產(chǎn)品簡介

 

Catalase Assay Kit 過氧化氫酶檢測(cè)試劑盒是一種簡單快速、可通過測(cè)試吸光度來檢測(cè)動(dòng)物血清、血漿、組織以及全血、紅細(xì)胞、培養(yǎng)細(xì)胞、培養(yǎng)液中的過氧化氫酶（CAT）的活力。過氧化氫酶（CAT）催化H₂O₂分解為水和氧氣，當(dāng)加入鉬酸銨后，反應(yīng)迅速終止，剩余的H2O2與試劑盒中的鉬酸銨發(fā)生絡(luò)合反應(yīng)，得到淡黃色的產(chǎn)物。這個(gè)黃色產(chǎn)物的最大吸收波長是405 nm 。所以，可以通過檢測(cè)405 nm處的吸光度，來測(cè)定樣品中的過氧化氫酶（CAT）的活力。

羥基自由基（OH^-）是很活潑的活性氧，它能與細(xì)胞內(nèi)的許多有機(jī)物、核酸、有機(jī)酸等等發(fā)生氧化反應(yīng)，破壞性極強(qiáng)。過氧化氫酶（CAT）廣泛分布在血清、血漿、紅細(xì)胞等中，能分解活性氧，保護(hù)細(xì)胞免受破壞，因而測(cè)定過氧化氫酶（CAT）的活力至關(guān)重要。

 

產(chǎn)品信息

 

貨號(hào)	50108ES60
規(guī)格	100 T

 

組分信息

 

組分名稱	50108-A（試劑一）	50108-B（試劑二）	50108-C（試劑三）	50108-D（試劑四）
規(guī)格	100 mL	10 mL	7 g	10 mL

 

儲(chǔ)存條件

 

2～8 ℃避光保存，保質(zhì)期6個(gè)月。

 

使用說明

 

1. 溶解試劑三：向試劑三（顯色粉劑）中加入100 mL的雙蒸水溶解；放入2～8℃冰箱避光保存。（如果底部有不溶的粉末沉淀，直接取上清即可，不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果）
2. 預(yù)熱：實(shí)驗(yàn)之前，先將試劑盒中的試劑一和試劑二放在37 ℃水浴鍋中預(yù)熱10～20 min，以備后用。
3. 加樣品，檢測(cè)吸光度：

1. 血清、血漿樣本吸光度檢測(cè)：

血清、血漿樣本
	實(shí)驗(yàn)組	對(duì)照組
試劑一（37 ℃預(yù)熱）	1.0 mL	1.0 mL
試劑二（37 ℃預(yù)熱）	0.1 mL	0.1 mL
血清/血漿	0.1 mL
混勻后，在37 ℃中準(zhǔn)確加熱1 min（注意：一定要準(zhǔn)確加熱反應(yīng)1 min），然后加試劑三和試劑四；
試劑三	1.0 mL	1.0 mL
試劑四	0.1 mL	0.1 mL
血清/血漿		0.1 mL
混勻，在光徑為0.5 cm，波長為405 nm處，雙蒸水調(diào)零，檢測(cè)吸光度。

2. 全血、紅細(xì)胞樣本吸光度檢測(cè)：

1) 1：99溶血液配制：向50 μL全血或紅細(xì)胞樣本中加雙蒸水至5 mL，混勻，放置10 min，待測(cè)；

2) 檢測(cè)吸光度：

全血、紅細(xì)胞樣本
	實(shí)驗(yàn)組	空白對(duì)照組	自身對(duì)照組
蒸餾水		0.05 mL	2.1 mL
1：99溶血液	0.05 mL		0.05 mL
試劑一（37 ℃預(yù)熱）	1.0 mL	1.0 mL
試劑二（37 ℃預(yù)熱）	0.1 mL	0.1 mL
混勻后，在37 ℃中準(zhǔn)確加熱1 min（注意：一定要準(zhǔn)確加熱反應(yīng)1 min），然后加試劑三；
試劑三	1.0 mL	1.0 mL
混勻，在光徑為0.5 cm，波長為405 nm處，雙蒸水調(diào)零，檢測(cè)吸光度。

3. 組織樣本吸光度檢測(cè)：

1) 組織勻漿液制備：按組織重量（g）：生理鹽水體積（mL）=1:9的比例，在冰水浴條件下，制備成10%的組織勻漿，2500 r/min離心10 min，取上清；再用生理鹽水稀釋到最佳取樣濃度，一般稀釋成：5%、2%、1%、0.5%、0.25%、0.1%等不同的取樣濃度，其中小鼠肝臟勻漿取樣濃度為0.25%～1%。

2) 檢測(cè)吸光度：

組織樣本
	實(shí)驗(yàn)組	對(duì)照組
試劑一（37 ℃預(yù)熱）	1.0 mL	1.0 mL
試劑二（37 ℃預(yù)熱）	0.1 mL	0.1 mL
組織勻漿	0.05 mL
混勻后，在37 ℃中準(zhǔn)確加熱1 min（注意：一定要準(zhǔn)確加熱反應(yīng)1 min），然后加試劑三和試劑四；
試劑三	1.0 mL	1.0 mL
試劑四	0.1 mL	0.1 mL
組織勻漿		0.05 mL
混勻，在光徑為0.5 cm，波長為405 nm處，雙蒸水調(diào)零，檢測(cè)吸光度

4. 過氧化氫酶活力計(jì)算

1. 血清、血漿中過氧化氫酶（CAT）活力計(jì)算（每毫升血清或血漿每秒鐘分解1 μmol H₂O₂的量為一個(gè)活力單位）

血清中過氧化氫酶活力（U/mL）=（對(duì)照組OD值－實(shí)驗(yàn)組OD值）××樣本測(cè)試前稀釋倍數(shù)

 

2. 血紅蛋白中過氧化氫酶（CAT）活力計(jì)算（每毫克血紅蛋白每秒鐘分解1 μmol H₂O₂的量為一個(gè)活力單位）

溶血液中過氧化氫酶活力（U/mgHb）=（空白對(duì)照組OD值＋自身對(duì)照組OD值－實(shí)驗(yàn)組OD值）×

÷血紅蛋白濃度（mgHb/mL）

3. 
   組織勻漿中過氧化氫酶（CAT）活力計(jì)算（每毫克組織蛋白每秒鐘分解1 μmol H₂O₂的量為一個(gè)活力單位）

組織勻漿中過氧化氫酶活力（U/mgprot）=（對(duì)照組OD值—實(shí)驗(yàn)組OD值）×      ÷待測(cè)樣本蛋白濃度（mgprot/mL）

注意事項(xiàng)

1. 加入試劑一和試劑二之前，要進(jìn)行37 ℃預(yù)熱。
2. 試劑三溶解、保存后，使用前有沉淀，直接取上清即可，不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
3. 當(dāng)天冷時(shí)試劑四會(huì)凝固，使用前37 ℃水浴加熱至透明即可。
4. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
5. 本產(chǎn)品僅作科研用途！

 

Ver.CN20231025