產(chǎn)品簡介

 

SspDI (KasI)屬于常規(guī)限制酶系列，可識別G^GCGCC序列。不同于FuniCut®系列快速內(nèi)切酶，SspDI (KasI)需要較長時間酶切以實現(xiàn)DNA底物的完全切割，但該酶仍使用FuniCut®系列限制酶的通用反應(yīng)緩沖液FuniCut® Buffer，可實現(xiàn)雙酶切。

 

產(chǎn)品信息

 

貨號	15212ES72
規(guī)格	250 U
識別位置	5'-G↓GCGCC-3' 3'-CCGCG↑G-5'
酶活	10 U/μL
反應(yīng)條件	1×FuniCut® Buffer；37℃孵育
失活條件	80℃溫育20 min
酶活定義	單位活性單位(U)是指在 50 μL反應(yīng)體系中，37℃ 1 h內(nèi)可以完全酶切1 µg的pBR322所需的酶量
同裂酶	KasI, DinI, EgeI, EheI, Mly113I, NarI, PluTI, SfoI

 

組分信息

 

組分編號	組分名稱	15212ES72
15212-A	SspDI (KasI) (10 U/μL)	25 μL
15212-B	10×FuniCut® Buffer	1 mL
15212-C	10×FuniCut® Color Buffer	1 mL

 

儲存條件

 

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

使用說明

 

1. 體系配制 

1）建議冰上操作，按如下加樣順序配制反應(yīng)體系

組分	體積
ddH2O	up to 50 μL
10×FuniCut® Buffer	5 μL
底物DNA*	1 μg
SspDI (KasI) (10 U/μL)	1 μL
Total	50 μL

*DNA 底物中應(yīng)不含苯酚、氯仿、乙醇、EDTA、洗滌劑或高濃度鹽，否則將會影響SspDI (KasI) (10 U/μL)酶活性

2) 輕柔吸打或輕彈管壁以混勻（切勿渦旋），然后瞬時離心以收集掛壁液滴。

3) 37℃孵育 1~16 h。

4) 80°C孵育20 min即可使酶失活，停止反應(yīng)，或者通過吸附柱或苯酚/氯仿純化終止反應(yīng)。

2. 不同DNA中的識別位點數(shù)

λDNA	ΦX174	pBR322	pUC57	pUC18/19	SV40	M13mp18/19	Adeno2
1	2	4	1	1	0	1	20

3. 甲基化修飾影響

Dam	Dcm	CpG	EcoKI	EcoBI
無影響	無影響	剪切受阻	無影響	無影響

4. 不同反應(yīng)緩沖液中的活性*

反應(yīng)緩沖液	FuniCut® Buffer	Thermo Scientific FastDigest Buffer	NEB CutSmart® Buffer	Takara QuickCut™ Buffer
活性	100%	<12.5%	100%	<25%

 

注意事項

 

1. 反應(yīng)體系中加入的酶體積不應(yīng)超過總體積的10%，避免酶中過多的甘油引起星號活性。

2. 限制性內(nèi)切酶存儲緩沖液中的添加劑 ( 例如甘油、鹽 ) 與底物溶液中的污染物 ( 例如鹽、EDTA 或乙醇等 ) 相同，反應(yīng)體積越小，酶切反應(yīng)抑制效應(yīng)越強。

3. 本產(chǎn)品僅作科研用途。

4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

 

 

Ver.CN20241104