高靈敏含U-Hieff Unicon? Lyo-Ready I TaqMan Multiplex qPCR Mix（含凍干保護(hù)劑）
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產(chǎn)品說(shuō)明書
FAQ
COA
已發(fā)表文獻(xiàn)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Hieff Unicon® Lyo-Ready I TaqMan Multiplex qPCR Kit 是一款采用公司新一代抗體法熱啟動(dòng) Taq 酶的熒光定量 qPCR可凍干試劑，適合于 FAM/HEX/TET/JOE/ROX 等雙標(biāo)記探針（本品也適用于 Molecular Beacon 探針），試劑包含凍干保護(hù)劑、熱啟動(dòng) Fast Taq DNA 聚合酶、dNTP 等組分，可直接凍干上機(jī)。該制品不含有 ROX 校正染料，適配各種定量 PCR 機(jī)型。
產(chǎn)品信息
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貨號(hào) |
11893ES60/ 11893ES80 |
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規(guī)格 |
100 T / 1,000 T |
組分信息
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組分編號(hào) |
組分名稱 |
11893ES60 |
11893ES80 |
|
11893 |
Lyo-ReadyTaqMan qPCR Mix |
2 mL |
20 mL |
儲(chǔ)存條件
-25~-15℃保存，有效期1年。
使用說(shuō)明
- 凍干上機(jī)體系
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組份編號(hào) |
組分 |
體積（μL） |
終濃度 |
|
11893 |
Lyo-ReadyTaqMan qPCR Mix |
20 |
1× |
|
|
Primer Mix (10 μM)* |
x |
0.1-0.5 μM |
|
|
Probe Mix (10 μM) |
x |
50-250 nM |
|
|
總體積 |
21-25 |
- |
*引物濃度可根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求適當(dāng)調(diào)整，總體積不能超過(guò)5 μL。
- 凍干程序
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步驟 |
溫度 |
設(shè)定時(shí)間 |
持續(xù)時(shí)間 |
真空度 |
|
預(yù)凍 |
-45℃ |
10 min |
60 min |
—— |
|
一次干燥階段 |
-45 ℃ |
10min |
60min |
0.01mbar |
|
-40 ℃ |
10min |
600min |
0.01mbar |
|
|
-35 ℃ |
10min |
120min |
0.01mbar |
|
|
-30 ℃ |
20min |
60min |
0.01mbar |
|
|
-20 ℃ |
20min |
60min |
0.01mbar |
|
|
-10 ℃ |
20min |
60min |
0.01mbar |
|
|
0 ℃ |
20min |
60min |
0.01mbar |
|
|
壓力升測(cè)試 |
||||
|
解析干燥階段 |
5 ℃ |
10min |
20min |
0.01mbar |
|
10 ℃ |
10min |
20min |
0.01mbar |
|
|
15 ℃ |
10min |
20min |
0.01mbar |
|
|
20 ℃ |
10min |
20min |
0.01mbar |
|
|
25 ℃ |
10min |
240min |
0.01mbar |
|
|
壓力升測(cè)試 |
||||
- 反應(yīng)擴(kuò)增體系
|
組分 |
體積（μL） |
終濃度 |
|
20 μL 體系凍干球 |
1 顆 |
1× |
|
Primer Mix (10 μM) |
x |
0.1-0.5 μM |
|
Probe Mix (10 μM) |
x |
50-250 nM |
|
模板* |
1-25 |
1× |
|
ddH2O |
up to 25 |
- |
*模板用ddH2O溶解，核酸提取試劑的洗脫液使用ddH2O。
- 參考擴(kuò)增程序
|
步驟 |
溫度 |
時(shí)間 |
循環(huán)數(shù) |
|
預(yù)變性 |
95℃ |
5 min |
1 |
|
變性 |
95℃ |
|
45 |
|
退火/延伸* |
60℃ |
30 sec |
*退火/延伸溫度可根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求適當(dāng)調(diào)整。
- 適用機(jī)型
Applied Biosystems: 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™, 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex;
Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;
Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
Roche Applied Science: LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;
Stratagene: MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™;
Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR;SLAN:SLAN-96S,SLAN-96P..
注意事項(xiàng)
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20240628
