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        1. DiI(DiIC18(3)) 細胞膜橙紅色熒光探針

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          產(chǎn)品說明書

          FAQ

          COA

          已發(fā)表文獻

          產(chǎn)品描述

          DiI是一種親脂性的熒光染料,可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結構,進入細胞膜后,DiI在整個細胞膜上擴散,最佳濃度時可以使整個細胞膜染色。DiI在進入細胞膜之前熒光非常弱,當與細胞膜結合后其熒光強度大大增強,DiI被激發(fā)后可以發(fā)出橙紅色的熒光,具有很高的淬滅常數(shù),中等強度的光量子和很短的激發(fā)態(tài)壽命??梢杂脴藴实腡RITC濾光片檢測。

          DiI通常不會明顯影響細胞的生存力,因此被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經(jīng)等細胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑(long-term tracer)。除了最簡單的細胞膜熒光標記外,還可以用于檢測細胞的融合和粘附,檢測發(fā)育或移植過程中細胞遷移,通過FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)檢測脂在細胞膜上的擴散,檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。

           

          產(chǎn)品性質(zhì)

          英文別名(English Synonym)

          DiIC18(3); DiI perchlorate; 1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-tetramethylindocarbocyanine perchlorate

          CAS NO.(CAS 號)

          41085-99-8

          分子式(Molecular Fomular)

          C59H97ClN2O4

          分子量(Molecular Weight)

          933.87

          外觀(Appearance)

          紅色至暗紅色,紫色至深紫色粉末

          Ex/Em

          550/567 nm

          推薦濾光器(Filter)

          XF32-Omega, 31002-Chroma

          純度(Purity)

          ≥98%(TLC)

          溶解性(Solubility)

          溶于DMF,DMSO,乙醇

          結構式(Structure)

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          運輸與保存方法

          冰袋(wet ice)運輸。產(chǎn)品4ºC干燥避光保存,有效期一年。

           

          注意事項

          1)熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。

          2)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

          3)本產(chǎn)品僅作科研用途!

           

          使用方法

          1. 染色液制備

          1)配置DMSO或EtOH 儲存液:儲存液用 DMSO或EtOH配置濃度1~2 mM。

          】:a、未使用的儲存液分裝儲存在-20℃,避免反復凍融,可穩(wěn)定保存6個月。

          b、發(fā)現(xiàn)較難溶解時可以適當加熱,并用超聲處理以促進溶解。

          2)工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養(yǎng)基,HBSS或PBS)稀釋儲存液,配制濃度為1~5 μM的工作液。

          】:工作液最終濃度建議根據(jù)不同細胞系和實驗體系來優(yōu)化。

          2. 懸浮細胞染色

          1)加入適當體積的染色工作液重懸細胞,使其密度為1×106/mL。

          2)37 ℃孵育細胞 2~20 min,不同的細胞最佳培養(yǎng)時間不同??梢?0 min作為起始孵育時間,之后優(yōu)化體系以得到均一的標記結果。

          3)孵育結束,按1000~1500 rpm離心5 min。

          4)傾倒上清液,再次緩慢加入37℃預熱的生長培養(yǎng)液重懸細胞。

          5)重復(3),(4)步驟兩次以上。

          3. 貼壁細胞的染色

          1)將貼壁細胞培養(yǎng)于無菌蓋玻片上。

          2)從培養(yǎng)基中移走蓋玻片,吸走過量培養(yǎng)液,將蓋玻片放在潮濕的環(huán)境中。

          3)在蓋玻片的一角加入100 μL的染料工作液,輕輕晃動使染料均勻覆蓋所有細胞。

          4)37 ℃孵育細胞 2~20 min,不同的細胞最佳培養(yǎng)時間不同??梢?0 min作為起始孵育時間,之后優(yōu)化體系以得到均一的標記結果。

          5)吸干染料工作液,用培養(yǎng)液洗蓋玻片2~3次,每次用預溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細胞,孵育5~10 min,然后吸干培養(yǎng)基。

          4. 顯微鏡檢測

          1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS濾光器的選擇參見表1。

          2)多色染料的同時檢測,濾光器按照以下設定:

          a) DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;

          b) DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;

          c) DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005

          1 相關產(chǎn)品性質(zhì)

          產(chǎn)品名稱

          貨號

          分子量

          Ex/Em

          推薦濾光器

          DiO

          40725ES10

          881.7

          484/501 nm

          XF23-Omega, 31001-Chroma

          DiI

          40726ES10

          933.87

          550/567 nm

          XF32-Omega, 31002-Chroma

          DiD

          40758ES25

          959.91

          644/663 nm

          XF47-Omega, 31023-Chroma

          DiR

          40757ES25

          1013.39

          748/780 nm

          XF112-Omega,41009-Chroma

          HB210505

           

          400-6111-883