Nt.BspQI 是一種切刻內(nèi)切酶，與傳統(tǒng)的內(nèi)切酶不同，僅切割 dsDNA 底物的一條鏈，在dsDNA 底物上產(chǎn)生切口，而不完全切斷DNA分子。

 

產(chǎn)品信息

貨號(hào)	15210ES84
規(guī)格	2000 U
識(shí)別位置	5'-GCTCTTCN-3' 3'-CGAGAAGN-5'
酶活	10U/μL
反應(yīng)條件	1×Nt.BspQI Buffer；50℃孵育
失活條件	80℃溫育20 min
酶活定義	單位活性單位(U)是指在 50 μL反應(yīng)體系中，50℃ 1 h內(nèi)可以完全將1 µg的超螺旋pUC19 DNA轉(zhuǎn)化成開(kāi)環(huán)形式所需的酶量

 

組分信息

組分編號(hào)	組分名稱	15210ES84
15210-A	Nt.BspQI(10 U/μL)	200 μL
15210-B	10×Nt.BspQI Buffer	2×1 mL

 

儲(chǔ)存條件

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

使用說(shuō)明

1. 體系配制 

1）建議冰上操作，按如下加樣順序配制反應(yīng)體系

組分	體積
ddH2O	up to 50 μL
10×Nt.BspQI Buffer	5 μL
底物DNA*	1 μg
Nt.BspQI(10 U/μL)	1 μL
Total	50 μL

*DNA 底物中應(yīng)不含苯酚、氯仿、乙醇、EDTA、洗滌劑或高濃度鹽，否則將會(huì)影響 Nt.BspQI 酶活性

2) 輕柔吸打或輕彈管壁以混勻（切勿渦旋），然后瞬時(shí)離心以收集掛壁液滴。

3) 50℃孵育 30~60 min。

4) 80°C孵育20 min即可使酶失活，停止反應(yīng)，或者通過(guò)吸附柱或苯酚/氯仿純化終止反應(yīng)。

2. 不同DNA中的識(shí)別位點(diǎn)數(shù)

λDNA	ΦX174	pBR322	pUC57	pUC18/19	SV40	M13mp18/19	Adeno2
10	1	1	1	1	0	0	7

3. 甲基化修飾影響

Dam	Dcm	CpG	EcoKI	EcoBI
無(wú)影響	無(wú)影響	無(wú)影響	無(wú)影響	無(wú)影響

 

注意事項(xiàng)

1. 反應(yīng)體系中加入的酶體積不應(yīng)超過(guò)總體積的10%，避免酶中過(guò)多的甘油引起星號(hào)活性。

2. 限制性內(nèi)切酶存儲(chǔ)緩沖液中的添加劑 ( 例如甘油、鹽 ) 與底物溶液中的污染物 ( 例如鹽、EDTA 或乙醇等 ) 相同，反應(yīng)體積越小，酶切反應(yīng)抑制效應(yīng)越強(qiáng)。

3. 本產(chǎn)品僅作科研用途。

4. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20240307