產(chǎn)品描述

Hydroethidine也稱為Dihydroethidium，是一種最常用的超氧化物陰離子熒光檢測探針,能有效地檢測活性氧類。這種染料可以自由地進(jìn)入細(xì)胞，在細(xì)胞內(nèi)超氧化物陰離子作用下脫氫形成溴化乙錠。溴化乙錠可以與RNA或DNA結(jié)合產(chǎn)生紅色熒光。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)的超氧化物陰離子水平較高時，產(chǎn)生的溴化乙錠較多，紅色熒光就較強(qiáng)，反之則較弱。這樣就可以用二氫乙錠進(jìn)行超氧化物陰離子水平的檢測。

該探針已經(jīng)廣泛地用于NK細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、細(xì)胞HL60和巨噬細(xì)胞的研究，并且作為一種重要的染料用于鑒定腫瘤中細(xì)胞的增殖和低氧性。

 

產(chǎn)品性質(zhì)

產(chǎn)品名稱（Product Name）	Dihydroethidium (Hydroethidium)
CAS號（CAS NO.）	38483-26-0
分子式（Molecular Formula）	C21H21N3
分子量（Molecular Weight）	315.41
激發(fā)和發(fā)射波長（Ex/Em）	518 nm/610 nm
純度( Purity )	≥90%
外觀（Appearance）	紅色粉末
溶解性（Solubility）	溶于DMSO
結(jié)構(gòu)式（Structure）

 

運(yùn)輸和保存方法

冰袋運(yùn)輸。粉末直接保存于-20℃，有效期2年。產(chǎn)品易被氧化，建議分裝后-20℃避光密封保存，避免反復(fù)凍融，避光，保持干燥。

 

注意事項

1）請勿吸入、吞咽或者直接接觸皮膚和眼睛。

2）二氫乙錠容易氧化且見光易分解，一定要避光干燥保存。

3）在沒有細(xì)胞和外界誘導(dǎo)劑存在的情況下，溶解在培養(yǎng)液或者緩沖溶液中（PBS/ HBSS/ HEPES）的染料會發(fā)生水解，被空氣或通過光誘導(dǎo)的方式氧化，而使溶液的熒光強(qiáng)度增加。

4）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

5）本產(chǎn)品僅用于科研用途，禁止用于人身上。

 

使用方法

1. 工作液的配制
本品以粉末形式提供，使用前需要經(jīng)過短暫離心，用高純度的DMSO制備成5~10 mM儲液。分裝后避光凍存于-20℃。使用前用緩沖液（PBS/ HBSS/ HEPES）稀釋母液至所需工作濃度，通常5~20 μM就可以滿足實驗需求，具體的濃度要根據(jù)實驗需要進(jìn)行進(jìn)一步的調(diào)整。

2. 染色
將細(xì)胞和染色液按照1:1的比例進(jìn)行混合（例如，100 μL的細(xì)胞懸液加入100 μL的染色工作液），室溫或37℃孵育60 min。

3. 熒光顯微鏡觀察
二氫乙錠本身為藍(lán)色熒光，最大激發(fā)波長為370 nm，最大發(fā)射波長為420 nm，脫氫后與RNA或DNA結(jié)合產(chǎn)生紅色熒光，最大激發(fā)波長為300 nm，最大發(fā)射波長為610 nm，實際觀察時也可以使用518 nm作為激發(fā)波長。

客戶使用本產(chǎn)品發(fā)表的科研文獻(xiàn)（部分）

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