產(chǎn)品說明書
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COA
已發(fā)表文獻(xiàn)
產(chǎn)品簡介
Anti-rabbit Tn5主要是將納米抗體與Tn5轉(zhuǎn)座酶進(jìn)行融合，可用于Multi-CUT&Tag實(shí)驗(yàn)。本產(chǎn)品適合使用兔源一抗進(jìn)行CUT&Tag實(shí)驗(yàn)。該產(chǎn)品為裸酶，需要自己組裝接頭序列。
產(chǎn)品信息
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貨號(hào) |
12594ES04 / 12594ES12 / 12594ES48 |
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規(guī)格 |
4 T / 12 T /48 T |
組分信息
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組分名稱 |
12594ES04 |
12594ES12 |
12594ES48 |
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Anti-rabbit Tn5 |
4 μL |
12 μL |
48 μL |
儲(chǔ)存條件
-25~-15℃保存，有效期1年。
使用說明
以高通量測序建庫為例，在使用前，請(qǐng)務(wù)必仔細(xì)閱讀使用說明。
- 接頭制備（序列需自備）
1）Illumina平臺(tái)參考引物名稱及序列：
Primer A-1：5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACATATCCTTCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3'
Primer A-2：5′-TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3′
Primer B：5′-GTCTCGTGGGCTCGGAGATGTGTATAAGAGACAG-3′
Primer C：5'-phos-CTGTCTCTTATACACATCT-3'
2）將Primer A、Primer B、Primer C溶解至200 μM。
3） 分別配制如下反應(yīng)體系：
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組分 |
反應(yīng)1 |
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Primer B（200 μM） |
10 μL |
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Primer C（200 μM） |
10 μL |
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total |
20 μL |
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組分 |
反應(yīng)2 |
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Primer A-1 or A-2（200 μM） |
10 μL |
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Primer C（200 μM） |
10 μL |
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total |
20 μL |
4）分別將反應(yīng)1和反應(yīng)2渦旋振蕩充分混勻，并短暫離心使溶液回到管底。置于PCR儀內(nèi)，進(jìn)行如下反應(yīng)程序：熱蓋105℃ On，94℃加熱2 min。時(shí)間到后，停止反應(yīng)程序，不要打開熱蓋，讓PCR管在PCR儀器中自然冷卻2 h，然后再于4℃中放置5 min。
5）反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)1和反應(yīng)2等體積混合，混勻。命名為Adapter Mix，-25~-15℃保存。
2．轉(zhuǎn)座子生成
1） 配置以下反應(yīng)體系：
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組分 |
體積（μL） |
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Anti-rabbit Tn5 |
5 |
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Adapter mix (50 μM) |
0.8 |
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Assemble Buffer |
4.2 |
2）反應(yīng)條件：使用移液器輕輕吹打充分混勻。置于25℃反應(yīng)1 h（熱蓋關(guān)閉）。反應(yīng)產(chǎn)物可直接應(yīng)用于建庫實(shí)驗(yàn)，或-25~-15℃保存。
注意事項(xiàng)
1. 轉(zhuǎn)座酶對(duì)溫度敏感，建議盡快完成接頭包埋，生成的轉(zhuǎn)座子可于-25~-15℃保存，有效期1年。
2. 本產(chǎn)品僅作科研用途。
3. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20240614
