42	GTCCAGAGCT	58	AACTGTACTG
43	CACGTGATAG	59	GTACCTCAAT
44	CCACTAGTCC	60	GACTTCTAAT
45	TGGACTTGGC	61	TGAAGCGTTG
46	GCTTGACAGG	62	CGTGCGATCC
47	AAGACCTCTA	63	TCGGAAGGCA
48	AGTTGCCATA	64	CCGATGTCGC

 

Adapter編號	Index序列	Adapter編號	Index序列
65	ACTTAGAATG	73	GACAATGCTC
66	TCCAAGCCTG	74	GCTAATCACA
67	AGACGATGAT	75	AGTCCATAGG
68	CTCACAAGAC	76	CTATCGCCTA
69	CGTTCCTACT	77	ATCGTGGTCT
70	GTGGTTGTGA	78	TGGCTAATAC
71	GAAGGCCTGC	79	CAGTGCAGAG
72	TAGCTTGCCA	80	TCAGGCTGGT

 

Adapter編號	Index序列	Adapter編號	Index序列
81	ATACTCACGC	89	CACCATGTCT
82	ATGCTCCGCG	90	ATATGTCTGG
83	TGTGAACTTG	91	AAGGAAGCGT
84	GAGAGGTGCT	92	TCAAGACGTC
85	TGCACTGTAA	93	CCGCTCAGTA
86	GCCTAGGCAA	94	GGTGTGTACA
87	CCATCATAGC	95	TTCACGTAAG
88	CATGGTAATT	96	GGTTCCACAC

 

Adapter編號	Index序列	Adapter編號	Index序列
97	AGGTATTCTT	121	CCTTGATCAA
98	CGAATGCAAC	122	GGAAGTGGCA
99	TTCAACGGCG	123	AACATTCTAC
100	CTCGGCGGAA	124	GACGCGAGTC
101	ACGGTAATGG	125	CTATAACACT
102	GATCCGACGT	126	AGTCTCGTGT
103	TCACGATACA	127	TCGGCCTATG
104	GATTCTCTTC	128	TTGCAGACGG

 

紫色框中的24種index

Adapter編號	Index序列	Adapter編號	Index序列	Adapter編號	Index序列
25	TAGAGGACAA	33	GCAACGATGG	49	ATGTACGCAG
26	CCTAGCGAAT	34	TAATCGTTCA	50	TTAATGAGAT
117	ATGTCTATCC	35	GTTCGCTCTA	51	TGCGCCACTT
28	GCTGAGCTGT	36	TCTCACACAT	52	CATTAAGGCC
29	AACCTAGATA	37	CTGTTAGGAT	53	CCGCCTCAGA
30	TTGCCATCTC	38	CGCAGACGCG	116	GCTCCATGAC
114	CCAGAGTCAG	39	AAGGATCATC	55	GCCGGTTATC
32	CGCTATCGGC	115	AACAGGCAGT	56	GGAATATTGA

 

說明：

4 個 Adapter 成組：第 1 列（01-04，13-16），共計 2 組（圖 1 紅色框）；

8 個 Adapter 成組：第 2-9 列（41-48、57-64、65-72、73-80、81-88、89-96、97-104 和 121-128），共計 8 組（圖 1  藍色框）；

24 個 Adapter 成組：第 10-12 列，共計 1 組（圖 1  紫色框）。

 

成組規(guī)則：

1）樣本數(shù)1-4：選擇紅色框中index；也可以選擇藍色框中的index，盡量選擇一列上的index，不要跨列選擇。

2）樣本數(shù)5-24：選擇藍色框中的index進行操作，盡量先選擇同一列上的index，然后再選擇第二列

3）樣本數(shù)25-64：按照規(guī)格2進行操作；也可以選擇紫色框中的所有index，然后加上藍色框中的index。但不可以一部分index選擇紫色框，一部分選擇其他組別。

4）樣本數(shù)：65-72：選擇藍色框中的所有index，然后再加上紅色框中的index。

5）樣本數(shù)：73-96：可以選擇紫色框中全部index，再加紅色框或藍色框中的index.

 

【注】請按照以上說明，選擇合適的接頭進行文庫構(gòu)建，否則影響后期下機數(shù)據(jù)的拆分（不按照要求使用，會造成下機數(shù)據(jù)拆分均一性較差）

HB220530