產(chǎn)品簡介

T4 DNA聚合酶又名T4 gp43，是來源于T4噬菌體的DNA聚合酶，在模板以及引物存在的條件下，可以沿5'-3'方向催化合成DNA。本品T4 DNA polymerase(3'→5' exo-)是通過點(diǎn)突變D219A改造，使其3'-5'核酸外切酶活性大大降低，但保留了完整的聚合酶活性。

 

產(chǎn)品信息

貨號	14462ES70 / 14462ES80
規(guī)格	200 U / 1,000 U
酶活定義	一個活力單位即在37℃條件下，30分鐘內(nèi)催化10 nmol dNTP的摻入反應(yīng)成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量
酶保存液	20 mM Tris-HCl，200 mM NaCl，10 mM MgCl2，5mM DTT，50% Glycerol，pH 7.5
濃度	5 U/µL
失活條件	75℃，15 min

 

組分信息

組分編號	組分名稱	14462ES70	14462ES80
14462-A	T4 DNA polymerase (3'→5' exo-) (5 U/μL)  T4 DNA聚合酶(3'→5' exo-) (5 U/μL)	40 µL	200 µL
14462-B	10×T4 DNA polymerase (exo-) Buffer	0.2 mL	1 mL
14462-C	0.1% BSA (1 mg/mL)	0.2 mL	1 mL

 

產(chǎn)品應(yīng)用

1.縫隙填充(無缺口平移活性)

2.補(bǔ)平5’突出單鏈，形成平末端

3.生成無縫克隆中的5’突出端，實(shí)現(xiàn)基因和載體的互補(bǔ)配對

 

儲存條件

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

使用說明

補(bǔ)平5'突出的DNA，形成平末端

1.推薦配置應(yīng)用反應(yīng)與體系如下：

組分	體積
5'突出DNA	100 ng-1 µg
10×T4 DNA polymerase (exo-) Buffer	2 μL
T4 DNA polymerase (3'→5' exo-) (5 U/μL)  T4 DNA聚合酶(3'→5' exo-) (5 U/μL)	1 μL
2mM dNTP	2 μL
0.1% BSA (1 mg/mL)	2 μL
H2O	Up to 20 μL

2.37℃反應(yīng)30 min

3.75℃，15 min失活酶

 

注意事項  

1. 離子強(qiáng)度超過100 mM時活性將被抑制，SH基的還原劑促進(jìn)活性。

2. 活性易受模板DNA高級結(jié)構(gòu)影響，T4 gene 32 (T4 SSB)蛋白可以顯著提高其聚合酶活性。

2. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

2. 本產(chǎn)品僅用作科研用途！

 

Ver.CN20240415