產(chǎn)品描述

Hieff NGS^® Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module是針對(duì)Illumina^®高通量測(cè)序平臺(tái)文庫構(gòu)建而專業(yè)設(shè)計(jì)的DNA末端修復(fù)/A尾添加模塊，具有高效、快速、易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化的優(yōu)勢(shì)。本產(chǎn)品兼容1 ng-1 μg片段化Input DNA，可在單管內(nèi)實(shí)現(xiàn)片段化DNA的末端補(bǔ)平、5'端磷酸化和3'端加A尾反應(yīng)，得到5'末端含磷酸基團(tuán)且3'末端帶有dA突出的DNA產(chǎn)物。該產(chǎn)物無需純化，即可使用Hieff NGS^® Fast-Pace DNA Ligation Module（Cat#12607）進(jìn)行文庫構(gòu)建接頭連接反應(yīng)。

本產(chǎn)品已與Hieff NGS^® Fast-Pace DNA Ligation Module（Cat#12607），2×Hieff Canace^®Ⅱ High-Fidelity Mix for Library Amplification（Cat#12620）共同用于DNA文庫構(gòu)建，通過Illumina^®高通量平臺(tái)測(cè)序驗(yàn)證其有效性。本產(chǎn)品中提供的所有試劑組分均經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)檢，最高程度保障產(chǎn)品優(yōu)異性能與批間穩(wěn)定性。

 

產(chǎn)品組分

組分編號(hào)	組分名稱	24 T	96 T
12608-A	End Repair/dA-Tailing Buffer	144 μL	576 μL
12608-B	End Repair/dA-Tailing Enzyme	96 μL	384 μL

 

測(cè)序驗(yàn)證

本品與Hieff NGS^® Fast-Pace DNA Ligation Module（Cat#12607），2×Hieff Canace^® High-Fidelity Mix for Library Amplification（Cat#12620）共同用于DNA文庫構(gòu)建，已通過Illumina^®高通量平臺(tái)測(cè)序驗(yàn)證其有效性。

 

運(yùn)輸與保存方法

冰袋運(yùn)輸。-20℃保存，有效期1年。

 

注意事項(xiàng) 

1. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

2. 本產(chǎn)品僅用作科研用途！

 

使用方法

1. 將表1中各試劑解凍后，顛倒混勻，置于冰上備用。

2. 于無菌PCR管中配制表1所示反應(yīng)體系。

表1 末端修復(fù)/dA尾添加PCR反應(yīng)體系

名稱	體積（μL）
Fragmented   DNA	x
End Repair/dA-Tailing Buffer	6
End Repair/dA-Tailing Enzyme	4
ddH2O	Up   to 60 μL

3. 使用移液器輕輕吹打或振蕩混勻，并短暫離心將反應(yīng)液離心至管底。

4. 將上述PCR管置于PCR儀，設(shè)置表2所示反應(yīng)程序，進(jìn)行末端修復(fù)/dA尾添加反應(yīng)。

表2 末端修復(fù)/dA尾添加PCR反應(yīng)程序

溫度	時(shí)間
熱蓋105°C	On
30°C	20   min
72°C	20   min
4°C	Hold

5. 產(chǎn)物如需純化，可使用Hieff NGS^® DNA Selection Beads（Cat#12601）或AMPure XP Beads（Cat#A63880）或其他等效產(chǎn)品。

 

HB220728